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  • TGF-β-1对大鼠腹膜间皮细胞ROS和NADPH氧化酶亚基p67phox表达的影响及黄芪的干预作用

    作者:刘小贤;周红娟;蔡龙;马纪林;陶筱娟;于健宁

    目的:探讨TGF-β-1对大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs)活性氧(ROS)和NADPH氧化酶亚基p67phox表达的影响及黄芪注射液(AGI) 对其的干预作用.方法:体外培养SD大鼠原代腹膜间皮细胞至第二代,静止24 h后,随机分为:正常对照组(A组),AGI(2 g/ml)组(B组),TGF-β-1 (10 ng/ml) 组(C组),TGF-β-1+AGI (2 g/ml) 组(D组,AGI预处理1 h).用荧光染料(DCF)及激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧(ROS).RT-PCR检测NADPH氧化酶亚基p67phox mRNA的表达;Western印迹检测p67phox的蛋白表达.结果:TGF-β-1可显著增加大鼠腹膜间皮细胞ROS产生,刺激20 min后,ROS的表达较对照组显著上升(P< 0.05).AGI可显著抑制TGF-β-1刺激后ROS的产生 (P<0.05);大鼠腹膜间皮细胞经TGF-β-1刺激后,NADPH氧化酶亚基p67phox mRNA和蛋白的表达均上升,AGI可抑制TGF-β-1诱导的p67phox mRNA和蛋白的表达上调,差异有统计学意义(P<0.05).结论:TGF-β-1可诱导大鼠腹膜间皮细胞产生的ROS 增加、NADPH氧化酶亚基p67phox 表达上调;AGI可抑制NADPH氧化酶的表达和活性ROS的产生,从而为AGI防治腹膜纤维化提供了理论依据.

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