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5-FU在大剂量放疗中诱导人胰腺癌细胞株细胞凋亡的实验研究
目的:通过对化疗药物5-氟尿嘧啶(5-FU)在大剂量放疗中诱导人胰腺癌细胞株细胞凋亡的观察,探讨化疗药物与放疗联合应用的作用机制,为临床制定合理的放化疗方案提供理论依据.方法:将人胰腺癌细胞株panc-1细胞放入培养箱中培育24h后分为三组,(1)单纯照射组:给予10Gy剂量γ射线照射24 h;(2)先化后放组:先分别加入25、50、75、100 μg/mL 的5-FU,24 h 后进行10Gy剂量γ线照射24 h;(3)先放后化组:先给予10Gy剂量γ线照射,24 h 后分别加入 25、50、75、100 μg/mL 的5-FU作用24 h.分别采用透射电镜观察细胞凋亡的形态学表现;流式细胞仪计数细胞凋亡率;免疫组化测定Bcl-2和Bax蛋白表达率.结果:细胞凋亡的形态学表现,为细胞体积缩小、绒毛消失、凋亡细胞呈核固缩、形态多样、异染色质浓集于核膜处、分界清楚、凋亡小体形成.细胞凋亡率:单纯照射组为9.75%;先化后放组分别为11.0%、16.7%、27.3%、15.2%;先放后化组分别为10.5%、12.9%、13.4%、14.6%.Bcl-2阳性表达率(%):单纯照射组为(32.9±0.2);先化后照组分别为(30.8±0.05)、(28.7±0.3)、(25.6±0.2)、(24.7±0.1);先照后化组分别为(32.0±0.5)、(31.7±0.3)、(31.0±0.2)、(33.4±0.1).Bax阳性表达率(%):单纯照射组为(25.4±0.2);先化后照组分别为(30.6±0.3)、(39.8±0.4)、(40.4±0.1)、(43.1±0.5);先照后化组分别为(24.6±0.1)、(26.7±0.3)、(25.9±0.2)、(23.9±0.5).结论:照射前后24 h 分别加入不同剂量的5-FU对细胞的诱导作用均比单纯照射大,其中,以照射前24 h 加入75 μg/mL 5-FU细胞凋亡率高,5-FU与放射治疗联合能够增加对细胞的诱导作用,对放疗有增敏作用.5-FU在大剂量放疗中诱导细胞凋亡与凋亡抑制基因Bcl-2及凋亡促进基因Bax的表达有关.
