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肌成束蛋白-1表达对肝癌细胞增殖及细胞骨架的影响
目的：研究肌成束蛋白-1（Fascin-1）表达对肝癌细胞 HepG2增殖能力和骨架结构的影响。方法采用 RNA 干扰技术抑制 HepG2中 Fascin-1表达；噻唑蓝（M TT ）法检测细胞增殖；免疫荧光法检测 Fascin-1表达下调后肌动蛋白微丝的改变。结果 RNA 干扰可有效抑制 HepG2中 Fascin-1表达。 Fascin-1蛋白表达下调可抑制细胞增殖，同时引起细胞微丝排列紊乱、断裂、网状结构消失呈絮状，部分细胞收缩。结论 Fascin-1下调引起的肌动蛋白微丝的破坏，一方面可能导致了癌细胞增殖抑制，另一方面可能通过影响细胞运动能力而降低细胞的迁移侵袭能力。
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Fascin-1在颞叶癫痫大鼠中表达的变化
目的 研究肌成束蛋白Fascin-1在颞叶癫痫模型大鼠颞叶皮质及海马中的表达变化,探讨Fascin-1与颞叶癫痫的关系及其意义.方法 56只雄性SD大鼠分为对照组(5只)、实验组(35只)以及用于行为学观察的干预组(8只)和模型组(8只).实验组大鼠腹腔注射匹鲁卡品建立颞叶癫痫模型,并在模型点燃后的不同时间点(6h、24h、72 h、1周、2周、1个月、2个月)断头取脑;干预组进行外源性Fascin-1干预后,观察其造模后行为学的改变.后分别运用免疫组化、Western blot检测实验组及对照组颞叶皮质和海马中Fascin-1蛋白的动态变化;用免疫荧光双标对Fascin-1进行定位.结果 行为学结果示干预组癫痫发作的潜伏期及达到4/5级所需的时间较模型组明显延长(P＜0.05),但发作程度与模型组比较差异无统计学意义(P＞0.05).免疫组化结果显示,实验组大鼠颞叶皮质和海马中的Fascin-1表达水平在各个时间点都低于对照组,差异有统计学意义(P ＜0.05,皮质6h时间点除外).Westem blot检测结果同样显示实验组Fascin-1蛋白表达水平在各个时间点都低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05,皮质6h时间点除外).免疫荧光双标检测结果显示,Fascin-1主要表达于神经元上而不是星形胶质细胞.结论 Fascin-1蛋白的水平在颞叶癫痫大鼠模型中显著下调,外源性给予Fascin-1多肽后,发现对癫痫的发作有延缓作用.提示Fascin-1蛋白的降低可能与颞叶癫痫的病理过程有着密切关系.
