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肾复康Ⅱ号胶囊的有效成分对高糖环境中大鼠肾小球系膜细胞氧化应激反应的影响
目的:探讨肾复康Ⅱ号胶囊中两种主要药物的有效成分对大鼠肾小球系膜细胞氧化应激效应的影响.方法:体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分为正常对照组、高糖组、熟地黄多糖(RPS)组、山茱萸多糖(CPS)组和治疗组,采用MTr细胞计数法测定大鼠系膜细胞活力,运用比色法测定各组大鼠系膜细胞培养液中氧化应激相关因子活性和含量.结果:熟地黄多糖组和山茱萸多糖组能够有效的抑制高糖环境中大鼠肾小球系膜细胞的增殖,并且能够显著降低细胞上清中NO、NOS含量,提高T-SOD、CAT活力值.结论:肾复康Ⅱ号胶囊中两种主要药物的有效成分能够有效抑制大鼠肾小球系膜细胞上清中氧化应激反应.
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肾复康Ⅱ号联合骨髓间充质干细胞移植对肾间质纤维化大鼠肾功能、HGF和C-Met的作用研究
目的:应用肾复康Ⅱ号联合MSCs移植的方法,研究其对肾间质纤维化大鼠肾功能、HGF及其受体C-Met的作用,探讨肾复康Ⅱ号对MSCs旁分泌功能的作用机制.方法:本研究采用全骨髓贴壁筛选法体外分离、扩增培养大鼠MSCs.30只雄性SD大鼠随机分为三组:模型组、MSCs移植组、肾复康Ⅱ号联合MSCs移植组,肾复康Ⅱ号联合MSCs移植组给予肾复康Ⅱ号405mg/kg·d灌胃,模型组、MSCs移植组灌服等体积生理盐水,连续14天,1次/日.大鼠肾间质纤维化模型应用单侧输尿管结扎术制备.MSCs通过尾静脉注射的方法进行移植.移植后1周、2周、4周,对各组大鼠的肾功能、肾组织中HGF和C-Met进行检测.结果:MSCs移植组、肾复康Ⅱ号联合MSCs移植组与模型组相比,肾功能改善,HGF、C-Met分泌增加;肾复康Ⅱ号联合MSCs移植组肾功能改善更明显,HGF、C-Met分泌明显增加,各组之间比较,具有显著性差异.结论:肾复康Ⅱ号可能是作用于HGF及其受体C-Met调控MSCs旁分泌功能达到改善肾功能的作用.
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肾复康Ⅱ号抗肾间质纤维化及对人肾上皮小管细胞转分化的作用
目的：观察益肾散结法及其制剂肾复康Ⅱ号胶囊对大鼠肾纤维化的影响和其含药血清对人肾小管上皮（HK-2）细胞a-SMA表达的影响。方法：采用单侧输尿管结扎的方法制造大鼠肾间质纤维化模型。90只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、小剂量组、中剂量组及大剂量组，分别检测给药7、14、21d后大鼠肾脏间质纤维化的面积。制备大鼠含药血清，免疫印迹法检测其含药血清对人肾小管上皮（HK-2）细胞a-SMA表达的影响。结果：模型组和治疗组均出现明显的肾间质纤维化病理改变（P＜0．05）及肾小管的损伤；各治疗组病变程度与模型组相比明显减轻，具有显著性差异（P＜0．05）。其含药血清明显降低TGF-β1所诱导的人肾小管上皮HK-2细胞 a-SM A的表达。结论：软坚散结法下调肾组织a-SM A的表达，可能是其抑制纤维化的途径之一。
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肾复康Ⅱ号对MSCs旁分泌作用的实验研究
目的:应用肾复康Ⅱ号联合间充质干细胞(MSCs)移植、肾复康Ⅱ号联合肝细胞生长因子拮抗剂(NK4)拮抗MSCs表面的肝细胞生长因子(HGF)后再移植的方法,研究肾复康Ⅱ号对MSCs的旁分泌作用,探讨其对MSCs旁分泌功能的作用机制.方法:本研究将50只雄性SD大鼠随机分为模型组、生理盐水+MSCs移植组、生理盐水+NK4拮抗HGF表达的MSCs组、肾复康Ⅱ号+MSCs移植组、肾复康Ⅱ号+NK4拮抗HGF表达的MSCs组,各组分别给予肾复康Ⅱ号405 mg/(kg·d)、等体积生理盐水灌胃,1次/d,连续14天.采用全骨髓贴壁筛选法体外分离、扩增培养大鼠MSCs,应用NK4蛋白转染质粒干预MSCs;单侧输尿管结扎的方法制备大鼠肾间质纤维化模型.通过尾静脉注射MSCs的方法进行移植.移植后4周对各组大鼠肾组织中HGF和特异性受体(C-Net)水平进行检测.结果:即时聚合酶链锁反应(RT-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)结果显示,肾复康Ⅱ号+MSCs组较其余各组肾组织HGF及c-Met均明显增高,肾复康Ⅱ号+MSCs组升高明显,其次为肾复康Ⅱ号+拮抗剂组、生理盐水+MSCs组,各组之间比较,差异有统计学意义.结论:肾复康Ⅱ号具有促进MSCs在体内分泌HGF的作用,本研究验证了益肾散结方肾复康Ⅱ号对植入的MSCs具有旁分泌功能,并部分揭示了其调控机制.
关键词： 肾复康Ⅱ号 骨髓间充质干细胞 肝细胞生长因子 肝细胞生长因子拮抗剂 动物实验
