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车前草提取工艺及大车前苷含量测定
[目的]通过实验方法研究分析车前提取工艺.[方法]采用L9 (34)重复正交试验设计方法,将车前草中大车前苷含量设定为检验和评价指标,逐一考察乙醇浓度(A)、提取时间(B)、提取次数(C)、乙醇用量(D),分析各因素对车前草中大车前苷提取率影响,优选出车前草的佳提取工艺条件和相关参数.采用HPLC方法对车前草提取液中所含大车前苷含量进行测定.[结果]乙醇浓度、提取次数和提取时间,以及溶媒量对车前草中大车前苷提取都能产生较为明显的影响,作用大小可排序为:提取次数＞提取时间＞溶媒量＞乙醇浓度.增加提取次数也可使得大车前苷提取率更高.[结论]车前草醇提物,大车前苷是主要有效成分之一.
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HPLC检测白血病细胞系CYP3A5活性方法的建立与应用
目的建立白血病(AL)细胞系CYP3A5活性检测方法,研究化疗药对其活性的调控.方法HPLC法检测药物干预后AL细胞系CYP3A5活性.结果以1×106细胞、氢化考的松终浓度100 μmol/L、孵育24 h为AL细胞体外培养条件下氢化考的松6β-羟化活性检测的孵育条件.K562细胞CYP3A5活性显著高于HL 60、NB4和Jurkat细胞.柔红霉素作用24 h后K562细胞CYP3A5活性增高,48 h后活性显著增高;而NB4与Jurkat细胞在其作用后活性无改变.地塞米松作用24 h后Jurkat细胞CYP3A5活性显著增高,48 h后活性又显著增高.全反式维甲酸作用24 h后NB4细胞CYP3A5活性显著增高,72 h后活性又显著增高.结论HPLC检测AL细胞体外培养条件下氢化考的松6β-羟化活性方法的建立可用于研究AL细胞CYP3A5活性.柔红霉素、地塞米松、全反式维甲酸的应用可诱导某些AL细胞株CYP3A5活性.
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头孢匹胺在小鼠睾丸组织中RP-HPLC检测方法的建立
目的 建立一种测定睾丸组织中头孢匹胺的RP-HPLC检测方法,用于头孢匹胺在小鼠睾丸组织中的分布和消除规律研究.方法 睾丸组织匀浆液样品经液-液萃取后,以甲醇-三乙胺醋酸-水=22-0.2-77.8(v/v)为流动相,流速1.0mL·min-1,采用大连依利特BDS柱(250mm×4.6mm;i.d.,5μm)色谱柱分离,柱温30℃,紫外检测波长254nm.结果 标准曲线线性范围0.1-50mg·kg-1,线性关系良好(r＞0.999),定量限为0.1mg·kg-1,回收率95%以上,日内和日间变异系数均低于10%.结论 该方法操作简便、灵敏、准确,适合于临床前药动学及组织分布的初步研究.
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奥硝唑在小鼠睾丸组织中RP-HPLC检测方法的建立
目的 建立一种测定睾丸组织中奥硝唑的RP-HPLC检测方法,用于奥硝唑在小鼠睾丸组织中的分布和消除规律研究.方法 睾丸组织匀浆液样品经液-液萃取后,以甲醇-水=25:75(v/v)为流动相,流速1.0mL·min-1,采用大连依利特ODS柱(250mm×4.6mm;i.d.,5μm)色谱柱分离,柱温30℃,紫外检测波长310nm.结果 标准曲线线性范围0.1～50mg·kg-1,线性关系良好(r＞0.999),定量限为0.1mg·kg-1,回收率95%以上,日内和日间变异系数均低于10%.结论 该方法操作简便、灵敏、准确,适合于临床前药动学及组织分布的初步研究.
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消栓通络片中三七参有效成分人参皂苷Rg1的含量测定
目的:建立消栓通络片的含量测定方法.方法:采用HPLC法对三七参中人参皂苷Rg1进行含量测定.结果:人参皂苷Rg1在0.69～5.52μg间线性关系良好,r=1.0000,平均回收率为99.95%.结论:所建方法简便准确可行,重现性好,适用于该制剂的质量控制.
