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香烟烟雾溶液作用下大鼠淋巴细胞的氧化应激反应
目的以细胞内活性氧自由基(ROS)水平、DNA损伤、脂质过氧化物(LPO)水平以及超氧化物歧化酶(SOD)活力为指标,研究细胞在香烟烟雾溶液作用下产生的氧化应激反应.方法以PBS作吸收液,用大包氏管收集香烟主流烟雾,将香烟烟雾溶液(CSS)分别以0、1×10-3、2×10-3、4×10-3、8×10-3、12×10-3、16×10-3支/ml的浓度作用于大鼠淋巴细胞.用2′,7′-二乙酰二氯荧光素(DCFH-DA)测定细胞内ROS水平,用彗星试验检测细胞DNA损伤,同时检测细胞内SOD活力和LPO水平.结果2 × 10-3支/ml以上剂量组二氯荧光素(DCF)荧光强度、彗星尾长以及LPO水平均显著高于对照组,且随剂量增加而增加.16×10-3支/ml组SOD活力显著低于对照组.与对照组相比,1×10-3支/ml组LPO水平显著降低、SOD活力则显著增高.结论CSS达到一定剂量时使细胞内ROS水平增高,引起细胞DNA损伤和脂质过氧化,高剂量时SOD活力降低,而低剂量时能够诱导SOD活力.
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六价铬与烟溶液反应诱导质粒DNA单链断裂
目的 研究六价铬化合物(Cr6+)和烟溶液(CSS)对pUC118质粒DNA的损伤作用.方法应用质粒松弛法和电子顺磁共振波谱法检测了重铬酸钾(K2Cr2O7)和CSS反应对DNA的断裂损伤及诱导损伤的原因. 结果 K2Cr2O7和CSS可协同诱导DNA单链断裂;而K2Cr2O7(0.5 mmol/L)或CSS(2 μl)单独作用都仅诱导极少的DNA断裂;当CSS的量(2 μl)不变,随K2Cr2O7浓度的升高(0.125～2.000 mmol/L),DNA单链断裂数逐渐增加..OH清除剂可有效地抑制Cr6+和CSS协同产生的.OH. 结论 Cr6+和CSS协同诱导DNA单链断裂的增加主要是由.OH所介导的.
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香烟烟雾溶液对人淋巴细胞的损伤及修复
目的了解香烟烟雾溶液作用于人淋巴细胞后DNA的损伤及修复状况.方法以8×10-3支/ml香烟烟雾溶液作用于正常人淋巴细胞,用彗星试验检测0,0.5,1,2,3,4,5,6 h时点细胞的DNA损伤状况.结果与0 h组相比,2 h至6 h组彗星尾长均显著增长(P＜0.001),3 h达到长,之后逐渐降低,但到6 h未恢复至正常水平.结论香烟烟雾溶液能直接引起人淋巴细胞的DNA损伤,且细胞能在一定程度上修复这种损伤.
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铬盐与香烟烟雾溶液对A549细胞毒性和DNA断裂的影响
目的研究重铬酸钾和香烟烟雾溶液(CSS)对A549细胞的细胞毒性和DNA损伤的联合作用.方法应用四甲基偶氮唑盐法和单细胞凝胶电泳法检测了重铬酸钾和CSS联合处理对A549细胞的细胞毒性以及 DNA链的断裂损伤.结果低浓度重铬酸钾(0.2～0.6 μmol/L)与高浓度CSS(10支/L)联合作用促进了细胞的增殖,高浓度重铬酸钾(5.4～16.2 μmol/L)与高浓度CSS联合作用表现为明显的细胞毒性.重铬酸钾(0.2、0.6和1.8 μmol/L)或CSS(0.1、0.2、0.5支/L)单独处理均可诱导DNA断裂,存在一定的剂量-反应关系.在重铬酸钾的0.6 μmol/L 时,随CSS(0.1、0.2、0.5支/L)浓度的升高,A549细胞DNA链断裂程度逐渐增加.结论重铬酸钾和CSS对A549细胞均有细胞毒性和DNA损伤作用.重铬酸钾和CSS联合处理诱导A549细胞DNA链断裂,并显著高于两者单独处理引起的DNA链断裂作用.
