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乙酸阴道热敏凝胶剂对人VK2/E6E7细胞损伤的研究
目的 探讨乙酸阴道热敏凝胶剂(Acid-TISG)对人阴道黏膜上皮细胞(VK2/E6E7)损伤等影响.方法 Acid-TISG和阳性对照市售壬苯醇醚冻胶剂(N-9 jelly)分别按不同稀释浓度0.04～200 mg/ml与VK2/E6E7细胞共培养4h,用MTT法检测细胞存活率并计算IC50值和治疗指数(therapeutic index,TI).VK2/E6E7细胞与Acid-TISG 10～100 mg/ml(临床拟用量1～10倍)和市售N-9 jelly 4 mg/ml(临床用量0.1倍)分别作用4h,用ELISA试剂盒方法检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)释放率(％);丙二醛(MDA)和还原性谷胱甘肽(GSH)含量;白介素(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-α)水平;AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 MTT实验结果表明,Acid-TISG和市售N-9 jelly对细胞存活率具有抑制作用,且呈现剂量-效应关系(r=0.981,P=0.003和r=0.991,P=0.009),Acid-TISG的IC50和TI 值分别为106.32 mg/ml和612.72,市售N-9 jelly的IC50和TI值分别为0.441 mg/ml和5.73.与空白凝胶组相比,Acid-TISG的低、中浓度10和50 mg/ml(临床拟用量的1和5倍)未见细胞损伤和凋亡,但高浓度100 mg/ml(临床拟用量10倍)作用4h,VK2/E6E7细胞LDH释放率和MDA含量显著升高(P＜0.01),GSH含量明显降低(P＜0.01).IL-6和TNF-α水平的增高与VK2/E6E7细胞晚期凋亡/坏死细胞增多呈正相关(r=0.925,P＜0.05),具有浓度依赖性.结论 高浓度Acid-TISG与低浓度市售N-9 jelly对VK2/E6E7细胞有相似的氧化损伤和凋亡作用,就氧化应激程度来看,市售N-9 jelly比 Acid-TISG高100倍,这与TI值相一致,提示Acid-TISG对人阴道黏膜上皮细胞的毒性明显较小,安全性更高.
关键词： 乙酸阴道热敏凝胶剂 VK2/E6E7细胞 氧化应激 炎症 凋亡 -
乙酸阴道热敏凝胶剂对小型猪阴道黏膜的刺激性
目的:评价乙酸阴道热敏凝胶剂(Acid-TISG)对小型猪阴道黏膜的刺激性.方法:将9只雌性小型猪随机分为空白胶组、Acid-TISG组和市售壬苯醇醚凝胶(N-9 jelly)组,阴道给予5 mL凝胶,qd,连续给药7d,在给药前和末次给药后的24,72 h,收集阴道灌流液(CVL),流式细胞仪计数炎性细胞和中性粒细胞数目,比较不同给药组之间的差别;末次给药72 h后处死小型猪,取阴道组织,免疫组化法检测阴道黏膜内CD45的表达.结果:Acid-TISG组CVL液中炎性细胞、中性粒细胞数目明显低于N-9 jelly组(P ＜0.001),与空白胶没有明显差异(P＞0.05).与空白胶组相比,Acid-TISG组的阴道黏膜CD45表达无显著性差异(P＞0.05),N-9 jelly组CD45表达显著增加(P＜0.05).结论:乙酸阴道热敏凝胶剂对小型猪阴道黏膜刺激性较小,作为外用避孕药具有一定的应用前景.
