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直接镜检法在无精子症睾丸组织检测中的应用
世界卫生组织(WHO)规定,夫妇同居1年以上、未采用任何避孕措施,由于男方因素造成女方不育者,称为男性不育.目前世界上约有25%的育龄夫妇无法生育,男性不育占50%[1],其中无精子症患者占10%~20%[2].无精子症根据病因一般分为梗阻性无精子症和非梗阻性无精子症.前者睾丸生精功能正常,病变存在于输出道;非梗阻性无精子症病变在睾丸,生精功能有不同程度受损.睾丸活检曾经是唯一对无精子症有诊断价值的检查,但随着辅助生育技术的出现,尤其卵胞浆内单精子注射技术(ICSI)及经皮睾丸穿刺取精(TESA)技术的发展,睾丸活检已从一种单纯的诊断方法变成了一种辅助治疗的手段.
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镉对大鼠睾丸中某些酶活性及组织形态的影响
镉是环境中常见的有毒重金属之一,可引起多器官系统毒性,并且具有生殖系统(睾丸)毒性.我们研究了镉染毒后,大鼠睾丸组织中某些酶活性指标及组织形态的变化,探讨镉对生殖系统的毒性及其机制.
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维生素A缺乏对大鼠睾丸组织酶活性的影响
生素A(VA)是目前世界上特别是包括我国在内的发展中国家易缺乏的营养素之一 ,其它营养素缺乏也常常伴有VA缺乏.近期调查表明,在我国城市居民中摄入量不足推荐每日膳食中营养素供给量(RDA)的50%的个体,男女分别占46.8%和50.6%,儿童青少年、农村居民摄入不足者更多[1].VA在生长发育以及在维持机体正常生理功能方面都发挥重要作用.V A缺乏会导致暗适应力下降、生长迟滞、睾丸、卵巢等器官萎缩、上皮细胞角化过度等 [2]. 本研究观察了VA缺乏对大鼠生精能力、睾丸标志酶的活性及胆固醇含量的影响,对VA缺乏影响生殖功能的机理作了初步探讨.
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冷冻技术的相关危险及应对措施
近年来,随着冷冻技术的不断发展和在生殖领域的广泛应用,其安全性也逐渐受到人们的关注.冷冻精子、卵子、胚胎以及卵巢或睾丸组织是辅助生殖领域的重要服务项目.这些标本如何得到安全、妥善的保存,如何应对与冷冻有关的危险均成为敏感而重要的问题.从标本的采集、处理、冷冻保存到标本的解冻和终使用,无论在实施冷冻技术的过程中还是冷冻设备本身都存在许多危险因素,如:对工作人员的伤害,标本的丢失或混淆,标本提前意外解冻,标本间的交叉污染等[1],这些危险事件的发生与许多因素有关.提供冷冻服务的医学中心必须要有相关的评估系统,即对冷冻过程中可能出现的意外情况进行预先的评估并制定相应的预防和应急措施.在许多国家(如英国、澳大利亚、新西兰等)都有量化的评价系统,可以指导人们采取有效措施,尽量减少和避免意外事件的发生.本文将重点讨论在实施冷冻技术时应该特别注意的问题.
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人类男性生殖组织库的发展趋势及伦理问题
以生殖力保存和预防疾病为目的,建立大型冷冻贮存库,分类冻存男性生殖细胞和组织,包括:精子、睾丸组织以及精原干细胞,并开展相关技术的研究,包括睾丸组织冷冻及原位和异位自体移植、精原干细胞的分离培养与低温保存、精原干细胞生精小管内移植,从而发展成为较为完善的男性生殖细胞/组织库,可能成为人类辅助生殖技术的一个发展趋势.
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补肾中药对雷公藤多苷所致生殖损伤雄性幼鼠血清睾酮及睾丸组织P450scc的影响
目的:研究雷公藤多苷(glycosides of Tripterygium wilfordii,GTW)对幼年雄性大鼠血清睾酮及睾丸组织中睾酮生成酶细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(cyto-chrome P450 side chain cleavage,P450scc)的影响以及补肾中药(菟丝子黄酮、六味地黄丸)对其损伤的干预作用.方法:3~4周龄SD雄性幼鼠48只,随机分为4组:空白组(CMC-Na)、多苷组(9 mg·kg-1·d-1)单独ig,六味组(六味地黄丸1g·kg-1·d-1 +GTW9 mg· kg-1·d-1),黄酮组(菟丝子黄酮0.1 g·kg-1·d-1+GTW 9mg · kg-1·d-1)混合ig,持续给药12周后,处死大鼠留取血清和睾丸组织,采用放免法检测血清睾酮浓度;采用RT-PCR和Western blot检测睾丸组织中p450scc在基因和蛋白水平的表达.结果:GTW组与空白组相比可以明显降低血清睾酮(P<0.01);六味组与多苷组相比可以明显提高血清睾酮(P<0.05);在蛋白水平GTW与空白组相比可以明显降低睾丸组织P450scc(P <0.05);在基因水平GTW组与其他组比较无显著性差异.结论:GTW对幼年大鼠生殖系统有一定损伤作用;六味地黄丸可以通过提高雄鼠血清睾酮水平而达到保护生殖损伤的作用.
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基于“阴中求阳”理论探讨右归丸及其拆方对肾阳虚证大鼠睾丸组织的影响
目的:探讨右归丸及其拆方对肾阳虚雄鼠睾丸组织病理变化的影响.方法:取雄性SD大鼠50只,随机分成正常对照组、模型对照组、补阴药组、补阳药组、全方组,除正常对照组外,其他组建立肾阳虚动物模型.造模成功后,补阴药组、补阳药组、全方组分别给予相应药物连续灌胃,正常对照组与模型对照组给予等量的0.9%氯化钠溶液灌胃,达疗程后,测定大鼠体质量、睾丸重量、血清中睾酮(T)含量并在光镜下观察睾丸微细结构.结果:与模型对照组比较,右归丸及其拆方均能改善大鼠体质量、睾丸指数、血清T含量(P<0.05)及大鼠睾丸组织结构,其中全方组的作用强,而补阴药组提升大鼠体质量作用优于补阳组(P<0.05);补阳药组提升睾丸指数、血清T含量(P<0.05)及改善睾丸组织结构作用优于补阴组.结论:右归丸全方较补阴组及补阳组能更有效的对肾阳虚证大鼠体质量、睾丸指数、血清中的T含量及睾丸微细结构产生良性影响.
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菟丝子黄酮对雷公藤多苷所致生殖损伤的雄性幼鼠睾丸组织中表皮生长因子表达的影响
目的:研究雷公藤多苷(GTW)对幼年大鼠睾丸组织表皮生长因子(EGF)表达的影响以及菟丝子黄酮的干预作用.方法:3周龄SD雄性幼鼠48只,随机分为4组:空白组,多苷组,六味组(六味地黄丸+GTW),黄酮组(菟丝子黄酮+GTW),持续给药12周后,应用原位杂交及Western Blot法检测各组动物睾丸组织EGF mRNA及EGF蛋白表达.结果:GTW可以明显降低EGF mRNA和蛋白的表达,多苷组与空白组比较有显著性差异(P<0.05);菟丝子黄酮可以明显升高EGF mRNA和蛋白的表达,黄酮组与多苷组比较有显著性差异(P<0.01).结论:GTW对幼年大鼠睾丸组织EGF mRNA及EGF蛋白表达有一定的抑制作用,菟丝子黄酮能够提高EGFmRNA及EGF蛋白表达量而起到保护GTW所致的雄性幼鼠生殖损伤作用.
关键词: 菟丝子黄酮 雷公藤多苷 睾丸组织 表皮生长因子mRNA 表皮生长因子蛋白 -
慢性复合式应激对雄性小鼠生育能力的影响
目的:了解不同应激时间的慢性复合式应激对雄性小鼠生育能力的影响.方法:72只昆明种雄性小鼠随机分为正常3周组、应激3周组、正常5周组、应激5周组、正常7周组、应激7周组.将心理应激、束缚、尾悬挂、站台、夹尾搏斗5种应激方法(纯心理应激、心理和生理复合应激)随机安排到各应激时间内,制作慢性复合式应激动物模型,于末次应激后第2天,摘眼球取血,离心取血清进行促卵泡激素(FSH)、促黄体激素(LH)、睾酮(T)检测;取睾丸、附睾称重,进行精子计数、摄像(精子质量分析)和精子内pH值检测;并进行睾丸切片,HE染色后观察其病理变化.结果:5种应激方法组成的复合式应激方式能显著降低动物的体重增长率、精子密度和精子活率,精子内pH值及血清FSH、T水平有不同程度地降低.病理分析睾丸生精上皮的排列、层数、管腔精子数等也不同程度地改变.随着应激时间的延长,小鼠的体重增长率、精子内pH值等都呈上升的趋势.结论:5种应激方法组成的慢性复合式应激方式能显著改变雄性小鼠与生育有关的生理特性,降低其生育能力;随着应激时间的延长,部分指标可以出现可逆性变化.
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阴囊鳞癌1例
1病历摘要患者,28岁,司机,因阴囊皮肤溃疡2年余入院,查体:阴囊肿胀,右侧阴囊可见约8 × 7cm大小溃疡,边缘凸起于阴囊皮肤,中心液化坏死,味臭,双侧腹股沟淋巴结肿大,大者3×3cm大小,彩超检查示双侧腹股沟淋巴结肿大,睾丸组织正常,入院检查病人有高血压、高血脂、糖尿病,入院后在局麻下行阴囊组织活检及右侧腹股沟淋巴结活检,病例检查示阴囊皮肤鳞癌伴腹股沟淋巴结转移,完善相关辅助检查后在硬膜外麻醉下行阴囊鳞癌皮肤扩大切除术,切除肿瘤组织及其边缘2cm阴囊皮肤,术中探查见病变为累及睾丸组织,故保留睾丸组织,切缘快速病理阴性,2周后再次在硬膜外麻醉下行双侧腹股沟淋巴结清扫术.
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Bmil基因在小鼠睾丸组织中的表达定位
精原干细胞能通过自增殖不断地自我更新,形成不同发育阶段的生精细胞并维持其正常数目.Broil基因属于Polvcomb家族,近发现它对造血干细胞、白血病干细胞、神经干细胞等自增殖有调控作用.我们用自制的BMI1多克隆抗体,通过免疫荧光技术定位该基因在小鼠睾丸组织中的表达,并用FISH做进一步验证,为进一步揭示精原干细胞自增殖的分子机制奠定基础.
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C-Jun 氨基端激酶与胰岛素抵抗
C-Jun 氨基端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK),又称应激活化蛋白激酶(stress-activated protein kinase ,SAPK),是在哺乳动物体内发现的第3类促分裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)的家族成员之一[1].JNK 广泛参与胚胎发育、细胞分化和凋亡、免疫反应以及胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)等多种生理病理过程.JNK 蛋白可由Jnk1 、Jnk2 、Jnk3 等3个基因编码,其中Jnk1 基因和Jnk2 基因在全身各组织中广泛表达,Jnk3 基因则选择性地在脑、心脏、睾丸组织中表达.
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睾丸精母细胞性精原细胞瘤合并癌肉瘤一例
患者男,45岁.因左侧睾丸缓慢增大12年,突然增大4个月入院.患者1991年左侧睾丸无痛性增大,手术取睾丸组织一块,诊断为"精原细胞瘤",并于1992年手术探查左侧睾丸,取活检未发现精原细胞瘤.此后无症状.1995年左侧睾丸缓慢增大,2002年1月左侧睾丸突然疼痛明显,诊为"附睾炎"予抗生素治疗20 d缓解,2002年10月再次出现左侧睾丸增大伴疼痛,抗生素治疗无效,于2003年2月收入院.患者既往除1989年因右侧隐睾行隐睾切除术外无特殊.入院体检:左侧睾丸增大至7 cm×6 cm,质韧,偏硬,有沉重感,表面凹凸不平,压痛不明显.未及浅表肿大淋巴结.
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CD99在卵巢性索-间质肿瘤中的表达
一、材料与方法1.材料:收集我院2000年2月~2001年7月的石蜡组织标本48份(例).临床资料:6例为正常卵巢,患者23~59岁,2例已绝经;1例17岁正常睾丸组织.41例肿瘤中29例为卵巢性索-间质肿瘤,年龄17~73岁,平均49.4岁,14例已绝经;12例为女性生殖道非性索-间质肿瘤,患者年龄13~65岁,平均42.8岁.按WHO 1999年卵巢肿瘤新分类诊断.
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巨细胞病毒感染后雄鼠生殖细胞凋亡与睾丸NF-κBp65的表达
目前,大多学者认为人巨细胞病毒(HCMV)是引起男性不育的病原微生物之一.本文建立睾丸鼠巨细胞病毒(MCMV)感染模型,采用Hoechst 33258染色法对MCMV感染不同时期睾丸组织进行生殖细胞凋亡检测,同时采用免疫组化染色(S-P法)检测MCMV感染不同时期睾丸组织生殖细胞内核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κBp65)的表达情况,探讨MCMV感染对雄鼠生殖细胞凋亡的影响,研究睾丸组织NF-κBp65表达与生殖细胞凋亡的相关性,揭示NF-κBp65对生殖细胞凋亡的调控机制及NF-κBp65在MCMV致病机制及机体抵御MCMV感染中的可能作用.
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巨大睾丸畸胎瘤恶性变彩超表现1例
患者男,41岁.因阴囊逐渐肿大伴阴囊坠胀4月余入院.8年前曾行左侧腹股沟疝修补术及左侧隐睾复位固定术.彩超检查示阴囊内为一大小约14.0cm × 8.0cm × 8.2cm囊实性团块占据,边界欠清,形态欠规则,以实性为主,实性部分内可见动脉及静脉血流(图1),动脉血流峰值流速13.2 cm/s,阻力指数0.79,肿物右后方紧贴一大小约3.0 cm ×1.7cm正常睾丸组织回声,睾丸鞘膜腔内可见不规则液性无回声区.超声提示:阴囊占位性病变(结合临床考虑来自左侧睾丸).
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B超诊断睾丸囊肿1例
患者,男性,72岁.因左侧睾丸增大10年余,加重伴疼痛20余天就诊.查体:左阴囊体积增大,其内可触及5cm×4cm×3cm大小肿物,表面光滑,质软,压痛,左侧睾丸未触及.超声所见:左侧阴囊内未探及正常睾丸回声,为一囊性包块所占据,壁规则、光滑,大小约4.6cm×2.3cm,睾丸组织被挤压到囊性包块周边,厚约2mm.其周围可见液性暗区回声(图1).右侧睾丸未见异常.超声诊断:左侧睾丸囊肿并鞘膜积液.术后病理诊断:睾丸囊肿.
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彩超诊断睾丸恶性畸胎瘤1例
患者,男,39岁.自述三月前无明显诱因,发现左侧阴囊肿大、伴隐痛不适.随时间推移,上述症状逐渐加重、睾丸肿大明显.查体:营养中等,发育正常,左侧阴囊肿大,无红肿,触及睾丸大小约18cm×10cm×9cm,质硬、移动性差.采用HP-M2410A型彩色多普勒超声诊断仪,线阵探头(频率7.5MHz).二维所见:左侧睾丸形态失常,正常睾丸组织消失,呈一巨大的实质性包块,为分叶状,内部回声偏低,分布极不均匀,并可见斑点状强回声(后方伴声影)及网状无回声区(图1).CDFI示:肿块内见较为丰富点状及棒状不规则血流,录得Vmax:4.9cm/s,RI:0.4.超声诊断:左侧睾丸实质性肿块(考虑恶性畸胎瘤可能性大).
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超声诊断睾丸囊肿1例
患者男,74岁.因阴囊肿、痛明显就诊.查体:仅见右侧阴囊肿大压痛.B超所见:右侧睾丸增大,约80 mm×35 mm×42 mm,内见一液性暗区占据大部睾丸,大小70 mm×33 mm×38 mm,壁光整,透声好,睾丸组织受压变薄,厚仅5 mm(图1).CDFI:该液性暗区内未见血流信号,受压睾丸组织周边可见点状血流信号,左侧睾丸大小及内部回声正常.超声诊断:右侧睾丸囊肿.术中所见:右睾丸内部见60 mm×40 mm×40 mm囊肿,囊液澄清.病理诊断:睾丸单纯性囊肿.
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阴囊内巨大毛细血管瘤超声表现1例
患者男,66岁.因左阴囊无痛性肿大5年就诊,入院诊断"左睾丸鞘膜腔积液?".B超见:囊内一巨大囊实性肿块,实性部分呈蜂窝状,囊性部分见多量细点状回声,肿块后方左右侧各探及一等回声结节,大小相当,内部回声均匀,结节周边可见少许液性无回声区(图1).超声提示:1)阴囊内囊实性肿块性质待查;(2)肿块后方等回声结节(考虑正常睾丸组织回声).术中见:侧睾丸鞘膜腔内见约200 ml脓血性液体及菜花样肿物.术后病理:阴囊内毛细血管瘤伴陈旧性血肿.