皮质骨机械性显微损伤的形态分析及其研究价值
摘要： 目的 拟观察骨钉植入所造成的鼠皮质骨机械性显微损伤的形态特征.方法 在成年(12个月)大鼠胫骨中段钻入直径1.2 mm的含螺纹的克氏针.钻孔骨段经碱性品红染色,甲基丙烯酸甲酯包埋后作100 μm厚的横截面切片.骨切片在普通光镜、荧光显微镜和激光共聚焦显微镜下进行观察,并对显微损伤的范围进行定量分析.结果 普通光镜和荧光显微镜均可以发现针孔周围的弥散性损伤和线性裂纹,而荧光显微镜能显示普通光镜下难以分辨的染色较弱的显微损伤;激光共聚焦显微镜则具有更高的分辨率,能发现光镜下的片状损伤由很多细小的交叉裂纹组成.定量分析结果显示,损伤骨的厚度一般小于100 μm,而荧光显微镜显示的损伤骨表面比率、损伤骨厚度和损伤骨面积均大于普通光镜所示(P＜0.05).结论 螺钉植入造成的周围皮质骨显微损伤包括弥散性损伤和线性裂纹.两者均可由极微细的裂纹聚合而成.荧光显微镜由于对碱性品红有更高的敏感性,因儿能提供更为准确的定量分析结果.
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维生素D受体基因Apa I 多态性与终末期肝病患者骨代谢的相关性研究
目的 探讨维生素D受体(VDR)基因Apa I位点多态性与终末期肝病患者骨代谢的关系.方法 选择72例终末期肝病患者,并以50例原发性骨质疏松和骨量减少患者作为对照组.采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)检测VDR基因ApaI位点多态性,双能x线吸收仪(DXA)检测腰椎(L1～4)及股骨颈骨密度(BMD),并检测骨代谢相关指标,包括甲状旁腺激素(PTH)、骨钙素(BGP)、血钙(Ca)、血磷(P)、尿钙(uCa)、尿肌酐(uCr).结果 ①Apa I多态性等位基因频率分布符合Hardy-Weinberg定律,终末期肝病组基因型分布为从(12.5%)、A且(34.7%)、aa(52.8%);对照组基因型分布为从(10.0%)、Aa(36.0%)、aa(54.0%).基因型分布频率两组间差异无统计学意义(P＞0.05).②终末期肝病组中,Apa I基因型与L1～4及股骨颈BMD相关(P＜0.01),从基因型L1～4及股骨颈的BMD显著高于aa型(P＜0.05).对照组中,ApaI基因型与L1～4及股骨颈BMD均无明显相关性.③终末期肝病组中,Apa I基因型与BGP水平相关,AA基因型的BGP水平高于阻型(P＜0.05);Apa I基因型与PIH、血Ca、血P及uCa/Cr水平差异无统计学意义.结论 终末期肝病患者VDR基因Apa I位点多态性与BMD及BGP水平均相关,Apa I位点多态性与终末期肝病患者骨代谢存在相关性.
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pcDNA3-hNGF真核表达载体的构建及其在大鼠骨髓基质干细胞中的表达
目的 构建人神经生长因子(hNGF)真核表达载体pcDNA3-hNGF,检测其在大鼠骨髓基质干细胞中的表达.方法 利用PCR扩增hNGF全长cDNA,构建真核表达载体pcDNA3-hNGF,经测序证实后将其转染至大鼠骨髓基质干细胞中,利用Western blot方法检测hNGF的表达情况.结果 DNA测序结果显示构建的pcDNA3-hNGF表达载体与实验设计相符.Western blot检测显示该重组载体转染大鼠BMSCs 72h后,有hNGF的过表达.结论 构建的pcDNA3-hNGF能在骨髓基质干细胞过表达hNGF蛋白,本研究为应用神经生长因子修饰的骨髓基质干细胞进行骨折治疗奠定了基础.
关键词： 神经生长因子真核表达载体 骨髓基质干细胞 表达 -
绝经后妇女骨密度影响因素的相关性分析
目的：探讨沈阳地区绝经后妇女不同部位骨密度值与亚洲人骨质疏松自我筛查工具（ OSTA）得分、体表面积（ BS）、体重指数（ BMI）的关系，判断OSTA评分与绝经后妇女髋关节骨折风险的相关性。方法采用双能X线骨密度仪测定沈阳地区670例绝经后妇女的骨密度值（ BMD），并与OSTA得分、体表面积、体重指数（ BMl）、绝经年限进行Pearson相关性回归分析。应用WHO骨折风险因子评估工具（ FRAX）评估绝经后妇女髋关节骨折风险，采用线性图表及Pearson相关性回归分析比较OSTA评分与绝经后妇女髋关节骨折风险是否存在相关性。结果骨密度与OSTA评分、体表面积、体重指数呈线性正相关，相关性由大到小分别为OSTA评分、体表面积、体重、身高、BMI、年龄、绝经期、肥胖度；骨密度与绝经年限呈线性正相关趋势；OSTA评分与髋关节骨折风险呈负相关。结论 OSTA得分能较好的反映出绝境后妇女骨密度减低的趋势及程度，同时也能预测绝经后妇女髋关节骨折风险的程度，在临床中应对OSTA评分较低患者应采取必要的相关性治疗及干预。
关键词： 骨密度 骨折风险 OSTA Pearson相关性分析 -
中国女性前臂骨密度正常值与原发性骨质疏松症发生率的研究
本研究利用丹麦Pronosco公司生产的数码式X线片骨密度扫描仪,摄取非优势手及前臂中远1/3处X光片,测量了中国女性353人,年龄20～79岁,骨密度,峰值,年龄组为30～39岁,(BMD=0.556 SD=0.027).本实验采用降低骨峰值2.0标准差诊断为骨质疏松症,与以往使用其他仪器测定结果相似,丹麦数码式X线片扫描仪价格低廉,使用方便,准确性高,适用于发展中国家.
关键词： 女性 前臂骨密度 丹麦数码式X线片扫描仪 -
老年人血清骨硬化蛋白与冠心病及骨质疏松的相关性研究
目的 探讨老年人血清骨硬化蛋白水平与冠心病及骨质疏松的相关性.方法 入选重庆医科大学附属第二医院老年心血管科2014年10月至2015年10月因胸痛待查人院行冠状动脉造影的老年患者313例,其中诊断为冠心病的患者163例,非冠心病患者150例,取术前空腹静脉血用ELISA法测定血清骨硬化蛋白水平,同时测定骨密度及血脂、骨转换标志物等生化指标.采用多因素logistic回归模型分析骨硬化蛋白水平与冠心病发生的相关性,用多元线性回归分析影响骨硬化蛋白水平的相关因素.结果 ①老年冠心病组骨硬化蛋白水平显著低于非冠心病组[(178.035±0.636) pg/mLvs(180.576±0.608)pg/mL,P＜0.05];②多因素logistic回归提示老年患者骨硬化蛋白与冠心病发生负相关(OR=0.865,P=0.018),其中骨质疏松患者骨硬化蛋白水平升高可降低罹患冠心病的风险(OR=0.767,P=0.007),非骨质疏松患者骨硬化蛋白与冠心病无相关性(P＞0.05);③多元线性回归提示骨硬化蛋白水平与腰椎骨密度(β=0.224,P＜0.05)、Ⅰ型胶原氨基端延长肽(β=0.161,P＜0.05)、年龄(β=-0.162,P＜0.05)显著相关.结论 血清骨硬化蛋白与老年患者尤其是合并骨质疏松的老年患者冠心病发生密切相关,并可能在骨-血管轴中发挥信使作用.
关键词： 骨硬化蛋白 冠状动脉粥样硬化性心脏病 骨质疏松 -
检测破骨细胞内活性氧水平方法的实验探究与应用
目的：探究可以有效、准确且直观地检测破骨细胞内活性氧（ ROS）的方法，并应用其对破骨细胞分化过程中活性氧的变化进行检测。方法培养RAW264.7细胞系作为破骨前体细胞。控制细胞密度铺板后装载检测活性氧的2，7-双乙酸二氯荧光素（ DCFH-DA）荧光探针，分别检测阴性对照组（只加α-MEM培养基）、阳性对照组（ ROSup）、核因子κB受体活化因子配体（RANKL）组（100ng／mlRANKL）和N-乙酰左旋半胱氨酸（NAC）组（100ng／mlRANKL＋1mMNAC）破骨细胞的活性氧水平。检测方法包括使用荧光显微镜观察不同组的荧光强度并对阳性细胞计数统计和使用流式细胞仪检测不同组的荧光强度并对Mean FL1-A定量分析。结果阴性对照组与阳性对照组比较，定性的荧光照片和阳性细胞计数统计，与定量的流式细胞术统计图和Mean FL1-A统计分析，都显示阳性对照组的细胞内活性氧水平远高于阴性对照组（ P＜0.001和P＜0.001）。同时， RANKL组的活性氧水平高于阴性对照组（ P＜0.05和 P＜0.01），而 NAC组的水平较RANKL 组为低（ P＜0.001和 P＜0.001）。结论定性观察方法与定量检测方法结果均有效并且高度一致。两种方法的综合使用可以直观准确地检测破骨细胞内的活性氧。使用该方法可验证破骨细胞分化过程中活性氧的增加，并且NAC可抑制此变化。
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白芍总苷对骨关节炎软骨细胞增殖及分泌表达的影响
目的 研究白芍总苷(TGP)对人骨关节炎软骨细胞(HOCs)增殖、凋亡、分泌表达的影响及其作用机制,为白芍总苷在骨关节炎洽疗方面提供初步的实验依据.方法 组织块法培养原代人骨关节炎软骨细胞;TGP处理人骨关节炎软骨细胞并培养12、24和48 h;采用CCK-8检测细胞存活率;ELISA检测炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)以及Caspase-3表达水平;Western blotting检测Bcl-2、Bax、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、金属蛋白酶组织抑制剂-1 (TIMP-1)和核转录因子κB(NF-κB)的蛋白表达水平.结果 TGP能促进细胞增殖,并存在时间和浓度依赖性,其中8μmol/L TGP作用24 h时细胞存活率高,存在显著性差异(P ＜0.05);TGP可以显著抑制凋亡相关蛋白Bax和Caspase-3表达,并促进抗凋亡蛋白Bcl-2表达(P＜0.05);TGP可以显著降低与软骨退化相关的MMP-13/TIMP-1比值(P＜0.05);TGP可以抑制炎症因子TNF-α、IL-6和IL-8表达(P ＜0.05);TGP可以抑制NF-κB的表达(P＜0.05).结论 TGP促进人骨关节炎软骨细胞增殖,抑制细胞凋亡、降低MMP-13/TIMP-1比值以及炎症因子的分泌,其机制可能是与抑制NF-κB的表达相关.
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中国北方老年人血浆维生素D水平的季节变化
目的了解中国北方老年人群血浆维生素D水平的季节变化.方法对85名健康老年人,男44名,(66.9±3.8)岁,女41名,(63.8±3.8)岁,用放射免疫分析法测定春秋两季血浆25(OH)D和继发性甲状旁腺素(PTH)含量.结果无论男女秋季血浆25(OH)D水平明显高于春季(男性高52.7%,女性高89.4%,P＜0.05),同一季节内男女间差异无显著性.维生素D缺乏率:女性:春季为63.4%,秋季为7.3%.男性:春季为65.9%,秋季没有缺乏者.春季维生素D缺乏率显著高于秋季(P＜0.05).男女秋季血浆PTH浓度明显低于春季(男性低29.2%,女性低20.6%,P＜0.05).老年女性春季血浆25(OH)D浓度和血浆PTH浓度之间呈负相关(r=-0.426,P＜0.001).结论该人群血浆25(OH)D和PTH有明显的季节变化,春季血浆25(OH)D水平很低.
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探讨体重指数对绝经后老年妇女不同部位骨密度的影响
目的 分析不同体重指数患者的腰椎和股骨近端、股骨颈、Ward's三角区的骨密度及T值评分,探讨体重指数对绝经老年妇女不同部位骨密度的影响.方法 以我院225例年龄均为60以上的绝经老年妇女为研究对象,计算体重指数将患者分为体瘦组、正常组和肥胖组,检测患者腰椎和股骨近端、股骨颈、Ward's三角区的骨密度,分析各部位骨密度变化与体重指数的关系.结果 体瘦组的患者各部位骨密度明显低于正常和肥胖组的患者,体瘦组与正常组或肥胖组比较,腰椎(L1 ～L4)、股骨颈、股骨近端、Ward's三角区的骨密度均有显著的差异(P＜0.01)；正常组与肥胖组比较,仅L3和L4的骨密度有显著的差异(P＜0.05),其余部位的骨密度无显著的差异(P＞0.05).结论 体重和体重指数是影响骨密度的一个重要因素,体重和体重指数与绝经老年妇女不同部位的骨密度存在一定的相关性,低体重指数的绝经老年妇女,骨丢失而引起的骨量减少明显,易发生骨质疏松.
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rhBMP-2/CPC强化骨质疏松椎体力学强度的实验研究
目的 观察人重组骨形态发生蛋白-2复合磷酸钙骨水泥(recombinant human bonemorphogenetic protein-2/calcium phosphate cement，rhBMP-2/CPC)强化骨质疏松绵羊腰椎生物力学强度的动态效果。方法 成年雌性绵羊12只行去势手术后饲养1年，测量去势前后腰椎骨密度。取L1-L6为实验对象，空白组不给予任何处理；CPC组中，经椎弓根向椎体内注射CPC(2.0 ml)；rhBMP-2/CPC组中，经椎弓根向椎体内注射rhBMP-2/CPC(2.0 ml)。于术后1天、6周、12周和24周四个时间点各随机处死3只绵羊，对椎体行压缩实验，分别测量各组中椎体的大压缩应力(σult)和能量吸收值(EAV)，对比分析同一时间点不同方法 之间和同一方法 的不同时间点之间的力学指标。结果 去势1年后绵羊腰椎骨密度显著下降，差异有显著性(P＜0.05)，骨质疏松绵羊模型建立成功。在术后各时间点，CPC组和rhBMP-2/CPC组的σult和EAV均显著高于空白组(P＜0.05)；术后1天、6周和12周，rhBMP-2/CPC组和CPC组之间的差异无统计学意义(P＞0.05)，而rhBMP-2/CPC组中24周的σultt显著高于CPC组(P＜0.05)。空白组和CPC组中σult各时间点之间的差异均无显著性(P＞0.05),而rhBMP-2/CPC组中24周的rult显著高于该组其他三个时间点(P＜0.05)。结论 rhBMP-2/CPC不仅能提高骨质疏松椎体的即时强度，还能很好的维持椎体的动态力学强度和进一步提高椎体的远期强度，为脊柱达到坚强骨性融合提供了良好的力学环境。
