您当前的位置：

endostatin基因重组腺病毒的构建及在人肺腺癌细胞的表达

魏玲；宋现让；王兴武；宋宝；郑燕

关键词：肺癌腺病毒内皮抑素基因治疗

摘要： 目的利用AdEasy系统构建鼠内皮抑素(ES)基因重组腺病毒Ad.ES,并观察其在人肺腺癌细胞SPCA-1的表达.方法采用酶切、连接和转化等方法,将质粒pcDNA3.ES中的ES片段插入腺病毒穿梭质粒载体pAdTrack.CMV,构建重组腺病毒穿梭质粒载体pAdTrack.CMV.ES,经Pme Ⅰ酶切线性化后与含腺病毒基因骨架的质粒载体pAdEasy-1在细菌BJ5183内进行同源重组得到腺病毒质粒pAd.ES,重组腺病毒质粒经PacⅠ酶切后,转染人胚肾293细胞包装成腺病毒颗粒Ad.ES,将病毒上清反复感染293细胞获得高滴度病毒,应用氯化铯(CsCl)梯度离心的方法纯化病毒,利用AdEasy系统上的绿色荧光蛋白(GFP)标签测定重组腺病毒的功能滴度.用2 MOI重组腺病毒Ad.ES体外转导SPCA-1细胞48h,流式细胞仪检测GFP表达阳性率,ELISA法测定细胞培养上清液中ES的含量.结果双酶切证实重组腺病毒穿梭载体pAdTrack.CMV.ES质粒构建正确,卡那霉素抗性筛选和Pac Ⅰ酶切鉴定证实腺病毒重组质粒构建成功.Pac Ⅰ酶切线性化的重组质粒导入293细胞3d,约20%的细胞表达GEP,回收病毒重复感染293细胞,CsCl梯度离心纯化终获得约5.6×1010TU/mL滴度的重组病毒.Ad.ES体外转导SPCA-1细胞48h后,细胞GFP阳性率为93%,细胞培养上清液中ES的含量较Ad.GFP感染组和阴性对照组明显增加(P＜0.05).结论应用新型腺病毒载体AdEasy系统可在短期内制备同时表达GFP和ES的重组腺病毒,Ad.ES体外感染人肺腺癌细胞SPCA-1可显著提高ES表达,为进一步研究抗血管生成治疗肺癌奠定了基础.

同期刊相关文献推荐

社区高血压人群的监控管理及治疗研究

作者：王湘富；胡良；刘春江；章建乐；曹梅芳期刊：中国现代医学杂志1999年03期

该文报告1 026例高血压患者在社区接受监控管理治疗,并与995例高血压患者采用随意治疗进行对照研究,连续随访观察10年,结果:监控管理治疗组累计减少心血管事件发生59.96%,心血管事件发生的平均年龄较对照组明显推后6.9岁.说明在社区对高血压人群实施监控管理治疗是保证高血压患者长期有效治疗的方法,值得进一步推广.

关键词：社区高血压人群监控管理治疗心血管事件
糖尿病并脂肪肝的超声诊断及其与血脂含量相关性分析

作者：荣秀花期刊：中国现代医学杂志1999年03期

测定了62例Ⅱ型糖尿病患者的血脂含量并观察了肝脏超声的显像.结果发现,肥胖型糖尿病患者存在明显脂代谢障碍,血胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)与对照组相比差异显著(P＜0.01);与非肥胖型糖尿病相比,血TG明显增高(P＜0.01).38例肥胖型糖尿病患者中36例并有脂肪肝.说明脂肪肝除与高血糖因素有关外,还与肥胖、高TG血症密切相关.观察还发现,肥胖型糖尿病患者大血管病变的发生率也明显高于非肥胖型(P＜0.01).

关键词：超声显像糖尿病脂肪肝肥胖血脂
老年人颅内血肿的诊治特点

作者：柯以铨；徐如祥；李新运期刊：中国现代医学杂志1999年03期

该文报告14年间收治的60岁以上老年人创伤性颅内血肿72例的临床特征和诊治体会.其中67例进行了手术治疗,手术死亡率达40.3%,分析了导致高死亡率的可能因素,强调早期手术治疗、积极防治并发症及加强术后观察的重要性.

关键词：颅脑损伤颅内血肿老年人外科治疗
早期心肌再梗塞27例临床分析

作者：陈寰期刊：中国现代医学杂志1999年03期

为早期心肌再梗塞的诊治提供一些实践经验,总结了27例再梗塞患者的诊断依据、临床资料、治疗方法和结果.诊断依据为再发胸痛、ECG变化和血清酶再升高.再梗塞发病率为7.6%,其严重并发症和住院病死率都较无再梗塞患者显著增高,是影响AMI预后的重要因素.确诊后按初始心肌梗塞同样地进行监测和治疗.有适应证的远离原梗塞部位的再梗塞可经静脉用尿激酶溶栓治疗.治愈18例,死亡9例,均死于严重并发症.加强对AMI患者的观察和监测,是发现再梗塞的关键;处理AMI后的低血压、严重心律失常和心力衰竭是防治梗塞延展的重要措施.

关键词：急性心肌梗塞再梗塞
"带盖"结肠造口术的临床应用

作者：彭洪云；熊本京期刊：中国现代医学杂志1999年03期

为了提高永久性结肠造口患者的生活质量,设计了一种以舌状皮瓣与造口结肠舌状上肠瓣缝合在一起为"盖"的结肠造口术.结果:19例病人术后没有并发症、皮瓣覆盖造口,排便通畅,开盖容易,感觉满意.结论:"带盖"结肠造口术设计合理,手术操作易行,患者生活质量好.

关键词：舌状皮瓣带盖结肠造口术
Hoffer和Kaufer手术治疗儿童脑瘫痉挛性马蹄内翻足畸形

作者：刘宏；刘昆；梅海波；刘朝阳期刊：中国现代医学杂志1999年03期

从1989～1995年对19例脑瘫患儿共32足施行Hoffer和Kaufer手术.术后平均随访5年6月(1年9月～5年7月),Hoffer手术4足,结果优2足、良1足、差1足;Kaufer手术25足,结果优17足、良5足、差3足.倘若除外Hoffer和Kaufer各有1例共4足,其畸形纠正,因无平衡功能属差外,临床效果满意.对在无步态肌电图情况下如何选择手术方式进行了讨论.建议4岁以下儿童不宜行此手术.

关键词：大脑痉挛性瘫痪马蹄内翻足 Hoffer手术 Kaufer手术
益脂灵颗粒降脂作用的实验研究

作者：邢之华；赵劲风；李家邦；方云祥；孟渠成；刘卫平期刊：中国现代医学杂志1999年03期

用该所研制的益脂灵颗粒观察其对大白鼠及家兔高脂血症模型的作用,结果表明有显著的降低血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)及低密度脂蛋白(LDL)的作用.

关键词：益脂灵颗粒/药理学血脂过多疾病模型
骨巨细胞瘤组织中Rb,c-erbB-2蛋白表达的研究

作者：王大平；董忠根；李贺君期刊：中国现代医学杂志1999年03期

应用免疫组化方法研究58例骨巨细胞瘤(GCTB)组织切片的Rb、c-erbB-2蛋白表达及意义.GCTB组织中Rb蛋白表达阴性者共43例(74%),c-erbB-2蛋白过度表达者18例(31%).Rb、c-erbB-2蛋白在病理分级各级中的表达无显著差异,在Enneking外科分期各期中的表达亦无显著差异.58例GCTB组织中,Rb、c-erbB-2蛋白至少一个表达异常者共48例(83%),两者均异常者13例(22%).结果提示:Rb蛋白失活、c-erbB-2蛋白过度表达与GCTB的发生可能有关;部分GCTB发生可能与Rb蛋白及c-erbB-2蛋白过度表达的协同作用有关.

关键词：骨巨细胞 Rb蛋白 C-erbB-2蛋白癌基因免疫组织化学
呼吸科病房空气检测与对策

作者：郑小华期刊：中国现代医学杂志1999年03期

该文对呼吸病房空气进行了检测,结果表明污染的空气中存在有:绿脓杆菌、表皮葡萄球菌、不动杆菌、腐生葡萄球菌、克雷白菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等.其中以绿脓杆菌检出率高,而此菌又是威胁呼吸系统疾病患者严重的病菌,根据检测采用有效的预防措施,以降低了医院感染的危险因素.

关键词：呼吸疾病医院感染对策
新生儿呼吸机应用中肺不张的预防措施

作者：林春旺期刊：中国现代医学杂志1999年03期

该院儿科新生儿病房自1996年6月～1997年12月使用新一代人工呼吸机抢救危重新生儿,在机械通气中采取了一系列措施预防肺不张,在治疗的18例新生儿中,仅1例发生肺不张,发生率5.56%.具体预防措施:选用比一般略细不带密封气囊的气管导管;气管内冲洗及气管内温湿化;加强胸部物理治疗;机械通气加用PEEP,以防呼气终末肺泡萎陷;撤机、拔管前后的处置(静脉推注地塞米松、吸痰、雾化、拍背、翻身)等.

关键词：新生儿呼吸机肺不张预防