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乙醇对胰岛β细胞功能及胰岛素基因表达影响
目的观察乙醇对原代培养的大鼠胰岛细胞及小鼠胰岛瘤细胞(NIT-1细胞)胰岛素分泌功能的影响并探讨其机制.方法体外培养的大鼠胰岛细胞及NIT-1细胞,不同剂量乙醇作用不同时间后,用放免法测定胰岛素分泌情况,RT-PCR方法检测胰岛素mRNA的表达.结果(1)乙醇对NIT-1细胞胰岛素分泌及胰岛素mRNA表达影响:作用6 h,胰岛素分泌增加,各剂量组(除400 mmol/L)胰岛素mRNA表达升高;作用12,24 h,胰岛素分泌降低,胰岛素mRNA表达均降低.(2)乙醇对原代培养的大鼠胰岛细胞的胰岛素分泌及胰岛素mRNA表达影响:作用12 h,低剂量组胰岛素分泌升高,胰岛素mRNA表达升高,高剂量组胰岛素分泌下降;胰岛素mRNA表达下降;随乙醇作用时间延长,胰岛素分泌先升高(6 h),然后下降(24 h),胰岛素mRNA表达短时间(6 h)上升,作用24 h表达下降.结论乙醇对胰岛β细胞胰岛素分泌及胰岛素mRNA表达的影响与作用时间、剂量有关,胰岛素mRNA表达水平的改变可能是乙醇影响胰岛β细胞胰岛素分泌的机制之一.
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血管紧张素Ⅱ对RIN-m细胞胰岛素基因表达的影响及其分子机制研究
目的:探讨血管紧张素Ⅱ( angiotensin Ⅱ, AngⅡ)对RIN-m细胞胰岛素基因表达的影响及其相关分子机制. 方法:常规培养大鼠胰岛素瘤RIN-m细胞,分为3组:空白对照组、100 nmol·L-1 AngⅡ组和氯沙坦预处理组,干预24 h,采用RT-PCR法检测胰岛素基因表达,流式细胞仪检测2',7'-二氯荧光素(DCF)的平均荧光强度,RT-PCR法检测胰十二指肠同源盒-1( PDX-1)及肌腱膜纤维肉瘤肿瘤基因同系物A(MafA)mRNA表达,Western-blot法检测PDX-1及MafA蛋白表达. 结果:100 nmol·L-1 AngⅡ组与空白组和氯沙坦预处理组间的胰岛素mRNA表达、活性氧( reactive oxygen species, ROS)水平、PDX-1、MafA mRNA及蛋白表达均有显著差异(P<0. 05),后两者之间差异无统计学意义(P>0. 05). 结论: AngⅡ可能通过氧化应激途径下调β细胞的PDX-1及MafA活性,进而抑制β细胞胰岛素基因表达. 氯沙坦预处理可以拮抗AngⅡ对β细胞的氧化应激损伤,从而在胰岛素基因表达方面对β细胞起到保护作用.
