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AlphaScreen技术文献资料
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高通量检测蛋白磷酸化技术研究
目的 研究常规细胞裂解法与AlphaScreen技术结合检测细胞内蛋白磷酸化水平的可行性. 方法 使用常规配制的细胞裂解缓冲液裂解细胞,分别用传统的Western blot方法和AlphaScreen技术检测在表皮生长因子(EGF)刺激下乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞内AKT磷酸化(p-AKT)水平的变化. 结果 使用AlphaScreen技术检测到的p-AKT变化趋势和幅度与使用传统Western blot方法检测所得结果一致,同时AlphaScreen技术所得结果更快速. 结论 常规细胞裂解法所得细胞裂解液可用于AlphaScreen技术检测细胞内蛋白磷酸化水平,该方法使AlphaScreen技术成为一种可以替代Western blot法检测组织和细胞内蛋白激酶活性的高效和灵敏的手段.
关键词： 细胞裂解 AlphaScreen技术 蛋白磷酸化
