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三氯乙烯致敏小鼠免疫器官病理学及炎性因子水平的变化
三氯乙烯(Trichloroethylene,TCE)作为一种工业原料广泛应用于有机合成、五金和电子等行业,可对接触人群造成多脏器损害 [1],尤其是引起药疹样皮炎危害十分严重,发病者以皮肤过敏性损害为主要表现,严重者表现为全身弥漫性剥脱性皮炎、大疱性表皮坏死松解症等 [2].本研究通过对BALB/c小鼠采用背部皮内注射TCE的染毒方式,建立TCE所致的过敏性皮炎动物模型,检测致敏动物免疫器官组织病理学改变及血清中炎性因子水平的变化,探讨该皮炎的发病机制,进一步阐述TCE对生物体的毒性作用.
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三氯乙烯所致接触性皮炎小鼠免疫功能的变化
目的 研究三氯乙烯(TCE)刺激BALB/c小鼠产生接触性皮炎,观察TCE对小鼠免疫功能的影响.方法 采用背部皮内注射TCE染毒BALB/c小鼠,观察脾脏、胸腺脏器系数的变化情况,对脾和胸腺细胞进行体外淋巴细胞活力和增殖功能测定,腹腔巨噬细胞吞噬功能测定,NK细胞杀伤活性测定及小鼠血清中肿瘤坏死因子(TNF-a)、干扰素(IFN-γ)含量的测定.结果 TCE实验组胸腺脏器系数显著低于阴性对照组(P＜0.01):TCE实验组T淋巴细胞活力及增殖能力显著高于阴性对照组(P＜0.01);TCE实验组的巨噬细胞吞噬率和NK细胞杀伤活性显著高于阴性对照组(P＜0.01);TCE实验组小鼠血清中TNF-a的含量显著高于阴性对照组(P＜0.01).结论 三氯乙烯能够诱发接触性皮炎,其中毒机制属于迟发型超敏反应.
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医用透明质酸锌液体胶生物相容性研究
医用透明质酸锌液体胶是一种新型伤口敷料,可以为受损的皮肤提供物理保护并为伤口愈合提供一个佳环境,根据GB/T16886<医疗器械生物学评价>系列标准,应对其进行生物学评价.研究结果表明:医用透明质酸锌液体胶具有一定的细胞毒性,未观察到皮肤刺激反应和迟发型超敏反应.与同类产品相比,具有良好的生物相容性.
关键词： 医用透明质酸锌液体胶 生物相容性 细胞毒性 皮肤刺激 迟发型超敏反应 -
玉屏风散乙酸乙酯萃取物抑制迟发型超敏反应效应及成分分析
目的:考察玉屏风散乙酸乙酯萃取物(YA)抑制迟发型超敏反应的效应并分析其化学成分.方法:以2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导小鼠变应性接触性皮炎(ACD),观察不同剂量YA对耳廓肿胀度的影响;以高效液相-质谱联用法(HPLC-MS)对YA的化学成分进行初步分析.结果与结论:YA可剂量依赖性的抑制小鼠变应性接触性皮炎,改善炎症病理状态;HPLC结果表明有21个主要表达的色谱峰,HPLC-MS分析提示其中包括黄芪黄酮(苷)、皂苷、防风色原酮(苷)等成分.YA中的成分与其抑制迟发型超敏反应效应之间的关系有待进一步研究.
关键词： 玉屏风散 变应性接触性皮炎 迟发型超敏反应 高效液相-质谱联用法 -
雷公藤片对迟发型超敏反应小鼠的药效与肝脏伴随毒副作用研究
目的:研究雷公藤片发挥抗炎作用剂量下伴随的肝毒性作用,为其“病-效-毒”相关性研究提供理论依据.方法:80只KM小鼠,全部雄鼠,随机分为8组,每组10只,分别为正常组、模型组、雷公藤片剂量1～5组(51.48,36.55,25.74,18.28,12.87 μg·kg-)和环磷酰胺组(73 mg·kg-1),除正常组外,其余各组均以1％2,4-二硝基氟苯(DNFB)溶液建立小鼠迟发型超敏反应模型,通过给予不同剂量的雷公藤片,观察小鼠的耳肿胀度和肿胀抑制率,检测血清中前列腺素E2(PGE2),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-2(IL-2),前白蛋白(PA),丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),总胆汁酸(TBA)和总胆红素(TBIL)等生化指标水平的变化,并计算脏器和体重的比值.结果:与正常组比较,模型组小鼠耳肿胀血清中PGE2,TNF-α,IL-2,PA含量明显升高(P＜0.01);与模型组比较,雷公藤片可明显抑制迟发型超敏反应致小鼠耳肿胀血中PGE2,TNF-α和IL-2含量的降低,并呈现一定的剂量依赖性;小鼠血中ALT,AST,TBA,TBIL活性升高,PA含量降低,肝体比值变大(P＜0.01).结论:雷公藤片在14.58 μg·kg-1(7.01 ～ 19.06μg·kg-1)有较强的抗炎作用,其抗炎机制与减少炎性介质的产生和释放有关.剂量14.58 μg·kg-1(7.01 ～19.06 μg·kg-)的雷公藤片还可对小鼠肝脏产生一定的损伤.
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白首乌多糖-1 a的免疫调节作用研究
目的:研究白首乌多糖(PRCB)组分PRCB1a体外对兔T淋巴细胞转化及体内对正常小鼠免疫功能的影响.方法:将PRCB1a分为2,4,6 g·L-13个剂量组,分别加入含有兔血的营养瓶内,PHA体外诱导,通过观察T淋巴细胞的转化情况,研究该多糖体外免疫功能状况;将PRCB1a分为3个剂量(150,100,50 mg·kg-1·d-1),连续给小鼠ig 7 d,并进行小鼠体内免疫功能调节作用的测试.结果:PRCB1a各剂量组,均能极显著地(P＜0.01)促进PHA诱导的家兔T淋巴细胞在体外的增殖能力;PRCB1a并能显著增强小鼠的胸腺和脾脏指数、巨噬细胞的吞噬功能、增强小鼠迟发型超敏反应、加速碳粒的清除.结论:提示白首乌多糖能提高小鼠的非特异性和特异性细胞免疫功能.
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人参炔醇抑制实验性迟发型超敏反应
目的:考察人参炔醇(PAN)对实验性迟发型超敏反应的影响及可能作用途径.方法:应用2,4-二硝基氯苯(DNCB)造成小鼠变态反应性接触性皮炎(ACD)模型,考察PAN诱导相给药对耳廓肿胀的影响,并进行病理组织学检查;MTT法检测PAN对ConA诱导的T淋巴细胞增殖的影响.EUSA方法检测ConA刺激的脾细胞培养上清IFN-γ水平.结果:PAN10 mg·kg~(-1)诱导相给药可明显抑制小鼠耳肿胀;病理组织学结果显示PAN可减轻模型小鼠局部水肿及血管扩张,减少淋巴细胞浸润;PAN对ConA诱导的T细胞增殖有明显的抑制作用,而对静息状态的脾细胞末观察到显著影响;PAN 10 μmol·L~(-1)起明显抑制体外ConA刺激脾细胞的IFN-γ分泌,且作用在早期(6 h)即已呈现.结论:PAN对实验性迟发型超敏反应有显著的抑制作用,该作用可能与抑制T细胞增殖和IFN-γ的分泌有关.
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骨髓Sca-1+间充质干细胞移植减轻小鼠迟发型超敏反应
目的 探讨骨髓Sca-1+间充质干细胞(BMSCs)在迟发型超敏反应(DTH)小鼠中的免疫调控作用.方法 BALB/c小鼠随机分为对照组及MSCs注射组.注射组于0、2及6d腹腔注射Sca-1+ BMSCs,对照组注射0.9％氯化钠注射液.所有小鼠在7和14 d时分别于背部皮下与足跖注射C57BL/6小鼠脾细胞.24h后用千分尺测量小鼠足跖的肿胀,ELISA法测外周血细胞因子及FACS法测脾脏免疫细胞比例.结果 注射组小鼠足跖的肿胀程度[ (0.368 *0.126) mm]显著轻于对照组[(0.731±0.111) mm,P＜0.01].注射组外周血中IL-10和TGF-β含量显著高于对照组(P＜0.05)；而IL-12和TNF-α水平显著低于对照组(P＜0.05).注射组小鼠脾脏调节型T细胞和树突细胞的比例均明显高于对照组(P＜0.05).结论 BMSC通过上调抑炎因子和调节型免疫细胞的数量而减轻DTH小鼠的免疫反应.
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乙型肝炎表面抗原对BALB/c小鼠细胞免疫应答的影响
目的研究不同来源乙肝表面抗原(HBsAg)对BALB/c小鼠的某些细胞免疫应答的影响. 方法采用血源、CHO和酵母HBsAg分别免疫BALB/c小鼠,于免疫后不同时间制备脾脏单个核细胞(MNC),测定MNC对刀豆蛋白(ConA)和细菌脂多糖(LPS)的增殖反应性;采用绵羊红细胞(SRBC)作为致敏原,测定不同HBsAg免疫小鼠后迟发性超敏反应(DTH)的发生程度. 结果不同来源HBsAg对ConA或LPS 刺激的反应指数(SI)表现出不同的时间曲线,一般于免疫20?d和25?d时显著升高,其中血源HBsAg较高,酵母较低.H.M.-HBsAg在免疫5?d时即显出较高的SI值.CHO-HBsAg对SRBC诱导的DTH反应具有显著的抑制作用(P＜0.05). 结论不同来源HBsAg诱导细胞免疫反应的类型和程度存在差异,CHO细胞来源的HBsAg对TH1细胞介导的DTH反应有抑制作用.
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二硝基苯修饰B16细胞对黑色素瘤小鼠疗效的实验研究
目的:探讨半抗原--二硝基苯(DNP)修饰的恶性黑色素瘤(恶黑)细胞激活树突状细胞(DC)后,对转移性黑色素瘤小鼠的抗肿瘤效应.方法:采用DNP修饰恶黑细胞B16(H-2b),在体外激活C57BL/6小鼠(H-2b)外周血来源的DC,用于激发自体的T细胞,观察其对T细胞的增殖和特异性T细胞杀伤功能.在由B16细胞接种产生的荷瘤C57BL/6小鼠实验中,将小鼠随机分为5组,于左背部注射及于左耳背面涂抹DNP修饰B16瘤苗联合DC(DNP-B16-DC组)、B16激活DC(B16-DC组)、单纯DC(DC组)、单纯DNP(DNP组)和生理盐水(生理盐水组,每组6只),观察各组抑瘤率和迟发型超敏反应.结果:经DNP修饰的B16细胞激活的DC,诱发的T细胞增殖能力和对B16细胞的特异性杀伤效应均明显高于未其修饰的B16细胞组和DC组.荷瘤小鼠实验显示,DNP-B16-DC组和单纯DNP组小鼠耳肿胀明显增加,其迟发型超敏反应明显强于其他各组.实验中DNP组有1只小鼠用药后20 d死亡,其余小鼠DNP-B16-DC组抑瘤率(96.16%)明显高于B16-DC组(50.11%)、DC组(22.12%)和DNP组(57.79%,P＜0.01),显示DNP-B16-DC具有更强的抑瘤作用.结论:DNP修饰B16所激活的DC可以诱导更强的特异性抗肿瘤作用.
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消风胶囊对小鼠迟发型超敏反应的影响及其作用机制研究
目的观察消风胶囊对小鼠迟发型超敏反应(DTH)的影响,并探讨其作用机制.方法采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)背部皮下致敏、耳廓发敏的方法建立DTH小鼠动物模型,以双抗夹心ELISA法检测其血清中白介素2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)、巨噬细胞培养液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平.结果消风胶囊能明显抑制DNCB诱导的小鼠DTH(P＜0.01),降低DTH小鼠血清中IL-2、IFN-γ水平(P＜0.01,P＜0.05),并能明显抑制腹腔巨噬细胞产生TNF-α(P＜0.01),各剂量组间无明显的剂量相关性.结论消风胶囊有抑制小鼠DTH的作用,其机制可能与抑制了IL-2、IFN-γ、TNF-α等细胞因子的产生和(或)分泌有关.
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口服抗原对同种异体移植免疫反应的影响
将Wistar大鼠预先喂养同种异基因SD大鼠脾细胞7天,然后接受SD大鼠的皮肤移植.7天后,再接受SD大鼠的心脏移植,观察口服抗原后体外混合淋巴细胞培养(MLC)、体内迟发型超敏反应(DTH)以及心脏存活时间.口服抗原后,体外MLC及体内DTH反应均出现明显的抗原特异性降低;口服抗原组大鼠并接受供者皮肤致敏后的心脏移植存活时间达到7天,与对照组未致敏鼠的心脏移植存活时间一致;而未口服抗原组接受皮肤致敏后的心脏移植存活时间不超过2天.提示口服抗原可以使异基因抗原的特异性免疫应答降低,延长移植物存活时间,阻止皮肤移植物的事先致敏反应的发生,并使加速性排斥反应时间明显延迟.
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款冬酮抗过敏作用研究
目的:评价款冬酮的抗过敏作用.方法:通过CO2超临界流体萃取、硅胶柱层析等方法,从款冬花中分离制备款冬酮;采用透明质酸酶抑制实验、肥大细胞(mast cell,MC)脱颗粒实验、豚鼠离体回肠实验、小鼠被动皮肤过敏反应(PCA)实验及小鼠迟发型超敏反应(DTH)实验,观察款冬酮抗过敏的药理作用.结果:款冬酮能显著抑制透明质酸酶的活性,其高、中、低剂量组的抑制率分别为68.6％,45.3％,29.6％;款冬酮能显著抑制肥大细胞脱颗粒作用,其高、中、低剂量组的抑制率分别为100.0％,51.0％,0％;款冬酮能显著抑制组胺致豚鼠离体回肠收缩作用,其高、低剂量组抑制率分别为64.9％,44.1％;款冬酮高、低剂量对组胺致小鼠皮肤速发过敏反应的抑制率分别52.3％,41.6％;款冬酮高、低剂量对2,4-二硝基氯苯(DNCB)致小鼠耳肿胀抑制率分别为25.6％,6.2％.结论:款冬酮具有较强的抗过敏作用.
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香茶菜的免疫药理作用研究
目的探讨香茶菜的免疫作用.方法采用2,4-二硝基氟苯(DNFB)所致的小鼠迟发型超敏反应模型和绵羊红细胞所致小鼠溶血素抗体生成模型,观察香茶菜水煎剂对整体动物细胞免疫和体液免疫的影响.结果香茶菜水煎剂(10,5,2.5 g·kg-1)对DNFB所致小鼠迟发型超敏反应有显著的抑制作用,对胸腺、脾脏指数无明显影响;对绵羊红细胞所致小鼠特异性抗体生成,香茶菜水煎剂(10,5,2.5 g·kg-1)则有显著的增强作用.结论香茶菜水煎剂能抑制细胞免疫反应,而增强体液免疫反应,具有显著的免疫活性.
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芩夏止哮颗粒对正常小鼠免疫功能影响的研究
通过整体实验观察芩夏止哮颗粒对正常小鼠脾T、B淋巴细胞增殖反应,IL-1和IL-2诱生水平,腹腔巨噬细胞的吞噬功能和迟发型超敏反应(DTH)的调节作用.结果表明:芩夏止哮颗粒8 g/Kg、16 g/Kg能明显抑制T、B淋巴细胞增殖反应,腹腔巨噬细胞的吞噬功能,IL-1、IL-2的诱生水平显著低于正常对照组,对DNFB所致小鼠耳迟发型超敏反应亦具有明显抑制作用,与地塞米松组接近.提示:芩夏止哮颗粒具有免疫抑制作用,可能通过调节机体的免疫功能而发挥其抗支气管哮喘免疫炎症反应.
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皮炎煎剂对小鼠实验性接触性皮炎的疗效及作用机理研究
目的探讨皮炎煎剂治疗湿疹皮炎疗效及对迟发型超敏反应作用机理.方法用2,4-二硝氯苯(2,4-DNCB)对ICR小鼠皮肤致敏和诱发,制成实验性接触性皮炎模型.以中药制剂(皮炎煎剂1号、皮炎煎剂2号)作为治疗组,以氢化可的松琥珀酸钠为阳性对照组,以生理盐水为阴性对照组.对小鼠耳壳皮损严重度、耳壳增重值、耳壳皮损炎症细胞计数变化进行统计分析.结果皮炎煎剂1号、2号和氢化可的松对模型鼠红斑、水肿、渗出的接触性皮炎损害均有明显抑制作用,可减轻由于充血、水肿等炎症反应导致的局部皮损重量增加,减少皮损部位炎性细胞浸润.以上3组的抗炎作用明显优于阴性对照组(P＜0.01).皮炎煎剂1号优于皮炎煎剂2号(P＜0.05).结论皮炎煎剂对迟发型变态反应引起的小鼠接触性皮炎具有明显抑制作用.
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海离素对小鼠免疫功能的影响
目的:以海离素作为受试物,观察其对小鼠免疫功能的影响.方法:采用碳粒廓清法、二硝基氯苯诱导小鼠迟发型变态反应试验法及血清溶血素试验法,观察海离素对正常小鼠和免疫功能低下小鼠非特异性和特异性免疫功能的影响.结果:58 mg/kg海离素剂量组能显著地增加正常小鼠吞噬指数α,58 mg/kg海离素剂量组能显著地增加小鼠耳肿胀度,增强环磷酰胺诱导的免疫功能低下小鼠迟发性变态反应,提示海离素可增强细胞免疫功能;58 mg/kg海离素剂量组能显著提高小鼠溶血素水平,提示海离素可增强环磷酰胺诱导免疫功能低下小鼠的特异性体液免疫功能.结论:海离素对小鼠非特异性和特异性免疫功能均具有一定增强作用.
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药物超敏反应综合征1例
目的:介绍药物超敏反应综合征的发病机制、临床特点及诊疗方法.方法:报道1例药物超敏反应综合征的发病原因、临床表现、实验室检查、治疗方法并进行文献复习.结果:本例患者应用激素治疗后症状迅速缓解,疗效显著.结论:药物超敏反应综合征是由感染和药物过敏引起的一种迟发型超敏反应,以发热、皮疹及多器官损害为特点.治疗关键在于早期停用致敏药物,早期应用激素,能取得较好疗效.
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主动免疫治疗中迟发型超敏反应的初步研究
目的 探讨新城鸡瘟病毒修饰的自体肿瘤疫苗(NDV-ATV)主动免疫治疗(ASI)前后机体的细胞免疫功能变化.方法 对32例术后的进展期恶性肿瘤患者,在NDV-ATV接种前及第4次接种后一周,检测机体对肿瘤抗原的迟发型超敏反应(DTH)反应,每个患者均以PPD作为对照.接种前后,在12例患者DTH反应部位取皮肤活检,Envision二步法免疫组化染色,检测致敏的CD8+T细胞、CD68+巨噬细胞数. 抽取外周血检测接种前后的CD4+T细胞及CD8+T细胞的变化.结果 肿瘤抗原的DTH值,主动免疫治疗后明显大于接种前;免疫治疗后外周血CD4+T细胞及CD8+T细胞比例明显升高;免疫治疗后DTH部位真皮组织内CD8+T细胞、CD68+巨噬细胞数目明显增多.结论 NDV-ATV能够改善机体的细胞免疫功能.
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树突状细胞在介导创伤后迟发型超敏反应受抑中的作用
目的 探讨失血合并闭合性骨折对小鼠迟发型超敏(DTH)反应的影响.方法 致伤后分别用2,4-二硝基氟苯(DNFB)和异硫氰酸荧光素(FITC)涂抹小鼠腹部诱导DTH反应,用流式细胞术分析腹股沟淋巴结内FITC阳性细胞和树突状细胞(DC),并测定DNFB致敏24 h后淋巴结细胞过继性转移DTH反应的能力.结果 创伤小鼠的DTH反应显著低于正常小鼠(P＜0.01).流式细胞分析表明,创伤小鼠腹股沟淋巴结中的FITC阳性细胞、携带FITC的DC以及携带FITC的成熟DC的百分含量均显著低于正常小鼠(P＜0.01).DNFB致敏24 h后淋巴结细胞过继性转移DTH反应的能力显著降低(P＜0.01).结论 失血合并闭合性骨折导致小鼠DTH反应低下,这与创伤后DC向引流淋巴结内细胞递呈抗原的能力显著下降密切相关.
