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肠出血性大肠杆菌O157:H7多重PCR快速检测研究

吴家林;肖勇;凌霞;沙丹;张敬平

摘要: [目的]建立能快速、特异检测肠出血性大肠杆菌O157:H7的多重PCR技术. [方法]选用针对大肠杆菌O157志贺样毒素1、2(sh1/sh2)基因、溶血素(hlyA)基因、和0157特异性基因(rfbE)的4对引物,在同一扩增体系中进行PCR,优化反应体系,测定特异性和灵敏度,并进行了猪肉模拟样品检测. [结果]该方法扩增目的基因片段分别为348,584,250 bp和497 bp,特异性和灵敏度均高.细菌纯培养物的检测灵敏度为103cfu/ml,猪肉模拟样品37℃预增菌4 h后检测灵敏度能达到100cfu/ml. [结论]初步建立了快速、灵敏、特异地测定肠出血性大肠杆菌EHEC O157:H7的多重pCR检测技术.

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