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香烟烟雾凝集物对BEAS-2B细胞损伤作用及对IL-8表达的影响
目的 探讨香烟烟雾凝集物(cigarette smoke extracts，CSE)对人支气管上皮BEAS-2B细胞的损害作用和对细胞炎症因子IL-8表达的影响。方法 CSE原液的制备参照Su Y的方法并改良；利用MTT比色法研究CSE对BEAS-2B细胞的抑制作用；通过荧光定量PCR分析不同浓度CSE处理后细胞IL-8 mRNA水平的变化。结果 CSE处理后的BEAS-2B贴壁细胞形态变得不规则，细胞回缩变圆，显示低活力或死亡形态；MTT结果表明CSE对BEAS-2B细胞的生长有显著的抑制作用(P＜0.001)，且随着药物浓度的增加，CSE对细胞的抑制作用增强，呈剂量-效应关系；CSE暴露BEAS-2B细胞后可导致IL-8mRNA表达增加(P＜0.001)。低浓度(2.5％、5.0％和7.5％)的CSE刺激增加IL-8mRNA的表达(P＜0.001)，且呈浓度依赖型；10.0％CSE处理组大量细胞死亡，其IL-8 mRNA表达量与无CSE处理组间差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 CSE对支气管上皮BEAS-2B细胞有细胞毒性。低浓度的CSE引起BEAS-2B细胞IL-8 mRNA表达增加，且呈剂量依赖型；高浓度的CSE作用后其IL-8 mRNA的表达没有明显改变。
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NF-κB在香烟烟雾凝集物诱导人支气管上皮细胞IL-8表达中的作用
目的 研究校因子κB(NF-κB)在香烟烟雾凝集物(CSC)诱导人支气管上皮细胞IL-8表达中的作用.方法 利用IL-8促进子上NF-κB结合位点突变的BEAS-2B细胞株(II-8mNF-κB- BEAS-2B细胞)和野生型BEAS-2B细胞株(IL-8 WT BEAS-2B细胞,其IL-8促进子上含有完整的NF-κB结合位点),经7.5％ CSC处理后,用荧光定量PCR方法检测处理后细胞荧光素酶基因(luciferase,fLCF)mRNA水平的变化,并用荧光素酶报告基因活性检测试剂盒检测处理后细胞的荧光素酶活性大小.结果 7.5％ CSC处理2种BEAS-2B细胞后,IL-8 WT BEAS-2B细胞的fLCF mRNA表达量和荧光素酶活性均高于IL-8mNF-κB - BEAS-2B细胞(P＜0.001),其中fLCF mRNA表达量是IL-8mNF-κB- BEAS-2B细胞的1.32倍(P ＜0.001).结论 NF-κB转录因子通过参与炎症因子IL-8表达,促进吸烟导致的呼吸系统炎症反应.
