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小鼠ZnT3 cDNA片断的克隆及其mRNA表达
为了解ZnT3(zinc transporter3)mRNA在小鼠各组织中的表达状况,用反转录多聚酶链反应法(RT-PCR)克隆ZnT3 cDNA片断,荧光标记的全自动测序法确定ZnT3 cDNA片断的碱基顺序,RT-PCR法检测小鼠各组织ZnT3 mRNA表达并比较在组织中的表达量.结果:RT-PCR获得单一条带的片断,其大小700bp,碱基顺序与文献报道序列一致;在大脑皮层、海马和睾丸中检测到ZnT3 mRNA表达,其中睾丸中表达量高,大脑皮层、海马表达量无显著性差别,心、肝、脾、肺、肾、小肠及嗅球、小脑等组织中未见ZnT3 mRNA表达.说明克隆到正确的ZnT3 cDNA片断.ZnT3 mRNA主要表达于睾丸、大脑皮层、海马,提示ZnT3可能在脑功能和生殖功能中具有重要作用.
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低锌浓度培养基对Caco2细胞二价金属离子转运体mRNA表达的影响
锌是人体必需的微量营养素之一,锌缺乏或过量与多种机能紊乱相关.二价金属离子转运体(divalent metal transporter 1,DMT1)是近期发现的哺乳动物金属离子转运体,在机体所有组织几乎均有表达,具有对铁、锌等多种二价金属离子的转运功能[1].我们既往的实验结果显示膳食高锌可以导致断乳小鼠睾丸DMT1 mRNA表达显著降低,约为适锌时表达量的1/3~1/4,提示可能为哺乳期后幼鼠维持锌内稳态的一种反馈保护机制,但是脑组织中的DMT1 mRNA表达未见变化,提示在脑组织锌转运中DMT1可能不作为主要的转运体[2].小肠是锌吸收的重要场所,DMT1是否参与小肠锌吸收过程?我们以不同锌浓度培养的Caco2细胞为模型,观察其对DMT1 mRNA表达的影响及其规律,探讨DMT1在小肠锌吸收中的可能作用.