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雨蛙肽联合脂多糖诱导重度急性胰腺炎体外细胞模型钙通道的变化

唐曦平;唐国都;方春芸;梁志海;张露艺;覃蒙斌

摘要: 目的 应用雨蛙肽联合脂多糖诱导AR42J细胞构建重度急性胰腺炎体外细胞模型,研究该模型构建前后细胞内钙通道的变化.方法 体外培养大鼠AR42J细胞,实验分组设对照组、雨蛙肽处理组、雨蛙肽+脂多糖处理组.采用RT-PCR检测细胞Cav1.3、Cav2.1、Cav2.2、Car3.1、Cav3.2 mRNA表达;Western blotting检测细胞Cav1.3、Cav2.1、Cav3.1蛋白表达水平;以荧光探针Fluo-4-AM标记细胞内游离钙,激光共聚焦扫描显微镜观察[Ca2+]i的变化.结果 药物处理组Cav1.3、Cav2.1、Cav3.1 mRNA及蛋白表达水平较对照组均明显增高(mRNA:F =23.392,46.85,61.338;蛋白:F=33.798,43.588,79.467;P <0.01),雨蛙肽+脂多糖处理组与雨蛙肽处理组相比较上述检测指标的mRNA表达量也显著增高(P<0.01);药物处理组与对照组Cav2.2、Cav3.2mRNA表达水平无明显差异(F=0.175、0.316;P >0.05);激光共聚焦显微镜观察结果显示药物处理组比对照组[Ca2+]i升高(F =638.984,P<0.01),雨蛙肽+脂多糖处理组较雨蛙肽处理组[Ca2+]i也显著升高(P<0.01).结论 胰腺腺泡细胞内钙超载在雨蛙肽联合脂多糖诱导的重度AP细胞模型发生发展的机制中具有重要作用.

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