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IFN-γ增强BALB/C小鼠对结核分支杆菌感染抵抗力
目的:观察、评价IFN-γ对结核分支杆菌感染小鼠细胞因子的影响和疗效.方法:将BALB/c小鼠制成结核分支杆菌感染模型,随机分为4组,分别以IFNY-γ、LVFX、IFN-γ+LVFX及PBS治疗.
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2.65肥大细胞、5-HT及CGRP在感染后肠道功能紊乱发病中的作用
目的探讨肥大细胞及神经递质5-羟色胺(5-HT)、降钙素基因相关肽(CGRP)在感染后肠道功能紊乱发病中的作用.方法1.32只成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机分为对照组和实验组.实验组(n=20)每只大鼠经口灌入1mL含4000条云南大理株旋毛虫幼虫囊胞的生理盐水,制备大鼠肠道一过性感染模型;对照组(n=12)灌入1mL生理盐水.
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人际关系网络类型对个人沉默行为的影响
目的:揭示不同人际关系网络对个人沉默行为的影响。方法采用社会网络分析的方法收集某军校90名学员人际关系数据,运用感染模型、描述性统计及多元线性回归等方法进行分析。结果“一般咨询”和“外向请教”人际关系网络正向影响个人的沉默行为(β=0.35,0.26;P<0.05),而“个人隐私”人际关系网络对个人的沉默行为有着负向的影响(β=﹣0.30, P<0.05)。结论组织成员之间的沉默行为是可以互相影响的,并且不同人际关系网络对个人沉默行为的影响不同;沉默不仅仅是个人问题,同时也是组织层面的问题。
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人隐孢子虫IbA19G2基因亚型蒙古沙鼠感染模型的建立
人隐孢子虫Cryptosporidium hominis是人类的主要感染虫株,目前已获取且传代保存的国内分离株较少,在生物学特性研究也未见报道.在本试验自感染前第10天起至排卵囊结束后14天,采用胃管灌服地塞米松(0.75 mg/(只·2天))抑制蒙古沙鼠免疫力,对国内C.hominis Ib亚型分离株生物学特性进行研究.结果显示,感染后第3天,感染组有卵囊排出,感染后第6天出现高峰期,此后逐渐下降直至感染后第10或11天排卵囊结束.感染前后基于18S rRNA和gp60基因分析,表明遗传学无差异.建立了持续稳定的C.hominis Ib亚型分离株啮齿动物模型,为C.hominis卵囊扩增和进一步研究其生物学特性等提供了重要的参考依据.
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大鼠感染肺孢子菌模型诱导方法的优化
目的 通过对实验条件的优化,建立一种高感染率和低死亡率的肺孢子菌感染模型诱导方法. 方法 以免疫抑制剂诱导大鼠自然感染肺孢子菌为基本方法,对比不同剂量、不同预处理方法、不同季节等因素对诱导大鼠肺孢子菌感染模型的成功率、感染度及动物死亡率等的影响. 结果 每鼠每次腹膜下注射2.5mg地塞米松(每周两次)至第8周,诱导的肺孢子菌感染率为87.50%,死亡率为0,3 mg地塞米松组第7周诱导的肺孢子菌感染率为87.50%,死亡率为37.50%,2.0和3.5 mg组感染率、死亡率分别为12.50%、0和75.00%、75.00%,差异有统计学意义(P<0.05);乙醚麻醉组肺孢子菌感染率为100%,非麻醉组为50.00%,差异有统计学意义(P<0.05);4~6月期间诱导的大鼠肺孢子菌感染率为62.50%,7~9月期间诱导的大鼠肺孢子菌感染率为100%,11月~次年1月组感染率为37.50%,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 地塞米松腹腔内注射诱导大鼠感染肺孢子菌,以每鼠每次2.5~3 mg为佳剂量;辅助乙醚吸入麻醉可提高肺孢子菌感染率;夏秋季节诱导的大鼠肺孢子菌感染率较高.
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钩端螺旋体在豚鼠组织中的动态分布和钩体病的病理改变
我们应用问号钩端螺旋体(简称钩体)赖型赖株建立钩体豚鼠感染模型,观察病理改变,应用免疫组织化学法显示感染后不同时期钩体抗原在肝、肾和肺组织中的分布特点,并应用透射电镜观察钩体病超微结构病变,为研究其发病机制奠定基础[1].
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介绍一种新的肺组织体外固定液
介绍一种新型的软组织固定液:羟已基哌嗪乙磺酸-谷氨酸介导的具有保护作用的有机溶剂(hepes-glutamic acid buffer mediated organic sovent protection effct,HOPE 溶液)[1].我们将该溶液用于肺组织体外感染模型的保存收到了很好的效果.
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套式聚合酶链反应检测豚鼠巨细胞病毒宫内感染
人巨细胞病毒(HCMV)宫内感染是导致出生缺陷的重要因素之一,其致病机制迄今尚未阐明.本研究建立豚鼠巨细胞病毒(GPCMV)宫内感染模型,将灵敏性和特异性均较高的套式聚合酶链反应(N-PCR)用于研究检测,报道如下.
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乙型脑炎病毒持续感染对模型中变异株部分性状及病毒抑制实验
我们利用人肝癌细胞株KN73建立乙型脑炎(乙脑)病毒体外持续性感染模型,并探讨乙脑病毒变异株部分性状变异机理,通过病毒抑制实验和观察,提示该模型体系可为今后抗病毒药物的开发提供帮助.
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抗肺炎链球菌溶血素蛋白单克隆抗体的制备及表征
肺炎是导致全球5岁以下儿童发病或死亡的常见疾病[1]。目前市售疫苗均为多糖或多糖结合组分,难以对90多种肺炎链球菌进行广谱的覆盖,且随着疫苗的广泛应用,血清型替代现象也日趋严重[2]。为解决这些问题,以肺炎链球菌蛋白作为疫苗组分的蛋白疫苗被寄予厚望。肺炎链球菌溶血素蛋白( Ply)在所有肺炎链球菌株中均表达且高度保守,成为广谱肺炎蛋白疫苗的候选组分。前人研究表明,Ply在肺炎链球菌感染模型上,与野生型相比较,Ply的缺失与肺部损伤的降低、细菌菌落数的降低、肺部中性粒细胞的减少及延长生存时间等具有直接关联[3]。天然结构的 Ply (Plywt)溶血活性极强,对细胞毒性很大,无法直接作为免疫原,本实验室制备了Plywt的减毒突变体Plym2。本研究利用Plym2研制了Ply的单克隆抗体,用于建立准确简便的检测Ply的方法。
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腹腔感染时血、粪纳米细菌的检测
近年研究发现,纳米细菌(nanobacteria,NB)广泛存在于人和哺乳动物体内,并具有极强的细胞毒性,已证明与感染性疾病密切相关.本研究试图通过复制SD大鼠腹腔感染模型,对感染前后血液、粪进行NB检测,探讨NB与严重腹腔感染的相关性.
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人乳头状瘤病毒16、45和58型假病毒小鼠感染模型的建立
目的 建立人乳头状瘤病毒(HPV)假病毒小鼠感染模型.方法 将密码子优化的HPV衣壳蛋白基因表达质粒和荧光素酶报告基因表达质粒共转染293FT细胞,48 h后收集裂解细胞,收获假病毒,并对假病毒滴度进行测定.试验小鼠皮下注射甲羟孕酮醋酸酯,4d后阴道灌注壬苯醇醚.9,并在6 h后阴道灌注假病毒,7d后阴道灌注荧光素酶底物,并检测荧光素酶报告基因的表达情况.结果 成功制备了3种型别(HPV16、HPV45和HPV58)的假病毒,其滴度分别为3.7×108TU/ml、1.5×108TU/ml和1.2×108TU/ml.在3种假病毒感染的小鼠体内可见发光区域,其荧光信号强度分别为1.779×106p/s、5.738×105p/s和1.829×106p/s.结论 成功建立了HPV16、45和58型的小鼠感染模型,为HPV感染干预研究、疫苗评价及预防药物的筛选奠定基础.
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巨细胞病毒感染后雄鼠生殖细胞凋亡与睾丸NF-κBp65的表达
目前,大多学者认为人巨细胞病毒(HCMV)是引起男性不育的病原微生物之一.本文建立睾丸鼠巨细胞病毒(MCMV)感染模型,采用Hoechst 33258染色法对MCMV感染不同时期睾丸组织进行生殖细胞凋亡检测,同时采用免疫组化染色(S-P法)检测MCMV感染不同时期睾丸组织生殖细胞内核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κBp65)的表达情况,探讨MCMV感染对雄鼠生殖细胞凋亡的影响,研究睾丸组织NF-κBp65表达与生殖细胞凋亡的相关性,揭示NF-κBp65对生殖细胞凋亡的调控机制及NF-κBp65在MCMV致病机制及机体抵御MCMV感染中的可能作用.
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人乳头瘤病毒(HPV)L2肽免疫小鼠诱导的抗体水平与保护作用的关系研究
目的 检测HPV-58 L2 11~200 AA肽在动物体内对HPV的保护效果,并分析疫苗诱导的抗体滴度或中和抗体滴度与疫苗保护作用之间的对应关系.方法 利用大肠杆菌表达HPV-58L2 11~200 AA肽,纯化目的 蛋白并与铝佐剂吸附后免疫小鼠,利用小鼠HPV-58假病毒感染模型检测不同剂量的免疫原对小鼠的保护作用.通过ELISA和假病毒中和抗体检测方法 检测免疫血清中的总抗体水平和中和抗体水平,分析具有保护作用的抗体或中和抗体滴度.结果 当蛋白免疫剂量为8μg时,能够完全保护小鼠不受HPV假病毒的感染.小鼠免疫血清中的中和抗体水平较低,利用已建立的假病毒中和试验方法 检测不到血清中的中和抗体.而利用ELISA检测血清中的总抗体水平结果 显示,免疫血清中的总抗体水平与疫苗的保护效果之间存在对应关系,当抗体滴度大于等于1:25 000时,小鼠体内检测不到荧光信号,能够保护机体不受假病毒的感染.结论 HPV-58 L2 11~200 AA肽能够保护小鼠不受假病毒的感染,L2 11~200 AA肽具有较好的疫苗发展前景,其引发的总抗体水平可以作为评价保护效果的间接指标.
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原位杂交检测豚鼠巨细胞病毒mRNA方法的建立
人巨细胞病毒(HCMV)宫内感染对子代的影响越来越引起人们的重视[1],但是,HCMV宫内感染机制尚不明确.由于CMV具有严格的种属特异性,其动物模型中,豚鼠巨细胞病毒(guinea pig cytomegalovirus,GPCMV)感染的表现与HCMV感染极为接近,且可经胎盘垂直传播导致宫内感染,有研究者已经建立GPCMV宫内感染动物模型探讨HCMV的宫内感染机制[2,3].本研究采用地高辛标记的三相寡核苷酸探针进行原位杂交,从病毒基因转录水平检测豚鼠亲代和子代标本中GPCMV晚期mRNA,在基因水平上建立一种稳定、快速、敏感、特异、安全且易于操作的分子杂交试验方法,为GPCMV宫内感染模型的全面、深入研究提供有价值的试验手段.
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中药金叶败毒防治巨细胞病毒宫内感染的动物实验初探
人巨细胞病毒(HCMV)宫内感染是导致出生缺陷的重要原因之一[1],但目前缺乏安全有效的治疗药物.本研究应用豚鼠巨细胞病毒(guinea pig cytomegalovirus,GPCMV)宫内感染模型,研究中药金叶败毒防治GPCMV宫内感染的效果.报道如下.1.细胞和病毒:豚鼠胚肺细胞株和GPCMV标准株(ATCC 22122),均经湖北省预防医学科学院病毒研究所培养传代,病毒滴度106~107 TCID50/0.1 ml.
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急性胆道感染对大鼠肝细胞凋亡相关蛋白表达的影响
目的 研究急性胆道感染对大鼠肝细胞凋亡相关蛋白表达的影响.方法 选取实验大鼠35只,适应喂养1周后将其随机分为5组,每组7只.实验组大鼠均于胆总管注入大肠埃希菌0.2 ml,诱导急性胆道感染模型,分别于注入6小时、12小时、24小时和48小时后处死;对照组大鼠胆总管内注入生理盐水,6小时后处死.留取各组大鼠肝组织,采用Tunel染色法统计凋亡肝细胞计数,采用免疫组织化学法计算肝脏Bcl-2与Bax阳性表达率.结果 对照组肝细胞病理无明显改变,凋亡肝细胞少见;各实验组均可见肝细胞坏死、变形,并发生凋亡.对照组凋亡指数显著低于感染6小时、12小时、24小时和48小时组,差异有统计学意义(t值分别为5.921、7.559、8.919、10.520,P均<0.001).对照组和感染6小时组Bcl-2阳性表达率分别为85.71%和71.43%,差异无统计学意义(χ2=0.000,P=1.000);感染6小时和12小时组的Bcl-2阳性表达率显著高于感染12小时和24小时组(P均<0.05).对照组、感染6小时、12小时、24小时和48小时组的Bax阳性表达率分别为14.29%、28.57%、42.86%、100.00%和85.71%,组间差异有统计学意义(F=9.314,P<0.001),Bax阳性表达率随感染时间延长呈升高趋势,于感染48小时有所下降.结论 急性胆道感染短时间即可诱导肝细胞凋亡,并伴有凋亡相关蛋白Bcl-2阳性表达率的下降和Bax阳性表达率的升高.
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不同病理大鼠腹腔感染模型脾切除前后细胞因子的表达
临床上不同病因脾切除术后机体免疫功能改变和感染发生率及严重程度均有不同,细胞因子的异常变化在其中起着重要作用,其失控的级联反应引起多器官功能障碍综合征(MODS)则是导致死亡的主要原因[1].我们通过建立大鼠不同病理模型观察在腹腔感染时脾切除前后细胞因子的变化,探讨病理状态下脾切除后MODS等并发症的机制.
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化脓性颞下颌关节炎的实验研究
本项研究旨在通过模拟人类常见的感染途径--血行传播建立动物颞下颌关节(temporomandibular joint,TMJ)感染模型,探讨其发生途径、转归及对关节组织的影响,为临床化脓性颞下颌关节炎的早期诊断和治疗提供理论依据.
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