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特异性抗肝癌单链抗体的表达及意义

丁世华;杨冬华;卢筱华;汤绍辉;叶刚

摘要: 目的 优化表达条件,获取有生物活性的特异性抗肝癌单链抗体.方法 以ITPG诱导大肠杆菌HB2151表达可溶性抗肝癌单链抗体;利用HiTrap Anti-E Tag亲和层析柱对阳性克隆表达的单链抗体进行纯化;纯化后的单链抗体进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,以Bradford检测法测定其浓度,ELISA法及免疫组化法鉴定其生物学活性;结果 在培养基中加入0.4 M蔗糖,以IPTG 1 mmol/L于30℃诱导12 h,抗肝癌scFv可溶性表达量较多,纯化后可溶性抗肝癌scFv含量为325 μg/L.纯化的抗肝癌scFv与肝癌组织、肝癌细胞抗原特异性结合,与肝硬化、正常肝组织无阳性结合.结论 成功获得具有生物活性的特异性抗肝癌单链抗体,为肝癌靶向诊断及治疗的开发与应用奠定了基础.

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