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成骨生长肽对绝经后骨质疏松患者骨髓间充质干细胞的体外作用及机制

黄显贵;李熙;张驰

摘要: 目的 研究成骨生长肽(OGP)对体外培养的来源于绝经后骨质疏松患者的骨髓间充质干细胞的成骨和成脂肪分化能力的影响,探讨OGP治疗绝经后骨质疏松症的作用机制.方法 分离培养绝经后骨质疏松患者的骨髓间充质干细胞(BMSCs),按照加入OGP浓度的不同分别分为A组(健康成人)、B组(患者)、C组(10-7 mol/L OGP)、D组(10-9 mol/L OGP)、E组(10-11 mol/L OGP),倒置相差显微镜观察各组细胞的生长情况和形态特征,MTT法测量细胞增殖率的变化,RT-PCR定量检测成骨标记物[碱性磷酸酶(ALP)、I型胶原(COL-1)、骨钙素(OC)]及成脂肪标记物[脂蛋白脂酶(LPL),脂肪细胞结合蛋白-2(AP-2),瘦素(Leptin)]及骨保护素(OPG)、可溶性细胞核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)的mRNA含量,Western blot定量检测成骨标记物、成脂肪标记物及OPG、RANKL的蛋白表达.结果 与A组比较,B组成骨标记物、OPG及RANKL mRNA和蛋白表达量较低(P<0.05),成脂肪标记物mRNA和蛋白表达量较高(P<0.05).与B组比较,加入不同浓度的OGP后,C、D、E组的成骨标记物、OPG及RANKL mRNA和蛋白表达量显著上升(P<0.05),成脂肪标记物mRNA和蛋白表达量显著下降(P<0.05);与C组相比,D、E两组成骨标记物、OPG及RANKL mRNA和蛋白表达量显著上升(P<0.05),成脂肪标记物mRNA和蛋白表达量显著下降(P<0.05),E组上述指标与D组及A组之间无显著性差异(P>0.05).结论 相比较加入10-7、10-11 mol/L OGP,加入10-9mol/L OGP对绝经后骨质疏松患者的BMSCs的改善效果佳,能够促进BMSCs增殖,向成骨方向分化,并抑制向成脂肪方向的分化,进而促进骨-脂肪平衡.

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