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乙型肝炎病毒转基因小鼠研究现状
由于HBV感染具有明显的种属特异性,只感染人及黑猩猩等灵长类动物,使乙型肝炎的研究一直缺乏理想的动物模型.转基因小鼠出生前就能在内源性HBV启动子的控制下,主要在肝脏内持续转基因表达,在肝细胞内没有HBsAg积累,也没有肝细胞病变,HBsAg以亚病毒颗粒的形式以9 000ng/ml的浓度分泌入血[1].这些小鼠对高水平的循环抗原耐受,不产生抗HBs,可被用作HBV慢性携带状态模型.本文对HBV转基因小鼠转基因表达、免疫耐受及打破免疫耐受的机理等作一简要综述.
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健康人群中抗核抗体的表达与分布趋势
抗核抗体(ANA)是泛指一类具有抗各种核成分的抗体,它是一种自身抗体[1].ANA可以与不同来源的细胞核起反应,而无器官和种属特异性,它们除存在血清中,也可以存在其他的体液和滑液、胸腔积液和尿液中,且可通过胎盘.
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干扰素临床前安全性评价中的种属特异性问题
干扰素(interferon,IFN)是人类发现的第1个细胞因子,因其具有较好的生物学活性和良好的市场前景,故近年来我国此类药物的研究和开发发展迅速,但其报审前的临床前安全性评价工作却受制于其严格的种属特异性而成为新药报审的瓶颈问题,我们拟就种属特异性对安全性评价的限制和制约作一评述.
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人巨细胞病毒潜伏感染机制研究新进展
人巨细胞病毒(HCMV)是疱疹病毒科β亚科中基因组大的DNA病毒,所编码的蛋白质超过227种,具有种属特异性[1].
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多聚人血清白蛋白受体检测及其临床意义
多聚人血清白蛋白受体(polymeried human serum albumin receptor简称PHSA-R)具有种属特异性,存在于人类乙型肝炎病毒(HBV)颗粒(又称Dane颗粒)表面,也存在于肝细胞膜上。PHSA-R具有HBV DNA长链上的前-S2基因编码。PHSA-R与多聚人血清白蛋白(PHSA)的结合是通过氢键,疏水相互作用等非特异性结合。在HBV侵入宿主肝细胞,并在肝细胞复制过程中PHSA起着桥梁作用。
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原位杂交检测豚鼠巨细胞病毒mRNA方法的建立
人巨细胞病毒(HCMV)宫内感染对子代的影响越来越引起人们的重视[1],但是,HCMV宫内感染机制尚不明确.由于CMV具有严格的种属特异性,其动物模型中,豚鼠巨细胞病毒(guinea pig cytomegalovirus,GPCMV)感染的表现与HCMV感染极为接近,且可经胎盘垂直传播导致宫内感染,有研究者已经建立GPCMV宫内感染动物模型探讨HCMV的宫内感染机制[2,3].本研究采用地高辛标记的三相寡核苷酸探针进行原位杂交,从病毒基因转录水平检测豚鼠亲代和子代标本中GPCMV晚期mRNA,在基因水平上建立一种稳定、快速、敏感、特异、安全且易于操作的分子杂交试验方法,为GPCMV宫内感染模型的全面、深入研究提供有价值的试验手段.
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人类巨细胞病毒的耐药性研究
巨细胞病毒(Cytomegalovirus CMV),是自然界广泛存在而又具有严格种属特异性的病毒,包括感染人、鼠、马、牛、猪、猫等各种巨细胞病毒.他们有广泛的地区分布,常引起人类和动物的感染.导致人类疾病的是人巨细胞病毒 (HCMV).人类巨细胞病毒感染非常普遍,但多呈亚临床不显性感染和潜伏感染.多数人在儿童或少年期受HCMV感染而获得免疫.在孕妇,原发或新的重复感染均可引起新生儿宫内感染或围产期感染,可导致胎儿畸形,智力低下和发育迟缓等,严重者可引起全身性感染综合征,称为巨细胞包涵体病(CID).成人感染HCMV则多发生于免疫缺陷或免疫抑制状态下,尤其多见于因器官移植而接受免疫抑制治疗及恶性肿瘤患者接受化疗后.
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白细胞介素18与1型糖尿病
白细胞介素18(IL-18),以往也称干扰素γ(IFN-γ)诱导因子(IGIF),是一个新近克隆成功和命名的早期致炎性细胞因子,其分子量为18~19kD[1,2].本文拟对IL-18的分子结构、生物合成、受体特性以及生物学效应等方面进行阐述,并重点讨论IL-18在1型糖尿病发病机理中的作用.一、IL-18的分子结构及其特征小鼠IL-18基因编码了由192个氨基酸组成的无生物活性的单链前体多肽即IL-18原,其中N末端含有35个氨基酸组成的非信号序列.IL-18具有3个半胱氨酸残基[1].人IL-18原由193个氨基酸组成,与小鼠IL-18原具有65%的同源性[2].人和小鼠IL-18之间的生物学效应存在种属特异性[3].通过比较氨基酸序列及其构象,发现IL-18与IL-1具有相似的构象特征,但IL-18在IL-1样构象中有三个关键性氨基酸与IL-1不同[3].二、IL-18的生物合成及其调控IL-18基因位于小鼠第9对染色体[4],由2.6万个以上的碱基对组成,含有7个外显子[5].外显子1和外显子2是5'非编码外显子.启动子1位于外显子1上游,主要控制可诱导性转录,而位于外显子2上游的启动子2可控制基础性(体质性)转录[5].另有研究表明,两个启动子均有脂多糖(LPS)可诱导性活性,只是启动子1略高于启动子2,而两个启动子的基础活性大致相等.提示两者均参与调控体质性和可诱导性的转录过程[6].现已证实,IL-18可以表达在免疫系统的巨噬细胞、树突状细胞和T淋巴细胞[1,5,6]以及非免疫细胞,如皮肤角朊细胞[7]、成骨细胞[8]、关节软骨细胞[9]、大脑星形胶质细胞[10]、垂体和肾上腺皮质细胞[11]、肠上皮细胞[12]、支气管上皮细胞和成纤维细胞[5].本文作者首次发现胰岛β细胞也可表达IL-18[13].这与IL-12仅在有限的细胞中表达[5]有显著的区别,提示IL-18比IL-12具有更广泛的细胞来源和相应的生物学效应.
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分枝杆菌噬菌体应用研究展望
噬菌体是微生物学的一个重要分支,是一种专性感染并寄生于相应活的细菌体内的非细胞原生物,称为细菌病毒.噬菌体基本上包括裂解型和温和(溶原)型两类,与其他病毒有一些共同的生物学特性[1]:个体小,结构简单,有滤过性;没有独立的代谢酶系,只能在活的处于代谢状态的宿主菌体内繁殖;噬菌体感染细菌具有种属特异性,即一种噬菌体只能感染一个细菌种属,甚至于一个种属的几株细菌.噬菌体技术在各种细菌感染性疾病的诊断、治疗与预防方面已成功得到应用.从首次分离分枝杆菌噬菌体至今已有50多年历史,从不同来源分离出噬菌体达250种之多.尽管在分枝杆菌噬菌体的分类、结核病流行病学以及实验治疗、分子遗传学的应用等方面做过一些研究[2],但是在这期间所发表的论文和应用实例并不多.近几年来,由于结核病诊断、治疗与预防领域仍然存在着一些亟待解决的棘手问题,国外研究者又开始探索研究分枝杆菌噬菌体在结核病快速诊断、药敏试验及实验性治疗中的应用,取得了若干进展.
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HBV转基因小鼠在乙型肝炎防治方面的研究
慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染是一个严重的全球性公共卫生问题.HBV的感染具有严格的种属特异性,在自然状态下只感染人和高等灵长类动物,有关的动物实验一直是HBV研究的瓶颈.乙型肝炎病毒(HBV)转基因动物模型已广泛地应用于乙型肝炎的研究.利用HBV转基因鼠在抗乙型肝炎病毒、免疫调节及发病机制等方面进行研究,取得了可喜的成绩.本文就近年来HBV转基因小鼠的研究进展作一综述.
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间接免疫荧光法检验抗ds-DNA抗体方法
ANA泛指抗各种核成分抗体,无器官和种属特异性,血清滴度≥1∶80可作为诊断SLE标准之一.而ANA中的抗ds-DNA抗体具有特征性,是诊断SLE、监测其活动和判断预后的重要指标.本文报告我室的检测方法如下.1 实验材料①0.01mol/L pH 7.2~7.4磷酸盐缓冲液(PBS);②0.1mol/L磷酸盐缓冲甘油;③小白鼠(昆明种KM);④0.1N盐酸;⑤GAH-IgG-FITC应用液用PBS 1∶500稀释;⑥荧光显微镜.
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胸腺肽致局部反应1例报道
胸腺是机体免疫中枢器官,为T淋巴细胞提供生长环境,具有内分泌机能,其分泌的多肽活性物质.没有种属特异性,主要用于T淋巴细胞分泌,发育及成熟的各个阶段,从而调节细胞免疫功能,增加机体防病和抗病能力.
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15个STR基因座的种属特异性研究
目的 研究15个STR基因座对常见9种动物的种属特异性,探讨其在法医学中的应用价值.方法 对9种常见动物肌肉组织的DNA进行PCR扩增,ABI310遗传分析仪进行DNA分型,测定15个STR基因座的种属特异性.结果 用15对STR基因座引物分别对9种常见动物肌肉组织的DNA进行PCR扩增检测CSF1PO,D8S1179,D19S433基因座时,9种动物均有PCR扩增产物;检测D21S11,D7S820,D13S317,D16S539,TPOX,D18S51,D5S818,FGA,D3S1358基因座时,部分动物有PCR扩增产物,其中TPOX,D21S11基因座扩增产物片段长度明显与人的不同.这9种动物在D2S1338、vWA、TH01基因座均没有扩增产物.结论 在15个STR基因座中,3个基因座只对人DNA有扩增产物,有较好的种属特异性;9个基因座对人和部分动物均有扩增产物,但产物的片段大小与人不同,在进行个人识别时,可以用其分析DNA的种属来源;3个基因座对人和动物均有扩增产物,且片段长度相近,在进行个人识别时,应先作DNA种属来源检查.
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端粒酶与肺癌诊断
1 端粒端粒是真核生物染色体末端的一段特殊结构,由DNA序列及相关蛋白质组成,该序列富含鸟嘌呤碱基G,具有种属特异性[1].人的端粒包括重复的5'-TTAGGG-3'序列,在体外形成发夹折叠的二级结构,为染色体末端提供了一个保护性的"帽子",防止染色体的异常重组、端-端融合及保护DNA不被核酸酶及连接酶所破坏等作用[2].通常细胞每分裂1次,端粒丢失约50~200个碱基对,这是由于DNA聚合酶不能完全复制线性DNA末端所致,端粒酶的存在和活化解决了这一末端复制的问题[3].随着染色体端粒的不断丢失,大多数正常体细胞逐渐丧失了分裂能力,当端粒缩短达到某一关键长度时将导致死亡,可见端粒的长度和稳定与细胞生命活动周期密切相关,被称为细胞寿命的"时钟".
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经母婴传播的巨细胞病毒感染
1 人巨细胞病毒基本特性和致病性人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)属疱疹病毒β亚科,为DNA病毒,具有严格种属特异性和潜伏-活化特性.
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结合病毒分离与免疫检测的巨细胞病毒快速分离法
巨细胞病毒(CMV)在自然界中普遍存在,属于疱疹病毒科,分为人类巨细胞病毒(HCMV)和鼠类巨细胞病毒,对宿主的感染有种属特异性.
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先天性HCMV感染免疫状态的研究现状及CpG ODN2395治疗初探
人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)属beta疱疹病毒亚科,是一种广泛传播的病原体,具有高度的种属特异性,仅在人与人之间传播.在健康人群中多数呈无症状或持续性感染,在免疫系统发育不成熟和免疫缺陷的人群中可引起严重疾病.除原发性HCMV感染外,潜伏感染的再发和继发性HCMV的感染亦导致先天性感染,造成出生缺陷的发生.因此,对先天性HCMV感染早期治疗的重要性越来越受到关注.现就先天性HCMV感染的免疫状态及CpG ODN2395的治疗作用及其进展作简要介绍.
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EWI-2wint分子与丙型肝炎病毒感染
丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)的感染具有严格的种属特异性和组织特异性,其建立感染的第1步是病毒颗粒通过宿主细胞表面的分子黏多糖分子(glycosaminoglycans,GAG)及低密度脂蛋白受体(low-density lipoprotein receptor,LDLr)等黏附在细胞表面,然后依次与细胞表面的B类Ⅰ型清道夫受体(scavenger receptor B type Ⅰ,SR-B Ⅰ)、CD81、紧密连接蛋白Claudin-1等受体分子结合,再经网格蛋白、脂筏等介导的细胞内吞、融合,完成病毒的细胞入侵过程.
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巨细胞病毒先天性和获得性感染
巨细胞病毒(CMV)属疱疹病毒科、CMV对宿主或感染细胞有严格的种属特异性,如人巨细胞病毒(HCMV)只感染人,只能在人胚纤维母细胞中复制.据国内、外文献报道[1.2],60~90%的成人均有CMV抗体.Schofex报道,在非洲的成人0MV感染将近100%.在一定情况下,病毒可侵袭抗体多器官,产生严重病变,大约10%发展为巨细胞包涵体病(CID).HOMV是先天性病毒感染的重要病原,也是智力障碍及先天畸形的重要原因,目前已引起广泛重视,GCMV感染所致病症,可分先天性感染和后天获得性感染.
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乙型肝炎病毒小鼠动物模型建立的研究进展
乙型肝炎病毒(HBV)是一种种属特异性和组织特异性极强的DNA病毒,受病毒感染宿主的范围所限,到目前为止还没有成熟的小鼠模型能够完整地模拟人类感染HBV的过程.随着病毒学、分子生物学及免疫学等相关学科的发展,采用不同方法建立的HBV小鼠动物模型已相继建立.现对小鼠模型在乙型肝炎研究中的进展简要综述.