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三色荧光标记鉴定早孕蜕膜及外周免疫细胞组成
目的 建立早孕妇女蜕膜免疫细胞高纯度的分离方法,流式细胞术多色荧光直接标记分析早孕蜕膜及外周血主要免疫细胞的构成比.方法 经胶原酶消化、Percoll密度梯度离心、短期培养结合的方法分离纯化蜕膜免疫细胞,采用三色、双色及单色荧光直接标记流式细胞术分别检测早孕妇女和对照组中蜕膜、外周血CD3-CD56+CD16-和CD3-CD56+CD16+NK细胞、NKT和γδT细胞、T细胞和单核细胞的阳性率.结果 与外周血相比,蜕膜免疫细胞以CD3-CD56+CD16-数量多,约占免疫细胞总数的(67.02±18.33)%,T细胞占(11.05±7.22)%,单核细胞占(5.28±0.29)%,NKT细胞占(2.35±1.62)%;早孕妇女外周血T淋巴细胞较正常生育期妇女明显下降(P＜0.05),而早孕妇女外周血中NK细胞、NKT细胞、单核细胞数量与对照组相比无显著差别.结论 早孕妇女蜕膜中具有与外周血不同的免疫细胞组成,应用多色荧光标记的流式细胞术能够简单、直接地鉴定各免疫细胞亚群.
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系统性红斑狼疮患者淋巴细胞亚群早期凋亡的初步研究
目的:检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中不同细胞亚群发生凋亡的情况,并初步分析其在SLE发病机制中的意义.方法:取28例SLE患者和性别年龄与之相匹配的20个正常对照者.采用淋巴细胞亚群标志、An-nexin-V及碘化丙啶三色荧光标记、流式细胞术检测细胞的早期凋亡.结果:SLE患者体内CD3+T细胞、CD4+T细胞和CD8+T细胞的凋亡百分率均显著高于正常对照组(P＜0.05).同时,SLE患者T淋巴细胞的死亡百分率也高于正常人.经激素治疗一定时间后,这些细胞亚群的凋亡率会进一步升高(P＜0.01),但CD4/CD8比值恢复至接近正常人.SLE患者体内CD19+B淋巴细胞的凋亡或死亡百分率和正常对照组相比均无明显差别,激素治疗对B细胞凋亡和死亡的影响亦不显著.结论:在SLE患者体内主要是T淋巴细胞凋亡增加,但SLE患者淋巴细胞数目减少不仅仅是因为细胞凋亡所致,死亡细胞数目明显升高也是其中一个重要原因.激素治疗可诱导SLE患者T淋巴细胞进一步发生凋亡,并使T细胞亚群比例有所改善.
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硬腭裸露骨面面积对上颌骨及牙弓生长发育的影响
目的了解不同硬腭裸露骨面面积与上颌骨及牙弓生长发育之间的关系及相关机制,为设计与选择合理的腭裂修复术式提供实验依据.方法选取3周龄SD雄性大鼠48只,随机分为对照组和3个实验组,每组12只.3组实验组大鼠分别被切去硬腭1/4、2/4和3/4面积大小的粘骨膜瓣,大鼠术后每周同期交替注射荧光标记物(对照组同期注射),每2周随机处死每组标记动物3只,解剖出上颌骨,制备成硬组织切片,测量上颌骨和牙弓宽度,观察荧光标记的差异.结果实验表明:①当裸露面积小于硬腭面积1/4时,上颌骨新骨形成和组织学变化不大,并且可获得接近正常的上颌骨和牙弓发育.②随着硬腭裸露面积的增加,上颌骨及牙弓生长发育受限越严重,牙齿内倾更加明显,组间存在着统计学差异.③裸露面积越大,对硬腭新骨形成和腭中缝的结构影响越大,表现为荧光标记线越不规则,标记间距变窄,当裸露面积达硬腭面积的3/4时,甚至产生弥散的荧光标记(即骨坏死)和腭中缝结构的丧失.结论硬腭裸露面积与上颌骨及牙弓发育之间的关系密切,裸露面积越大,上颌骨及牙弓发育受限越严重.
