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  • 胚胎干细胞试验模型用于白藜芦醇胚胎发育毒性的评价

    作者:方海琴;于洲;杨嵘;荣靖;侯明月;刘杰;束玉磊;彭双清

    目的 依据胚胎于细胞(Embryonic Stem Cell,ESC)具有向心肌细胞分化的能力,建立体外分化发育毒性评价模型,并应用其评价受试物白藜芦醇胚胎发育毒性.方法 悬滴转悬浮法培养D3系胚胎干细胞(ESC-D3),观察受试物对ESC-D3分化能力影响,结合MTT法判断受试物对ESC-D3及小鼠胚胎成纤维细胞(3T3)的细胞毒性结果,预测受试物的发育毒性.用已知无胚胎发育毒性化合物青霉素(Penicillin,PN),强胚胎发育毒性化合物氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)等对模型进行有效性验证,并将经过验证的EST模型用于受试物白藜芦醇的发育毒性评价.结果 利用建立的EST模型对5-FU和PN的发育毒性进行评价,结果为5-FU为强胚胎发育毒性,PN为无胚胎发育毒性,与文献报道一致.应用EST模型评价得出白藜芦醇对3T3细胞活力的半数抑制浓度IC503T3为27.93 μg/ml,对D3细胞活力的半数抑制浓度IC50 D3为28.02 μg/ml,对D3细胞的半数分化抑制浓度ID50D3为158.97 μg/ml,经EST模型判断公式计算得出该化合物无发育毒性化合物.结论 建立的EST模型的有效性验证结果与ECVAM的结论一致,可用于胚胎发育毒性的筛选和评价;经EST模型评价,白藜芦醇为无胚胎发育毒性.

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