中药小通草质量控制的探索性研究
摘要： 目的 通过对中药小通草现行质量标准检验及探索性研究,探索新的质量控制方法并提出相关建议.方法 在现行国家质量标准检验基础上,开展了薄层鉴别,总灰分测定和砷、汞含量测定3个探索性试验.结果 小通草薄层鉴别结果与2015版药典现行标准检验结果相一致;掺杂增重后的小通草总灰分(13.92％～28.42％)显著高于正品小通草的总灰分(1.72％～2.98％);建立了原子荧光光谱法测定小通草中砷、汞含量的方法.该法对砷、汞的低检出限分别为0.015 5 ng·mL-1和0.009 4 ng·mL-1,加样回收率(n=9)分别为102.3％和103.7％.结论 薄层鉴别法适用于小通草正伪品的鉴别,可作为现行质量标准方法的补充之一;通过总灰分测定能够鉴别掺杂小通草;砷、汞含量测定方法的建立可为保障小通草安全性提供参考.
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依诺沙星滴眼液抑菌剂考察
目的 建立测定依诺沙星滴眼液中抑菌剂硫柳汞、羟苯乙酯和苯扎溴铵的HPLC含量测定方法,并对这3种抑茵剂的稳定性进行考察.方法 选用C18柱,以1％三乙胺溶液(用磷酸调节pH值至3.0)为流动相A,以甲醇为流动相B,进行梯度洗脱;检测波长苯扎溴铵为218nm,羟苯乙酯和硫柳汞为262 nm,进样量为20 μL.同时考察抑菌剂的稳定性.结果 羟苯乙酯、硫柳汞和苯扎溴铵之间的分离度分别为19.7,48.7.硫柳汞在9.1～151.4 μg·mL-1、羟苯乙酯在2.1～41.2 μg.mL-1、苯扎溴铵在21.8～218.0 μg·mL-1内均呈现良好的线性关系(r=0.999,1.000,0.999),其检出限分别为1.4,1.2,13.1 ng.在高温条件下,硫柳汞和羟苯乙酯含量均略有下降;在紫外光照条件下,硫柳汞含量下降明显;苯扎溴铵几乎不受高温和紫外光照的影响.结论 该方法灵敏度高,能够有效评估滴眼液中抑茵剂的含量.
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柱前衍生-HPLC测定白消安在家兔体内的药动学参数
目的 建立测定家兔血清中白消安浓度和家兔体内药动学特征的柱前衍生化HPLC.方法 以1,5-戊二醇二甲磺酸酯为内标,二乙基二硫代氨基甲酸钠为衍生化试剂.流动相:甲醇-水(54∶46),流速:0～20 min(1.0 mL·min-1),20～27 min(1.3 mL·min-1).柱温:30℃,检测波长:280 nm,进样量:25 μL.家兔分别以灌胃、静注的方式给予白消安,按本法测定血药浓度,DAS 3.0计算药动学参数.结果 白消安的血药浓度在0.1～3.4 mg·L-1内线性关系良好(r=0.999 7),日内、日间精密度以及样品稳定性符合中国药典2015年版的规定.低、中、高浓度的萃取回收率分别为90.0％,89.0％,91.5％.不同给药途径获得的药动学参数:单剂量口服t1/2=(2.26±0.66)h,k=(0.33±0.12)·h-1,ka=(2.54±1.3)·h-1,AUC0-t=(1.95±0.18)h·mg·mL-1;单剂量静脉注射t1/2=(1.53±0.09)h,k=-(0.45±0.03)·h-1,AUC0-∞=(4.38±0.26)h·mg·mL-1.多剂量口服后(-Css)=(0.48±0.03)mg·mL-1,AUC0-τ=(3.87±0.26)h·mg·mL-1.结论 建立的柱前衍生-HPLC法适用于白消安血药浓度测定及药动学研究,不同给药途径的药动学参数为临床药动学研究提供了依据.
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GC测定鱼肝油中EPA和DHA含量
目的 建立加校正因子GC内标法测定鱼肝油中EPA和DHA含量.方法 样品经皂化、甲酯化、异辛烷提取,采用DB-23(30 m×0.25 mm,0.25 μm)毛细管柱,FID检测器,程序升温(起始温度170℃,以1℃.min-1的速率升温至225℃,保持5 min),进样口温度为250℃,检测器温度为280℃,高纯N2为载气,流速为1.0 mL·min-1,分流比为100:1,二十三烷酸(C23∶0)甲酯为内标物.结果 EPA、DHA的峰面积比和浓度比分别在0.048 7～9.740 mg·mL-1,0.051 0～10.206 mg·mL-1内呈良好的线性关系(r=1.000 0),EPA、DHA的平均回收率分别为98.7％(RSD=0.98％),99.4％(RSD=1.34％).结论 该方法简便、准确、重复性好,可用于鱼肝油的质量控制和掺假鉴定.
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HPLC双波长法同时测定炎热清片中6种有效成分的含量
目的 建立HPLC双波长法同时测定炎热清片中龙胆苦苷、栀子苷、芒果苷、黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素6种成分的含量.方法 采用Agilent TC-C1 8色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇∶0.2％磷酸水溶液(梯度洗脱),柱温为35℃,流速为1.0 mL·min-1,检测波长0～20 min为254 nm,同时检测龙胆苦苷、栀子苷、芒果苷,20～50 min为280 nm,同时检测黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素.结果 龙胆苦苷、栀子苷、芒果苷、黄芩苷、黄苓素、汉黄芩素分别在18.92～189.2 ng(r=0.999 9),107.44～1 074.4 ng(r=0.999 9),9.82～98.2 ng(r=0.999 9),767.68～7 676.8 ng(r=1.000 0),100.94～1 009.4 ng(r=0.999 9),49.84～498.4 ng(r=0.999 9)线性良好,平均回收率(n=9)分别为98.31％,98.35％,98.40％,98.03％,98.46％,98.24％,RSD分别为0.4％,0.3％,0.3％,0.4％,0.4％,0.3％.结论 该方法灵敏、简便、准确,可用于炎热清片的质量控制.
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补肝散不同分离组份抗抑郁活性筛选
目的 对补肝散醇提物不同分离组份的抗抑郁活性进行筛选.方法 采用慢性不可预知温和应激(chronicunpredictable mild stress,CUMS)对小鼠进行为期8周的造模,造模4周后,分别以盐酸帕罗西汀(paroxetine hydrochloride,PX)、补肝散醇提物、石油醚(A)、二氯甲烷(B)、乙酸乙酯(C)及正丁醇(D)4个分离组份进行为期4周的灌胃治疗,考察各组小鼠的行为学及脑内神经递质含量的变化.结果 连续给药4周(造模8周)后,PX组(0.026 g·kg-1)、补肝散醇提物组(1.92 g·kg-1)及其分离组份C(0.232 g·kg-1)、D(1.04 g·kg-1)和B(0.160 g·kg-1)组均能明显逆转模型小鼠的抑郁表现如糖水偏好率下降、强迫游泳不动时间延长等抑郁症状.能不同程度地增加其脑内额叶皮质中5-羟色胺和多巴胺的含量,其中PX、醇提物及分离组份C的作用更为明显(与模型组比较,P＜0.05或＜0.01).结论 补肝散醇提物的抗抑郁活性部位主要集中于乙酸乙酯和正丁醇分离组份,其次是二氯甲烷分离组份.
关键词： 补肝散 分离组份 慢性不可预知温和应激(CUMS) 单胺类神经递质 抗抑郁 -
HPLC测定沅江产芦笋中3种酚酸和6种黄酮类成分含量
目的 建立同时测定沅江产芦笋中原儿茶酸、绿原酸、香草酸、柚皮苷、芦丁、槲皮素、木犀草素、山奈酚、芹菜素含量的HPLC.方法 采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.1％甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,双波长检测(酚酸:283,327 nm;黄酮:283,335 nm),流速1 mL·min-1,柱温35℃,进样量为10 μL.结果 3种酚酸及6种黄酮分别在25 min和50 min内分离,线性范围为14.8～500 μg·mL-1(r=0.999 0～0.999 7),检测限0.006 3～0.053 9 μg·mL-1,定量限0.021 1～0.179 7 μg·mL-1,加样回收率为98.73％～102.44％,RSD为1.27％～2.20％(n=6).结论 该方法准确灵敏、重复性好,可用于检测芦笋中9种成分含量.
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N-乙酰半胱氨酸对糖氧剥夺诱导星形胶质细胞损伤的抑制作用及机制研究
目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)对糖氧剥夺(oxygen and glucose deprivation,OGD)诱导的星形胶质细胞损伤过程中AKT信号通路的影响及其意义.方法 以原代培养的星形胶质细胞建立OGD模型,并分为4组:对照组,OGD组,NAC组和NAC+ AKT特异性抑制剂MK-2206组(NAC+MK-2206组);细胞培养24 h后,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率、流式细胞仪技术分析细胞凋亡比例,试剂盒检测细胞内SOD活性和丙二醛(MDA)含量,蛋白免疫印迹法检测细胞内AKT、磷酸化AKT(p-AKT)、mTORC1、磷酸化mTORC1(p-mTORC1)、胞浆型磷脂酶A2(cLPA2)、caspase3及Bcl-2的表达水平.结果 与OGD组相比,NAC组的细胞存活率,p-AKT、p-mTORC1及Bcl-2表达和SOD活性增加,细胞凋亡比例,cPLA2、caspase3表达,MDA含量降低.与NAC组相比,NAC+MK-2206组的细胞存活率,p-AKT、p-mTORC1及Bcl-2表达和SOD活性降低,细胞凋亡比例、cPLA2、MDA含量、caspase3表达增加.结论 NAC缓解OGD诱导AKT信号通路抑制作用,降低cPLA2诱导细胞凋亡作用.
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田口设计筛选硝苯地平喷雾干燥分散体的处方研究
目的 考察喷液处方对硝苯地平喷雾干燥分散体(spray dried dispersion,SDD)的表征和非漏槽条件下溶出度的影响.方法 采用minitab DOE(design of experiment)中的田口设计(Taguchi design)方法,以120 min以内的溶出度曲线下面积(AUC0～120min)及120 min时的溶出浓度和大浓度的比值(C120/Cmax)为评价指标,考察载体材料的种类和用量及喷雾溶液的固含量对硝苯地平SDD的药物存在状态和体外溶出度的影响.结果 硝苯地平与聚合物的比例对固体分散体中药物的存在状态和体外溶出度均有显著影响,固含量对结果影响较小.以共聚维酮为载体材料时,可以获得比醋酸羟丙甲基纤维素琥珀酸酯(HPMCAS)更高的大溶出浓度(Cmax),但是HPMCAS的抑制药物重结晶的效果明显优于共聚维酮,其中药物-HPMCAS LG 1∶4时可以获得大的Cmax和AUC0～120min.结论 硝苯地平与HPMCAS LG按照1:4的比例配成固含量10％的溶液进行喷雾干燥,可以制得溶出度显著改善的SDD.
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依达拉奉软膏的处方筛选及体外透皮性能研究
目的 考察依达拉奉软膏体外皮肤渗透性,筛选软膏剂佳处方.方法 以大鼠离体皮肤作为渗透屏障,采用Valin-Chien双室渗透扩散池,以HPLC测定依达拉奉的浓度,考察依达拉奉含量、环糊精的型号和含量以及月桂氮卓酮用量对依达拉奉软膏剂经皮渗透性的影响.结果 软膏剂处方的佳组合为6.0％依达拉奉,8.0％月桂氮卓酮,3.0％β-环糊精,依达拉奉12h累积渗透量平均值可达(1 215.88±27.59)μg·cm-2,平均渗透速率为(103.69±7.39)μg·cm-2·h-1,结论 软膏剂具有较好的皮肤渗透特性,有望成为依达拉奉新的给药剂型.
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PVC/PE/PVDC固体药用复合硬片PVDC涂布量测定
目的 建立一种测定聚氯乙烯/聚乙烯/聚偏二氯乙烯(PVC/PE/PVDC)固体药用复合硬片PVDC涂布量的方法.方法 裁取10 cm×10 cm的样品5片,将样品先在丙酮中浸泡,分离得到PVC层和PE/PVDC复合层.将PE/PVDC复合层于80℃中干燥2h后,于23℃放置4h,精密称定.再将PE/PVDC复合层在四氢呋喃中浸泡,使PVDC层溶解在四氢呋喃溶液中,得到PE膜层,于80 ℃中干燥2h后,于23℃放置4h,精密称定,前后2次差值即为PVDV质量(g).后计算PVDC涂布量(以g·m-2表示).结果 5批样品PVDC涂布量测定结果与标示涂布量均一致,且偏差均在±5％之内.结论 该方法准确、灵敏,适用于PVC/PE/PVDC固体药用复合硬片PVDC涂布量的测定.
关键词： PVC/PE/PVDC固体药用复合硬片 PVDC涂布量 测定
