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调补肺肾三方对香烟烟雾提取物和脂多糖刺激人中性粒细胞释放活性氧及弹性蛋白酶的影响
目的:分析调补肺肾(补肺益肾、补肺健脾、益气滋肾)三方对香烟烟雾提取物( CSE )和脂多糖( LSP)刺激人中性粒细胞释放活性氧( ROS)及弹性蛋白酶( NE)的影响。方法2014年9月—2015年12月,将常规饲养1周的普通级日本大耳白兔96只按照随机数字表法分为正常组、补肺益肾组、补肺健脾组、益气滋肾组,24只/组。补肺益肾组、补肺健脾组、益气滋肾组大耳白兔分别采用补肺益肾方剂、补肺健脾方剂、益气滋肾方剂灌胃,正常组采用等量的0.9%氯化钠溶液灌胃,4组均于第7次灌胃后取腹主动脉血,分离血清,-70℃保存备用。取来自河南中医药大学健康成年男性(年龄20~25岁)志愿者外周血,分离人中性粒细胞。 CSE刺激下,将人中性粒细胞分为正常对照组(加20%的正常组兔血清), CSE模型组(加20%的正常组兔血清+10%CSE),补肺益肾血清组、补肺健脾血清组、益气滋肾血清组(分别添加20%相应的含药兔血清+10%CSE)。 LPS刺激下,将人中性粒细胞分为正常对照组(加20%的正常组兔血清), LPS模型组(加20%的正常组兔血清+2μg/ml LPS),补肺益肾血清组、补肺健脾血清组、益气滋肾血清组(分别添加20%相应的含药兔血清+2μg/ml LPS)。分别采用流式细胞仪和酶联免疫吸附实验( ELISA)法检测各组ROS活性、 NE水平。结果与正常对照组比较, CSE模型组、 LPS模型组ROS活性增强, NE水平升高(P<0.05)。与CSE模型组比较,补肺益肾血清组ROS活性减弱(P<0.05),补肺益肾血清组、补肺健脾血清组、益气滋肾血清组NE水平均降低( P<0.05)。与LPS模型组比较,补肺益肾血清组、益气滋肾血清组ROS活性减弱(P<0.05);补肺健脾血清组、益气滋肾组血清组NE水平降低(P<0.05)。结论调补肺肾三方含药血清对CSE、 LPS刺激下人中性粒细胞释放ROS和NE水平均有影响; CSE刺激下,补肺益肾方含药血清降低ROS活性及NE水平的效果好; LPS刺激下,益气滋肾方含药血清降低ROS活性氧及NE水平的效果好。