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已烯雌酚与人乳腺癌细胞WISP-2基因表达
目的 探讨已烯雌酚(DES)对人乳腺癌细胞(MCF-7细胞株)WISP-2基因(wnt-1 inducible signaling pathway protein-2)表达的影响及DES在乳癌发生中的作用机制.方法 用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测DES对人乳癌MCF-7细胞生长活性的影响;以免疫细胞化学法及逆转录-聚合酶链反应法检测DES对人乳癌MCF-7细胞WISP-2 mRNA和WISP-2蛋白表达影响.结果 DES使MCF-7细胞增殖率增加,其吸光度A570值明显上升,与对照组比较,P＜0.05.以10nmol/L的DES分别作用细胞不同时间,A570值随着作用时间的延长而增加.DES可使MCF-7细胞WISP-2mRNA和WISP-2蛋白表达上升,WISP-2蛋白和mRNA的表达强度随药物浓度增加而升高,WISP-2 mRNA和蛋白表达随DES作用时间的延长而增加,其效应类似于雌二醇.结论 IDES能促进MCF-7细胞增殖,2DES能诱导MCF-7细胞的WISP-2基因表达增加,作用强度随剂量的增加而增加;随着作用时间的延长而上升.
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WISP-2、及FGFBP1在非小细胞肺癌中的表达
目的:研究WISP-2及FGFBP1在非小细胞肺癌中的表达情况,并剖析两者之间的相互关系,及评估两种因子与非小细胞肺癌患者在相关的临床参数之间的关系.方法:采用IHC-P法对经病理证实为NSCLC患者40例,取其癌组织标本及远离癌肿5cm的组织标本40例作为对照组.所有患者在术前未经经放、化疗、激素的应用及其它抗癌治疗.结果:①NSCLC中WISP-2的阳性表达率25例(62.5％)明显低于对照组的阳性表达率33例(82.5％),NSCLC中FGFBP1的阳性表达率30例(75％)明显高于对照组的阳性表达率12例(30％).②WISP-2(+)FGFBP1(+)13例、WISP-2(-)FGFBP1(+)12例、WISP-2(+)FGFBP1(-)13例、WISP-2(-)FGFBP1(-)2例,两因子表达呈负相关,差异具有统计学意义(x2=4.95,P＜ 0.05).③WISP-2与FGFBP1在年龄及性别的阳性表达率不具有统计学意义(P＞0.05),而其他临床参数均具有统计学意义(P＜0.05).结论:在NSCLC中,WISP-2呈低表达而FGFBP1则相反,两者呈负相关,且WISP-2与FGFBP1在年龄及性别的阳性表达无相关性而在其他临床参数之间关系密切,可以作为临床诊断的参考指标,也可以为NSCLC的临床治疗提供新的思路.
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WISP-2 siRNA对人脑胶质瘤U251细胞增殖、凋亡的影响
目的 探讨siRNA沉默WISP-2基因表达对人脑胶质瘤细胞U251增殖、凋亡的影响.方法 脂质体介导siRNA转染人脑胶质瘤细胞U251后,检测U251细胞的增殖、凋亡的变化,并用Western blot法检测WISP-2、Bcl-2、Bax蛋白的表达.结果 WISP-2 siRNA能有效抑制U251细胞株的生长,诱导凋亡,siRNA干扰组WISP-2蛋白表达水平为(18.67±1.40)％,明显低于空白对照组(70.18±1.82)％和阴性对照组(69.41±1.77)％,且差异有统计学意义(P＜0.01)；siRNA干扰组Bcl-2、Bax蛋白表达水平为(29.67±1.47)％、(31.62±1.32)％,明显低于空白对照组和阴性对照组,且差异有统计学意义(P＜0.01).结论 WISP-2 siRNA抑制WISP-2 mRNA和蛋白表达后,能有效抑制胶质瘤细胞的增殖,增加U251细胞凋亡,可能通过下调Bcl-2/Bax蛋白表达的比值来诱导细胞凋亡.
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WISP-2在人脑星形细胞瘤中的表达研究
目的 探讨WISP-2 mRNA及蛋白在人脑星形细胞瘤中的表达及意义.方法 采用半定量PCR检测WISP-2mRNA在人脑星形细胞瘤组织与正常脑组织中的表达差异;随后利用免疫组化方法验证WISF-2蛋白在星形细胞瘤组织与正常脑组织之间的表达差异.结果 半定量PCR检测发现,WISP-2 mRNA在正常脑组织中无表达,在星形细胞瘤中相对表达量为0.677±0.445,两者比较有统计学意义(t=4.783,P<0.05).在高级别组(Ⅲ-Ⅳ)与低级别组(Ⅰ-Ⅱ)星形细胞瘤中的相对表达量分别为0.924±0.438、0.478±0.344,两者比较有统计学意义(t=3.909,P<0.05).免疫组化检测发现,正常脑组织细胞中无WISP-2蛋白阳性表达(0/10),WISP-2蛋白在星形细胞瘤组织内呈高表达,阳性率为66.0%(31/47),两者比较有统计学意义(x2=11.92.P<0.01),WISP-2蛋白在高级别组(Ⅲ一Ⅳ)与低级别组(Ⅰ-Ⅱ)星形细胞瘤中的表达阳性率分别为85.7%(18/21)、50.0%(13/26),两者比较有统计学意义(x2=6.60,P<0.05),与WISP-2 mRNA在星形细胞瘤组织内表达特征相一致,两者具有正相关性(r=0.63,P<0.001).结论 WISP-2 mRNA和蛋白在人脑星形细胞瘤组织中明显高表达,并与其恶性程度有关,可作为判断脑星形细胞瘤恶性程度的一个辅助指标.
