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抗Stat3多克隆抗体的制备和其在乳腺癌诊断中的应用

李宏芬;单保恩;陈晶;董青;王晓玲;王永军;陈兴;董金琢;马洪

摘要: 目的:制备兔抗信号转导与转录激活因子3(Stat3)抗体,分析其在乳腺癌诊断中的价值.方法:应用人工重组小鼠Stat3蛋白,免疫雄性家兔制备抗Stat3抗体;用免疫印迹法分析检测抗Stat3抗体的纯度和特异性;应用免疫组化染色法检测65例乳腺癌和30例正常乳腺组织中Stat3蛋白的表达.结果:用Stat3蛋白免疫家兔被免疫6 wk后,其血清中抗Stat3抗体效价>1∶ 256,000(A450 nm=0.40);SDS-PAGE和免疫印迹分析均在分子质量(Mr)92 000处有明显的带;65例乳腺癌组织的细胞浆和细胞核中,Stat3蛋白表达量在不同的组织学分级之间有统计学差异(P<0.05).结论:高效价和特异性强的抗Stat3抗体被成功制备. 该抗体可用于乳腺癌组织细胞Stat3蛋白表达的检测.

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