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  • 阪崎肠杆菌免疫富集及快速检测方法建立

    作者:陈艳;朱小清;方水琴;郭慧琴;刘箐

    目的 将特异性抗体免疫富集和聚合酶链反应(PCR)方法有机结合,建立乳制品中阪崎肠杆菌免疫富集及快速检测方法.方法 用特异性阪崎肠杆菌单克隆抗体包被的PCR管对样品中病原菌进行特异性免疫富集后,以PCR管中免疫富集的阪崎肠杆菌为模板直接进行PCR扩增,通过特异性、灵敏度、模拟增菌等实验,确认该方法实际检测的可行性并与酶联免疫吸附实验(ELISA)进行比较.结果 免疫富集捕获-PCR(IC-PCR)法检测阪崎肠杆菌纯菌液灵敏度可达102 ~ 103 CFU/mL,是直接PCR的103~ 104倍;特异性验证表明,该方法与常见食源性致病菌无交叉反应;模拟带菌实验显示灵敏度可达到103 CFU/mL;模拟增菌实验显示该方法检测阪崎肠杆菌只需增菌6h,而用ELISA试剂盒需要增菌16 h.结论 该方法灵敏度高、特异性强、检测周期短.

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