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大鼠急性羰基镍中毒肝脏SOD酶活力及其基因表达的观察
目的 通过研究大鼠急性羰基镍中毒肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活力变化与Cu-Zn SOD基因表达,探讨急性羰基镍中毒对肝脏的急性毒性作用及其中毒机制.方法 健康SD大鼠静态吸入方式染毒,羰基镍染毒浓度分别为20、135和250 mg/m<'3>,设氯气染毒250 mg/m<'3>为染毒对照组,染毒时间均为30 min,并设正常对照组,染毒后第1、第2、第3和第7天取材,应用黄嘌呤氧化酶测定法和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法分别测定不同组大鼠肝组织SOD活力并分析Cu-Zn SOD mRNA的表达水平.结果 在低、中、高剂量羰基镍染毒条件下,肝脏SOD活力均明显下降(P<0.05),以染毒第3天时肝SOD降低为明显(P<0.05);氯气染毒后肝脏SOD活力也明显下降(P<0.05).在氯气染毒第2天和高剂量羰基镍染毒组染毒第3天,肝脏Cu-Zn SOD基因表达低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 高、中、低剂量羰基镍均可诱发肝组织氧化损伤,降低SOD活力,以染毒第3天和第7天下降明显.
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副结核分枝杆菌SOD基因在大肠杆菌中的表达
目的 构建副结核分枝杆菌SOD基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得表达.方法 以BamH I和EcoR I双酶切pGEM-T-SOD和pET-28a(+),并将纯化的SOD基因亚克隆至pET-28a(+)中,构建原核表达质粒pET-28a-SOD,并将其转化至感受态E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE和Western bloting分析.结果 成功地构建出原核表达质粒pET-28a-SOD,并表达了约26.5kDa融合外源蛋白带,且具有牛副结核分枝杆菌抗原反应性.结论 副结核分枝杆菌SOD基因在大肠杆菌中获得了表达,并具有抗原反应性,为进一步研究SOD作为诊断试剂或亚单位疫苗奠定了基础.
