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脐血源神经干细胞移植治疗神经系统疾病临床总结和分析
目的 客观总结和评价神经干细胞治疗神经系统疾病综合效果及临床存在的问题.方法 250例偏瘫、截瘫、脑瘫、神经系统变性疾病等通过静脉输注、鞘内注射、局部注射使用脐血源神经干细胞4次～8次,每次间隔1周,治疗前后进行常规、生化、免疫检查,临床相关量表评定,并观察其临床效果和副反应.结果 神经干细胞治疗对脊髓损伤、脑瘫、偏瘫、遗传性共济失调、多发性硬化、脑炎后遗症、周围神经损伤等部分病例有明显效果,且临床使用安全.对运动神经元病有短期疗效,但不能阻止疾病发展,对重症脑变性疾病,单一疗程效果不佳.结论 神经干细胞对神经系统疑难病有临床效果,但效果不齐同.对病因尚不明确的疾病,能改善症状、体征,不能阻止其恶化、复发.副反应与细胞质量和个体差异有关.
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脐血源神经干细胞移植修复脊髓损伤的神经功能变化:51例效果评估
背景:神经干细胞移植使脊髓损伤患者重新站起来成为可能,但对脊髓损伤临床应用尚无深入系统的报道.目的:评估脐血源神经干细胞移植对51例脊髓损伤恢复期患者神经功能的影响.设计、时间及地点:自身前后对照观察,于2005-09/2007-07在广东医学院附属深圳南山医院完成.对象:选择同期在广东医学院附属深圳南山医院康复医学科住院的全部外伤性脊髓损伤恢复期患者64例,男47例,女17例,年龄14-66岁,病程5个月～31年,全部患者既往均接受过针灸、推拿或运动疗法等康复训练,但残留感觉、运动功能缺失及自主经功能紊乱等功能障碍.实验所用脐血源神经干细胞由深圳市北科细胞工程研究所提供技术支持.方法:患者蛛网膜下腔推注脐血源神经干细胞悬液1.0-2.0 mL,细胞数量(1.5-3.0)×1010L-1.细胞移植后配合针灸、推拿、运动疗法等综合康复训练,2次/d,30 min/次,1个疗程为8周.治疗后ASIA分级不变,ASIA感觉或运动评分增高为有效.主要观察指标:临床疗效,移植前后AISA评分及体感诱发电位潜伏期波幅的变化,不良反应.结果:51例进入ASIA感觉及运动功能结果分析,19例进入体感诱发电位结果分析.细胞移植后2个月,有效率15%(8/51),AISA评分无明显变化(z=-2.836-2.719,P＞0.05),少数患者体感诱发电位潜伏期波幅有微弱缩短的趋势(z=一3.651～-3.204,P＜0.05).1个疗程以内头痛3例,头晕、呕吐、胸闷、皮疹各1例,出现血象增高等情况,予抗炎及降温处理后,症状均得到缓解,血象恢复正常.结论:神经干细胞移植短时期内无法改善脊髓损伤患者的神经功能,但可能会改善其感觉功能.
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脐血源神经干细胞移植治疗陈旧性脊髓损伤
背景：随着医学的进步，脊髓损伤患者的预后未得到明显的改善，大部分患者常遗留严重的并发症。如今，许多实验室和临床研究成果已经提示细胞治疗具有巨大潜能，特别是脐血干细胞在神经系统疾病中的应用。目的：观察脐血源神经干细胞治疗陈旧性脊髓损伤的可行性和临床疗效。方法：无菌条件下采集新生儿脐血，在体外条件下分化成神经干细胞，制成细胞浓度为109 L-1的细胞悬液，经腰椎穿刺(L3-L4或L4-L5)注入蛛网膜下腔3 mL。移植前和移植后3个月对脊髓损伤患者行脊髓损伤神经学分类国际标准(ASIA)评分和膀胱残余尿量测定。结果与结论：脐血源神经干细胞移植后患者生命体征平稳，移植后3个月 ASIA 各项评分较前提高、膀胱残余尿量减少，差异有显著性意义(P<0.05)。可见脐血源神经干细胞移植作为一种新的治疗方法，可以改善陈旧性脊髓损伤患者肢体功能，提高患者生活质量。
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脐血源神经干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤及其差异基因表达
目的 评估脐血源神经干细胞(UCBNSCs)移植治疗脊髓损伤(SCI)后大鼠后肢功能恢复情况,并通过基因芯片筛选出移植治疗后对照组和实验组差异表达基因,分析相关基因与损伤脊髓功能恢复的关系,以期为SCI的基因治疗打下基础. 方法 50只健康雌性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(n=10)、磷酸盐缓冲液(PBS)注射组(n=20)、UCBNSCs移植组(n=20).假手术组仅在显微镜下行T9-11椎板打开,不做其他处理.后2组打开T9-11椎板后横断脊髓,制作大鼠脊髓全断模型.1周后UCBNSCs移植组行UCBNSCs(1×109/L细胞悬浮液10μL)脑室穿刺移植,PBS注射组用PBS代替.移植术后1d、1周、2周、4周、6周、8周分别对3组大鼠行血脑屏障(BBB)行为评分.第8周分别取PBS注射组和UCBNSCs移植组各7只SD大鼠,取得SCI处组织样本,行基因芯片分析,筛选出差异表达基因. 结果 PBS注射组和UCBNSCs移植组造模后均出现了瘫痪、尾部活动障碍及排尿功能障碍等.随着时间的延长,2组后肢功能均有所恢复,在术后2周、4周、6周和8周2组间差异具有统计学意义(P＜0.05).芯片分析筛选出24个差异表达基因,其中表达上调有20个,表达下调有4个. 结论 UCBNSCs移植治疗大鼠SCI有确切疗效,通过基因芯片分析推测其可能通过分化为神经元、增加损伤微环境中神经营养因子表达、抑制炎症反应和促进损伤局部的氧供等方式发挥作用.
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脐血源神经干细胞移植改善局灶性脑缺血大鼠神经功能障碍
目的 探讨脐血源神经干细胞移植对局灶性脑缺血大鼠神经功能障碍的修复改善作用.方法 无菌条件下收集脐带血,加入淋巴细胞分离液,进行梯度离心获取单个核细胞悬浮液,接种于专用培养基中培养,进行传代,并对获得的细胞进行nestin染色鉴定.将造模成功的大脑中动脉栓塞模型大鼠60只按随机数字表法分成移植组和对照组,每组30只,分别于造模后2d从侧脑室注射脐血源神经干细胞和磷酸盐缓冲液,同时腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记内源性神经干细胞.分别于移植后1d、1周、2周对2组大鼠进行改良神经功能缺损评分(mNSS);2周时处死全部大鼠,进行TTC染色观察脑梗死体积百分比,并进行血管内皮生长因子(VEGF)及双肾上腺皮质激素(DCX)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色观察.结果 在移植后1周、2周时,移植组和对照组相比mNSS评分明显降低(6.88±0.35vs 7.75±0.46;4.38±0.52vs 6.25±0.71),差异均有统计学意义(P＜0.05);移植后2周时,移植组和对照组相比脑梗死体积明显缩小(16.99％±0.34％vs 34.16％±0.49％),BrdU/DCX、BrdU/GFAP双重标记阳性细胞数量明显增多(72.50±2.72vs46.00±2.43;63.14±2.18vs 32.29土1.76),VEGF表达量明显增高(112.43±4.24 vs 64.95±3.81),差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 脐血源神经干细胞移植能促进神经发生和VEGF分泌,对局灶性脑缺血大鼠神经功能障碍有改善作用.
