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脱氧胆酰酪氨酸热敏凝胶剂对小型猪阴道黏膜刺激的病理学评价
目的 评价脱氧胆酰酪氨酸热敏凝胶剂(DCT gel)的小型猪阴道黏膜刺激性.方法 将9只雌性小型猪随机分为空白胶组、DCT-gel组和市售壬苯醇醚凝胶(N-9 jelly)组,阴道给予5 ml凝胶,每日1次,连续给药7d,末次给药72 h后处死小型猪,取阴道组织,观察阴道黏膜组织病理学改变;免疫组化法检测阴道黏膜内CD45的表达.结果 小型猪阴道黏膜组织HE染色显示DCT gel对黏膜上皮层、固有层、血管及周围组织无明显损伤(5.5±2.7),与空白胶组相比差异无统计学意义(3.3±1.6),远低于N-9 jelly组(20.5±3.5,P＜0.05);与空白胶组相比,DCT gel组的阴道黏膜CD45表达差异无统计学意义(P＞0.05),N-9 jelly组CD45表达显著增加(P＜0.05).结论 DCT gel对小型猪阴道黏膜刺激性较小,作为阴道外用杀微生物剂具有一定的应用前景.
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益气养阴方对Graves病合并白细胞减少小鼠骨髓细胞CD45分子表达的影响
目的 观察Graves病(GD)小鼠外周血白细胞计数和小鼠骨髓CD45分子的表达及益气养阴方对其的影响,探讨益气养阴方对GD合并白细胞减少的作用机制.方法 基因枪造模建立GD小鼠模型,应用中药益气养阴方治疗后,观察小鼠外周血白细胞计数和小鼠骨髓细胞CD45分子的表达的变化.结果 中药益气养阴方高、中剂量组CD45分子阳性率及荧光强度较低剂量组和模型组差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 益气养阴方对GD病合并白细胞减少有较好的治疗作用,其作用机制可能与通过上调CD45分子的表达有关.
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热变性对血细胞流式细胞术分析结果的影响
目的 初步探讨热变性对外周血细胞在流式细胞术分析结果中的影响,从而提高流式-荧光原位杂交(Flow-FISH)技术的应用.方法 收集5例非骨髓造血干细胞疾病患者肝素抗凝外周血标本,以CD45-Alexa Fluor(R)647标记细胞表面抗原,高温变性后,采用流式细胞术分析热变性前后外周血有核细胞的散射光信号和荧光信号变化.结果 热变性后,外周血粒细胞的侧向散射光明显缩小;单核细胞不易通过散射光被区分和设门.所有细胞CD45表达强度均减弱,以淋巴细胞为著;通过侧向散射光和CD45设门虽能大致区分各群细胞,但不及未热变性细胞清晰.结论 热变性后,外周血细胞在流式细胞术中的散射光信号和荧光信号均发生了变化,按照常规FSC/SSC和CD45/SSC方法设门进行细胞亚群分析的结果不精确,利用系列特异性荧光抗体标记是一种有前景的方法.
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HBV感染患者体内CD8+ T细胞表达的新研究进展
T细胞是人体重要的获得性免疫细胞,根据T细胞表面CD分子的不同,可将T细胞分为CD4+T细胞(CD3+ CD4+),CD8+T细胞(CD3+ CD8+)两大类亚群,二者在免疫过程中发挥着不同作用,其中CD4+T细胞主要以分泌细胞因子、调节细胞和体液免因应答为主即辅助性T细胞(Th);而CD8+T细胞主要介导细胞免疫应答即细胞毒性T细胞(CTL).已有实验证明[1]在乙型肝炎中细胞毒性T淋巴细胞所介导的细胞免疫反应是乙型肝炎病毒清除和肝细胞受损的主要效应机制.
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CD45RA、CD45RO及胞间黏附分子1在扁平苔藓皮损中的表达
目的：探讨扁平苔藓（LP）皮损CD45RA、CD45RO及胞间黏附分子1（ICAM-1）的表达及意义。方法应用免疫组化方法检测35例 LP 皮损和20例正常皮肤组织中 CD45RA、CD45RO及ICAM-1的表达水平。结果 LP皮损真皮内可见到CD45RO阳性表达，与正常对照组有统计学差异（P＜0.05）；LP皮损表皮、真皮及真皮内小血管壁内皮细胞内均可见ICAM-1阳性表达，与正常对照组有统计学差异（均P＜0.05）；两组均未见CD45RA阳性细胞表达。结论 LP皮损真皮内浸润细胞以记忆T细胞亚群为主，LP皮损角质形成细胞异常表达ICAM-1，推测ICAM-1参与了皮损角质形成细胞抗原呈递过程，从而促进记忆T细胞离开血管，向真皮及表皮浸润。
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卡泊三醇联合窄谱中波紫外线对寻常型银屑病外周血CD4CD45RO、CD4CD45RA的影响
目的 检测卡泊三醇联合窄谱中波紫外线(NB-UVB)治疗寻常型银屑病患者治疗前后CD4CD45RO、CD4CD45RA的变化,为临床应用卡泊三醇联合NB-UVB治疗寻常型银屑病提供理论基础.方法 采用NB-UVB联合局部外用卡泊三醇的治疗方法,以银屑病皮损面积严重指数(PASI)评分评定联合治疗的有效性;并应用流式细胞仪检测联合治疗前、治疗后6周患者外周血中CD4+CD45RO+T细胞、CD4+CD45RA+T细胞的水平.结果 卡泊三醇联合NB-UVB治疗组的临床疗效明显高于单用NB-UVB组(χ2=8.437,P<0.05);卡泊三醇联合NB-UVB治疗组治疗前与正常人相比,其外周血中CD4+CD45RO+T细胞水平高(t=25.656,P<0.01),CD4+CD45RA+T细胞水平低(t=24.119,P<0.01);治疗6周后CD4+CD45RO+T细胞与正常人相比无明显差异(t=0.491,P>0.05),CD4+CD45RA+T细胞与正常人相比无明显差异(t=1.160,P>0.05).结论 卡泊三醇联合NB-UVB治疗寻常型银屑病有效.
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188Re直接法标记CD45单抗及其体内生物分布研究
目的：利用188Re直接法标记CD45单抗，探讨其在正常小鼠体内的生物学分布特性。方法应用2-巯基乙醇（2-ME）还原CD45单抗分子中的二硫键形成巯基；以氯化亚锡作为188Re的还原剂，葡庚糖酸钠为中间弱配体，188Re直接标记CD45单抗；PD-10层析柱分离纯化，纸层析法测定标记率与放化纯；鉴定188Re-CD45单抗的体外稳定性；研究188Re-CD45单抗在正常小鼠体内的生物分布特性。结果188Re-CD45单抗的标记率平均为（85.25±2.63）%，PD-10柱纯化后的放化纯为（92.54±3.56）%，比活度平均为（2.06±0.07）TBq/mmol；室温下放置24 h，188Re-CD45单抗放化纯为（64.33±1.53）%；在鼠血清和生理盐水中37℃下孵育24 h后，其放化纯仍有（64.2±3.77）%和（56.7±4.16）%。小鼠体内生物分布显示，188Re-CD45单抗主要分布于肾脏和肝脏，其次是肺脏、骨骼和血液。结论188Re直接法标记CD45单抗的方法简单易行，标记率较高，具有良好的体外稳定性；188Re-CD45单抗静脉注射后，体内放射性主要经肾脏排泄，并在肝脏有较高的浓聚，符合标记抗体的体内分布规律。
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CD45抗体标记与碘化丙啶染色法DNA倍体分析在良恶性胸腔积液鉴别诊断中的意义
目的 探讨CD45抗体标记+碘化丙啶(PI)染色法(简称CD45+PI法)进行DNA倍体分析对提高恶性胸腔积液检出率的意义.方法 对28例临床确诊为肿瘤患者的恶性胸腔积液及20例结核病患者的胸腔积液,分别采用3种方法进行分析:(1)细胞形态学检查法(简称形态法);(2)PI染色法,PI染色后进行流式DNA倍体分析(简称PI法);(3)CD45+PI法,即先用CD45抗体标记细胞表面抗原,再用PI染色进行流式DNA倍体分析.比较3种方法的敏感度、特异度和准确性;比较异倍体细胞含量较低(≤3.64%)的标本中,PI法和CD45+PI法进行DNA倍体分析的DNA指数(DI)值差异.结果 CD45+PI法的敏感度为89%高于形态法及普通PI法的36%和71%,且特异度(95%)较PI法(79%)高,在3种方法中CD+45PI法准确性高,为92%.对肿瘤细胞含量较低,异倍体细胞较少的标本,PI法分析DI值为正常;而用CD45+PI法分析DI值却可以检出肿瘤异倍体.结论 CD45+PI法进行DNA倍体分析较之普通PI法可以检测到更低含量的异倍体细胞,有助于提高良恶性胸腔积液的鉴别诊断水平.
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CD4/CD45双色单平台法检测HIV感染者CD4+ T淋巴细胞研究进展
CD4+T淋巴细胞计数是评价AIDS疾病进展和抗病毒治疗效果的重要指标。本文介绍了流式细胞仪CD4+T淋巴细胞计数方法的发展历史。将CD4/CD45双色单平台法的准确性、可靠性和经济性与其他方法进行了比较。表明该法简便、廉价且实用性强。同时介绍了当前适用于CD4/CD45双色单平台法的几款流式细胞仪的机型特点。
关键词： HIV CD4+T淋巴细胞计数 抗原 CD45 流式细胞术 -
CD45+和CD45-儿童急性B淋巴细胞白血病的临床特征分析
目的 探讨CD45抗原表达与儿童急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)的临床相关性.方法 利用多参数流式细胞术(FCM)以CD45/SSC设门对61例B-ALL患儿进行免疫分型检测;采用染色体核型分析和多重巢式RT-PCR技术进行染色体、融合基因分析.结果 免疫表型分析显示CD45+组CD13、HLA-DR抗原表达明显高于CD45-组(P<0.05);CD45-组的融合基因主要为HOX11和E2A/PBX1,而CD45+组主要为TEL/AML1、MLL/AF9、HOX11;相关临床参数、染色体核型及疗效比较两组间差异均无显著性(P>0.05).结论 CD45抗原的表达与否和B-ALL患儿的临床特征、染色体畸变、治疗效果无统计学相关性;CD45+组较CD45-组高表达CD13和HLA-DR.
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AG490对大鼠脑损伤后CD40和CD45表达及神经功能的影响
目的 探讨AG490对大鼠创伤性脑损伤后脑组织CD40、CD45表达以及神经功能状态的影响.方法 取健康雄性SD大鼠180只,随机分为假手术组、创伤组和AG490干预组,每组大鼠60只;各组根据脑损伤时间再分为6、12、24及72 h亚组(各15只).应用液压冲击法制备大鼠脑损伤模型,采用流式细胞术检测脑组织CD40、CD45的表达,采用大鼠神经功能缺损评分系统对神经功能状态进行评估.结果 ①创伤组伤后各时间点神经功能缺损评分均高于假手术组(P<0.05或P<0.01),其中6 h为高峰期,后呈现逐渐下降趋势.AG490干预组大鼠神经功能缺损评分均较创伤组低,24和72 h时间点差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).②创伤组脑组织CD40表达水平逐渐升高,24 h达高峰,然后开始降低;CD45表达持续增高,72 h高.与假手术组比较,各时间点CD40 、CD45表达差异均有统计学意义(P<0.01).AG490干预组各时间点CD40 、CD45表达水平均低于创伤组,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 创伤性脑损伤后,AG490可能通过降低脑组织CD40、CD45的表达促进神经功能的恢复.
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常年性持续性变应性鼻炎患者外周血单个核细胞CD45RA及CD45RO表达
目的 探讨常年性持续性变应性鼻炎(AR)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中CD45RA及CD45RO的表达及其与AR发病的关系.方法 应用荧光抗体标记、流式细胞仪检测30例AR患者PBMC中CD45RA及CD45RO的表达.结果 与对照组比较,①AR患者PBMC中CD3+T细胞、CD3+CD8+T细胞差异均不显著(P均>0.05);②AR患者PBMC中CD4+T细胞显著降低(P<0.001);③AR患者PBMC中CD3+CD4+/CD3+CD8+T细胞比值显著降低(P<0.001).④AR患者PBMC中CD45RA+T细胞显著降低,CD45RO+T细胞显著升高(P均<0.001);⑤AR患者PBMC中CD45RO+/CD45RA+T细胞比值显著升高(P<0.001):⑥AR患者PBMC中CD4+CD45RA+T细胞显著降低(P
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巨噬细胞和淋巴细胞及增殖细胞核抗原在鼻息肉组织中的表达及病理学意义
目的研究巨噬细胞(CD68)、T细胞(CD45RO)、B细胞(CD20)和增殖核细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在鼻息肉组织中的表达.方法应用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白过氧化酶(strept-avidin oxidase,SP)法对50例鼻息肉分别做CD20、CD45RO、CD68、PCNA的免疫组化染色,结合常规HE染色切片进行分析.结果①CD68+细胞在嗜酸性粒细胞性鼻息肉较嗜中性粒细胞性鼻息肉表达率高,差异具有显著性意义(P<0.05);②CD45RO、CD20在鼻息肉均有阳性表达,CD45RO与CD20呈负相关(P=0.05);③CD68阳性细胞与嗜酸性粒细胞浸润及鼻息肉上皮PCNA阳性表达有相关性(P<0.05).鼻息肉上皮的PCNA阳性表达和成纤维细胞PCNA阳性表达有相关性,(P<0.05).结论鼻息肉的形成与炎性细胞浸润密切相关.鼻黏膜局部的细胞免疫与体液免疫异常导致上皮细胞、成纤维细胞增殖、腺体增生是鼻息肉发生的基础,CD68+细胞可能是鼻息肉中的炎性干细胞.
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乙酸阴道热敏凝胶剂对小型猪阴道黏膜的刺激性
目的:评价乙酸阴道热敏凝胶剂(Acid-TISG)对小型猪阴道黏膜的刺激性.方法:将9只雌性小型猪随机分为空白胶组、Acid-TISG组和市售壬苯醇醚凝胶(N-9 jelly)组,阴道给予5 mL凝胶,qd,连续给药7d,在给药前和末次给药后的24,72 h,收集阴道灌流液(CVL),流式细胞仪计数炎性细胞和中性粒细胞数目,比较不同给药组之间的差别;末次给药72 h后处死小型猪,取阴道组织,免疫组化法检测阴道黏膜内CD45的表达.结果:Acid-TISG组CVL液中炎性细胞、中性粒细胞数目明显低于N-9 jelly组(P ＜0.001),与空白胶没有明显差异(P＞0.05).与空白胶组相比,Acid-TISG组的阴道黏膜CD45表达无显著性差异(P＞0.05),N-9 jelly组CD45表达显著增加(P＜0.05).结论:乙酸阴道热敏凝胶剂对小型猪阴道黏膜刺激性较小,作为外用避孕药具有一定的应用前景.
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褪黑素对低氧诱导的BV-2小胶质细胞CD45表达增高的抑制作用
目的研究褪黑素对低氧激活的小胶质细胞CD45表达的影响，以探讨褪黑素的抗衰老和抗阿尔茨海默病的作用机制。方法体外培养BV-2小胶质细胞，用终浓度为2.0 mmol·L-1的连二亚硫酸钠作用48 h，造成慢性低氧模型，药物处理组在低氧的同时给予褪黑素。相差显微镜下观察小胶细质胞形态学变化，流式细胞术测定缺氧状态下BV-2小胶质细胞表面CD45的表达；体外培养BV-2小胶质细胞用终浓度为0.01，0.1，1.0 μmol·L-1的褪黑素作用5 min，加入20mg·L-1的脂多糖37℃孵育12 h，Griess试剂法检测培养上清中NO的含量。结果连二亚硫酸钠引起的低氧可明显增加BV-2小胶质细胞CD45的表达，荧光强度增至23.9±14.2(对照组为0.80±0.73)，低氧也可使小胶质细胞的形态发生阿米巴样变，而0.01，0.1，1.0 pmol·L-1的褪黑素可剂量依赖性地减少低氧诱导的CD45表达，抑制由低氧引起的小胶质细胞的阿米巴样变。但褪黑素对脂多糖诱导的BV-2小胶质细胞培养液中NO的升高无明显抑制作用。结论褪黑素抑制小胶质细胞的激活与其抗氧化作用密切相关，可能是其抗炎和防治阿尔茨海默病作用的重要理论基础。
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CD45基因多态性与中国福建地区汉族人多发性硬化的相关性研究
目的:研究CD45(protein tyrosine phosphatase receptor-type C,PTPRC)+77C/G基因多态性与多发性硬化(multiple sclerosis,MS)的相关性.方法:采用聚合酶链式反应一限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测60例MS患者和112例无血缘关系的福建籍健康汉族人CD45E4+77C/G基因型.结果:病例组CD45E4+77C/G的基因型和等位基因频率与正常对照组比较无统计学意义(P＞0.05).结论:CD45E4+77C/G基因多态性与中国福建地区汉族人多发性硬化的发病不具有相关性.
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CD45分子在HIV-1病毒感染中的作用研究进展
CD45分子是具有磷酸酶活性的跨膜蛋白,在免疫细胞中发挥重要作用.CD45分子对抗原受体信号转导是必需的,并具有调节细胞凋亡的作用,其功能紊乱会导致自身免疫性疾病、免疫缺陷、恶性肿瘤等.CD45分子的结构及其功能与HIV感染之间的关系是艾滋病研究领域的重要内容之一,本文就CD45分子在HIV感染中的作用作一综述.
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钾通道阻滞剂对多发性硬化患者CD4+T细胞CCR7及CD45RA表达的影响
目的 研究Kv1.3钾通道阻滞剂海葵毒素(SHK)阻滞多发性硬化(Ms)患者急性期髓鞘反应性CIM+T淋巴细胞上的Kv1.3钾通道后,细胞表型CCR7、CD45RA表达的变化与疾病的关系.方法 对15例急性期MS患者、15例INF-B-1b治疗缓解期MS患者和15名健康对照的不同状态下的CD4+T淋巴细胞进行CD3、CIM、CCR7、CD45RA的荧光抗体及同型对照标记,用四标流式细胞仪检测3组不同状态下细胞表型CCR7、CD45RA表达的变化.结果 MS急性期组CIM+T细胞以CCR7-CIM5RA-(TEM)表型为主,其变化与病情有明显相关性,髓鞘抗原刺激后此型所占比例明显增高(P＜0.05),初始细胞表型CCR7+CD45RA+减少(P＜0.05),钾通道阻滞剂SHK对Ms急件期患者髓鞘反应性CD4+TEM表型有明显抑制作用(P＜0.05).结论 检测CI4+TEM细胞表型可能对判断病情有一定临床意义,Kv1.3钾通道可能成为治疗MS的新靶点.
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前列腺癌微环境中树突状细胞分布及功能状态的初步研究
目的:探讨前列腺癌微环境中树突状细胞(DC)分布、功能状态的变化及其与记忆性T细胞的关系.方法:选取40例前列腺增生(BPH),40例前列腺上皮内瘤(PIN)及46例前列腺癌(Pca)石蜡组织标本,用S100标记组织中总DC、CD83标记成熟DC、CD45RO标记组织中记忆性T细胞,用SP法行免疫组化染色;观察阳性细胞分布,计算阳性细胞浸润密度,分析DC与T细胞的相关性.结果:由BPH、PIN到Pca的S100+DC、CD45RO+T浸润密度逐渐降低,前列腺癌组织降低明显(P<0.01);Pca中CD83+DC浸润密度高于BPH和PIN(P<0.05).前列腺癌组织中,S100+DC主要分布在肿瘤间质(P<0.01),CD83+DC主要分布在癌上皮间及癌周(P<0.01),且CD83+DC与CD45RO+T浸润密度呈正相关(rs=0.831,P<0.05).结论:前列腺癌组织中,DC数量减少且存在功能缺陷,不同功能状态的DC存在区域性分布;成熟DE数量的减少可能导致T细胞免疫功能下降.
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尿阿尔茨海默病相关神经丝蛋白与外周血 CD45RA+T 细胞亚群联合检测早期诊断阿尔茨海默病
目的：探讨尿阿尔茨海默病相关神经丝蛋白(Alzheimer disease related neural thread protein,AD7c-NTP)与外周血淋巴细胞 CD45RA+ T 亚型联合检测在阿尔茨海默病(AD)早期诊断中的价值。方法根据 Peterson制订的轻度认知功能障碍(MCI)诊断标准和美国精神障碍诊断与统计手册第4版(DSM-Ⅳ)有关 AD 的诊断标准,选取 AD 患者32例(AD 组),MCI 患者30例(MCI 组),另选60例健康者作为对照组。对比各组尿 AD7c-NTP 与CD45RA+ T 细胞亚群变化及诊断价值。结果①CD45RA+ T 蛋白表达水平在 AD 组和 MCI 组显著低于对照组(P <0.01)；②CD45RA+ T 在 AD 组和 MCI 组中的相对表达水平较对照组显著降低(P <0.01),AD 组与 MCI 组间差异无统计学意义(P >0.05)；③尿 AD7c-NTP 在 AD 组和 MCI 组中的含量较对照组显著升高(P <0.01),AD 组与MCI 组间差异无统计学意义(P >0.05)；④CD45RA+ T 与 AD7c-NTP 联合诊断具有较好的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值。结论 AD7c-NTP 与 CD45RA+ T 联合检测是诊断 AD 早期病变的较好指标,提升二者单独应用时的预测价值,为 AD 早期诊断及疗效监测提供参考。
