首页 > 文献资料
-
肾小管上皮细胞线粒体氧化损伤在肾间质纤维化中的病理学机制研究
目的：研究肾小管上皮细胞线粒体氧化损伤在肾间质纤维化中的病理学机制。方法：80只雄性大鼠随机平分为假手术组和UUO模型组，每组40只，行大鼠左侧输尿管结扎术，假手术组游离左侧输尿管但不予结扎，其余手术与UUO模型组相同。分别于术后d3、d7、d10、d14、d21每组处死8只，取大鼠左侧肾脏。①检测并比较假手术组和UUO模型组大鼠线粒体相关基因的表达水平；②检测两组大鼠肾脏组织COX和SOD含量变化；③检测两组大鼠肾脏组织RIF指数变化；④检测并比较肾体比、肾功能和肾组织Hyp含量动态变化。结果：与假手术组大鼠相比，①UUO模型组大鼠的线粒体相关基因的表达水平显著升高（P＜0.05），包括线粒体mtDNA、再生基因（PGC1a、NRF1和Tfam）、断裂基因（Mfn1、Mfn2和Opa1）和融合基因（Drp1和Fis1）；②UUO模型组大鼠在造模后10d、14d和21d，肾脏组织中的COX水平显著升高（P＜0.05），SOD水平显著降低（P＜0.05），造模时间越长，UUO模型组大鼠COX水平越高（P＜0.05），SOD水平越低；③UUO模型组大鼠造模后10d、14d和21d，肾脏组织RIF指数均显著升高（P＜0.05）；④UUO模型组大鼠肾体比明显升高且一直维持在较高水平（P＜0.05），造模时间越长，模型大鼠血清Scr和BUN水平及肾组织Hyp含量水平逐渐升高，与假手术组相比均具有显著差异（P＜0.05）。结论：与假手术组大鼠相比，UUO模型组大鼠肾组织中的线粒体更活跃，线粒体基因、再生基因、断裂基因和融合基因含量升高，COX含量升高，SOD含量降低，RIF指数升高，肾体比、血清Scr和BUN和肾组织Hyp水平显著升高。
-
紫檀芪对小鼠HT22细胞模拟缺血再灌注损伤的保护作用
目的 探索紫檀芪(PTE)对小鼠HT22细胞模拟缺血再灌注(SIR)的影响及机制.方法 建立HT22细胞SIR模型,分别用(1.25、2.50、5.00) μmol/L PIE处理SIR模型细胞.通过相差倒置显微镜观察细胞生长状态,利用MTT法检测细胞活力,利用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡,利用分光光度法检测线粒体复合物Ⅰ和Ⅳ活性,利用JC-1染色法检测线粒体膜电位(MMP),利用2',7'-二氯二氢荧光素乙酸乙酯(H2DCFDA)染色检测线粒体活性氧(ROS),利用Western blot法检测血红素加氧酶1(HO-1)、NADPH醌氧化还原酶1(NQO1)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)的蛋白水平.结果 与对照组细胞相比,SIR损伤组细胞贴壁减少,细胞活性较差.PTE以浓度依赖的方式增强SIR损伤的HT22细胞活力,减少SIR损伤细胞凋亡,提高线粒体复合物Ⅰ/Ⅳ活性和MMP,减少ROS水平,上调HO-1、NQO1和GST蛋白的表达.结论 PTE对HT22细胞SIR损伤具有保护作用,其机制是通过减轻线粒体损伤和促进HO-1、NQO1和GST蛋白的表达.
-
紫檀芪激活血红素加氧酶-1减轻小鼠脑缺血再灌注后线粒体氧化损伤
目的:探索紫檀芪(pterostilbene,PTE)对小鼠脑缺血再灌注(IR)后线粒体氧化损伤的作用及可能机制.方法:通过双侧颈总动脉阻断法建立小鼠脑IR模型,腹腔注射PTE或ZnPP(血红素加氧酶-1抑制剂),动物随机均分为IR组、PTE+ IR组、PTE+ ZnPP+ IR组、ZnPP+ IR组,并且PTE有2.5 mg/kg、5 mg/kg、10 mg/kg三个剂量组.然后,进行神经功能评分;通过干湿比重法测定脑水肿;火焰光度法测定Na+含量;NeuN和TUNEL法测定细胞存活和凋亡;通过线粒体膜电位(MMP)、线粒体活性氧(ROS)产物和线粒体复合物Ⅰ和Ⅳ活性测定来检测线粒体的氧化应激损伤;通过Western Blot检测血红素加氧酶-1(HO-1)、NADPH醌氧化还原酶-1(NQO1)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、线粒体和胞浆细胞色素c蛋白的表达.结果:PTE可以提高小鼠的神经功能评分、减轻脑水肿和降低脑Na+含量.PTE上调HO-1、NQO1和GST的表达,提高MMP、线粒体复合体Ⅰ/Ⅳ活性和线粒体细胞色素c水平,减少线粒体ROS产物和降低胞浆细胞色素c水平,并且有一定的剂量依赖性.但是,PTE的这些作用可以被HO-1的抑制剂ZnPP逆转.结论:在脑IR模型小鼠,PTE通过激活HO-1信号减轻线粒体氧化应激损伤和细胞死亡,从而发挥脑保护作用.
