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乙型肝炎的预防与治疗体会
乙型肝炎病毒(HBV)于1970年发现,是一种DNA病毒,包括3种抗原,即HBsAg、HBeAg、HBcAg,其感染人体可引起急性或慢性肝炎.乙肝的潜伏期为60～160天.乙肝患者的血液、唾液、胃液、汗液、尿液、精液、阴道分泌物、月经、羊水中均检出HBsAg.含HBV的微量血液(0.4μl)仍可引起传染,即当健康人皮肤黏膜造成损伤时,若接触到HBV,便可引起感染.因此乙肝具有传染性强、传播途径复杂、流行面广、发病率高、危害性大、治疗难度大等特点.乙肝在世界各地多呈散发状态或呈地方流行,无明显季节性.据统计,我国HBsAg阳性者占全国人口的10%,每年1500万孕妇中,有150万HBsAg携带者,75万新生儿受感染.由于乙肝还可发展为肝硬化、肝癌,直接威胁着人们的生命安全.因此,抓紧对乙肝的预防与治疗,迫在眉睫,势在必行.
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中药兰草合剂联合神经阻滞治疗带状疱疹神经痛的临床研究
带状疱疹是由属于DNA病毒组的水痘-带状疱疹病毒在婴幼儿期初次侵犯宿主,潜伏于脊神经后根或脑神经元,遇机体免疫力下降而导致的,以受累神经分布区疼痛剧烈及相应皮肤区疱疹为特征的病毒感染性疾病.其带状疱疹痛与后遗神经痛是一种非常顽固的痛症,严重影响患者的生活、睡眠等.本研究采用中药与抗病毒、神经阻滞联合治疗带状疱疹神经痛取得了较好的效果,现报告如下.
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凋亡素选择性抗肿瘤的分子机制
凋亡素(apoptin)是一种来源于鸡贫血病毒(chicken anemia virus,CAV)的小分子量蛋白.CAV是一种无囊膜的DNA病毒,其基因组为2300 bp的单链环状DNA分子,含有3个完全或部分重叠的开放读码框,分别编码3个蛋白质:VP1、VP2和VP3[1].VP1为主要的衣壳蛋白,相对分子质量51 600.VP2为非结构蛋白,相对分子质量24 000,其具有双重性质的磷酸酶活性并且主要与VP1相互作用.VP1与VP2为CAV复制所必需[2].VP3亦称为凋亡素,相对分子质量13 600,能选择性诱导多种肿瘤细胞凋亡,如骨肉瘤、肝癌、黑色素瘤、肺癌、前列腺癌等,而不杀伤正常细胞[1,3-5].
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慢性乙肝患者血清趋化因子RANTES水平与肝功能生化指标等的相关性研究
目的 了解慢性乙型肝炎(慢性乙肝)患者血清趋化因子RANTES水平,探讨血清RANTES水平与丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBil)、凝血酶原活动度(PTA)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)及乙型肝炎病毒(HBV DNA)载量的相关性.方法 选择144例慢性乙肝患者(观察组)和18名健康人(对照组),采取静脉血并应用ABC-ELISA方法 检测其血清中趋化因子RANTES浓度,并与两组的肝功能检测生化指标、HBeAg和HBV DNA载量进行相关性分析,利用SPSS13.0软件进行统计分析.结果 慢性乙肝患者血清RANTES的浓度比正常对照组升高,血清RANTES浓度分别为(3930.12±2856.96)ng/ml和(329.46±152.23)ng/ml,两组之间差异比较均有统计学意义(P<0.05);RANTES水平与ALT(r=0.197,P:0.018)、AST(r=0.239,P=0.004)和Tnil(r=0.316,P=0.001)呈显著正相关;RANTES水平与PTA(r=-0.078,P=0.357)无显著相关;HBeAg阴性组与HBeAg阳性RANTES水平比较无统计学意义(P=0.407);HBV DNA低载量组(<105拷贝/ml)和HBVDNA高载量组(≥105拷贝/ml)RANTES水平比较无统计学意义(P=0.185).结论 慢性乙肝患者血清中RANTES表达水平增高,血清RANTES水平与ALT、AST和TBIL呈正相关,与PTA无相关性.RANTES水平可反映肝脏炎症活动及损害情况,不受HBeAg、HBV DNA载量影响,可能参与慢性乙肝发病.
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慢性乙型肝炎患者肝脏病理特点与血清HBeAg和HBV DNA的关系
目的 了解慢性乙型肝炎患者病理特点与血清HBeAg和HBVDNA的关系.方法对1057例慢性乙型肝炎患者进行肝脏病理检查,采用荧光定量PCR法检测血清HBV DNA,用化学发光法检测血清HBeAg.结果 HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者的炎症及纤维化程度(G4和S4分别为7.83%和12.17%)较HBeAg阳性的慢性乙型肝炎患者高(G4和S4分别为3.39%和5.44%);HBeAg阳性的患者中HBV DNA滴度低的患者炎症及纤维化程度较高(HBV DNA 104～105 G3G4和S3S4分别为45.64%和30.20%),而HBeAg阴性的患者则是HBV DNA滴度高的炎症及纤维化程度较高(HBV DNA106～107 G3G4为54.55%和HBV DNA 108～109S3S4为42.85%).结论慢性乙型肝炎患者的肝脏病理与血清HBeAg及HBV DNA水平有不同相关性,对HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者要及早进行肝脏病理检查和抗病毒治疗.
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新近发现的细小病毒与多瘤病毒感染
2005年以来,研究人员又相继发现了新的与人类疾病相关的DNA病毒,包括属于细小病毒科的人博卡病毒(human bocavirus,HBoV,2005年[1])、人细小病毒4(human parvovirus 4,PARV4,2005年[2])与人细小病毒5(human parvovirus 5,PARV5,2006年[3]);属于多瘤病毒科的KI多瘤病毒(KI polyomavirus,KIPyV,2007年[4])、WU多瘤病毒(WU polyomavirus,WUPyV,2007年[5 ])及MC多瘤病毒(MCPolyomavirus,MCPyV,2008年[6])等.目前对于新近发现的这些DNA病毒的研究包括基因结构特征、流行病学、感染后临床特征、检测方法等各个方面.尽管分子生物学技术方法的发展与应用,实现了对病毒更敏感、特异、快速与深入的研究,但大部分新近发现的病毒与人类疾病的相关性仍不十分清楚[7].本综述就新近发现的DNA病毒:人博卡病毒、人细小病毒4、人细小病毒5、KI多瘤病毒、WU多瘤病毒、及MC多瘤病毒的发现、分子检测方法及其各自的病原学意义作一简要综述.
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人类乳头状瘤病毒感染与头颈部肿瘤的相关性及研究进展
人类乳头状瘤病毒(Human papilomavirus,HPV)是一种致瘤性DNA病毒,具有显著的嗜上皮细胞特性,主要存在于会阴部、尿道、皮肤、喉部、气管及支气管和口腔黏膜.目前已知的HPV型别有100多种,研究发现大约有25型HPV与头颈部肿瘤有关.HPV被公认为一种肿瘤相关病毒,但过往的研究重点放在了HPV与宫颈癌的关系上.近年来,HPV感染与头颈部肿瘤的相关性引起了各国研究者的关注,尤其是与头颈部恶性肿瘤的相关性,但两者相关程度尚未确定.
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二代人乳头瘤病毒预防性疫苗的研究进展
人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)是一种嗜黏膜和皮肤上皮的双链DNA病毒,与多种疾病的发生相关.根据致病性将其分为高危型和低危型2种,高危型感染与宫颈癌及癌前病变的发生密切相关,有:HPV-16、-18、-45、-31、-33、-52、-58等;其中70%的宫颈癌与HPV-16/18型有关.低危型感染与生殖器疣和宫颈低级鳞状上皮增生病变的发生密切相关,有:HPV-6、-11、-40、-42等,其中6和11型的感染与90%以上的生殖器疣和宫颈低级鳞状上皮增生病变的发生密切相关.
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人乳头状瘤病毒基因分型在宫颈组织病变筛查中的应用
宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤,近年来国内外的研究进一步提示人乳头状瘤病毒(HPV)不同亚型对宫颈上皮细胞的致病力不同,而且存在较大差异.HPV是一种小的双链DNA病毒,可以特异性地感染人皮肤黏膜的鳞状上皮细胞,引起多种良、恶性病变.研究发现99%以上的宫颈癌有HPV感染,HPV是宫颈癌的主要致病因子[1].世界上发现的.HPV已有110余种亚型,其中20余种与宫颈癌密切相关,根据其致癌性分为高危型和低危型两大类.我们研究HPV亚型与宫颈组织病变的相关性,为宫颈癌的筛查防治提供可靠的理论依据.
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双色荧光定量PCR快速分型、定量高危型人乳头状瘤病毒
目的 针对高危型人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)亚型的多样性以及感染病毒载量的高低,旨在建立高危型HPV的定量与分型的快速检测方法,为HPV筛查与治疗提供依据.方法 利用2种荧光染料分别标记HPV-16、HPV-33/52/58/67和HPV-18/45、HPV-31探针,同时以β球蛋白基因作为内对照,对120份疑为HPV感染的宫颈脱落细胞样本进行HPV分型与定量,定量范围为5×101～5×107 拷贝/ml,以HC-2杂交捕获法作为"金标准",评价该方法的特异性与灵敏度.结果 荧光定量PCR阳性检出率为52.5%(63/120),其中HPV-16、HPV-18/45、HPV-31和HPV-33/52/58/67阳性率分别为36.51%(23/63)、11.11%(7/63)、12.70%(8/63)、58.73%(37/63);HPV感染的平均病毒载量为1.08×107 拷贝/ml.荧光定量PCR的特异性为100%,灵敏度为81.82%.结论 双色荧光定量PCR能快速分型、定量高危型HPV,可用于HPV感染的筛查与宫颈病变程度预测以及疗效观察.
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探讨两种方法联检对巨细胞病毒感染的临床诊断价值
巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)是一种β属疱疹病毒组DNA病毒,由于感染的细胞肿大,并具有巨大的核内包涵体,亦称细胞包涵体病毒.CMV可侵犯全身各器官,导致各种临床症状及体征,如肝脏损害、呼吸系统损害、血液系统改变等.
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HBV感染者血清中HBV-DNA与HBeAg的相关性
目的:研究用PCR法检测HBV患者血清病毒数量(HBV-DNA)与用ELISA法检测HBeAg的相应关系.方法:对263份标本分别进行PCR-HBV-DNA和ELISA法测定,按照HBeAg分为两类模式:HBeAg(+)和HBeAg(-),同步作PCR-DNA对照分析,并对9例HBV急性感染患者作治疗后随访测定.结果:在HBeAg(+)和HBeAg(-),8.9%(11/124)和89.2%(124/139)的HBV-DNA<104 copies/ml(P<0.005),差异有显著性,在对9例急性HBV感染患者药物治疗后作继续随访HBV-DNA测定,其数量呈下降,而对11例HBeAg(+)而HBV-DNA<104 copies/ml患者的临床调查发现与其治疗和身体状况有关.结论:HBeAg与HBV-DNA病毒数量密切相关,尤其在急性感染期,而机体免疫力与治疗能抑制HBV病毒的复制.
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SEN病毒研究进展
SENV是新近发现的一种病毒[1],先是从一位吸毒患者的血清中分离,并以该患者姓名的第一个字母命名为SEN病毒(SENV),以后在肝炎、HIV、血液透析患者、甚至于正常人群中都发现了它的流行,但目前其致病与否尚无定论,现综述如下.
关键词： DNA病毒 -
细胞因子基因多态性与EB病毒相关疾病关系的研究进展
Epstein-Barr病毒(Epstein-Barr vires,EBV)是1964年 Ep-stein、Achong、Barr在研究非洲儿童恶性淋巴瘤时发现的一种亲人类B淋巴细胞的病毒.EBV属疱疹病毒科,双链DNA病毒,基因组长约184 kb.EBV主要通过唾液、飞沫传播,也可经输血传染.
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HPV38E6/E7对HaCaT细胞增殖和凋亡的影响
目的：明确 HPV38E6/E7感染对 HaCaT 细胞增殖和凋亡的影响。方法通过构建 pGCMV和pGCMV-HPV38E6/E7质粒，建立HaCaT稳定转染细胞系并进行鉴定；CCK-8检测细胞增殖；流式细胞仪检测细胞周期及凋亡。结果与对照组相比，转染HPV38E6/E7的HaCaT细胞增殖明显增加，S期细胞增多，凋亡减少，以上差异均具有统计学意义（P＜0.05）。结论 HPV38E6/E7对角质形成细胞增殖及凋亡的影响，可能是β-HPV引起非黑素瘤性皮肤癌发生的重要病理生理学基础。
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环媒恒温扩增技术在病毒感染检测中的应用
环媒恒温扩增法(loop mediated isothermal amplification,LAMP)是一种新型的恒温核酸扩增技术,它利用了2对特异引物和一种有链取代活性的DNA聚合酶,通过使扩增产物形成单链环结构实现核酸的恒温扩增.LAMP自身的一系列特性使其可以达到对特定核酸片段高效、特异的扩增.由于反应结果可以通过测定反应副产物--焦磷酸镁沉淀引起的浊度来判断,因此使其成为一种十分有效的分子检测手段.
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基于 Pre－NAT 全自动核酸提取平台的高敏 HBV DNA 检测性能评价
目的：评价基于Pre－NAT全自动核酸提取系统的高敏HBV核酸定量试剂的检测性能。方法方法学性能验证。于2014年5月和7至9月分别在北京大学医学部病原生物学系实验室和上海交通大学医学院附属仁济医院检验科进行实验，采用HBV WHO标准品验证正确度与检测下限，A、B、C、D型标准血浆（6个浓度）重复检测验证精密度，高浓度HBV假病毒颗粒梯度稀释验证线性范围，以及144份临床血清评价与罗氏系统的相关性。结果正确度方面，该试剂在5个浓度水平的实测值与标准品理论值偏差均小于±0．35 lg IU／ml（－0．17～0．32 lg IU／ml）。精密度方面，A、B、C、D型标准血浆的检测重复性（ CV）分别为：3．87％～6．32％、0．45％～14．68％、0．16％～8．36％、0．64％～13．01％；中间精密度（ CV）分别为：5．67％～9．69％、1．28％～15．68％、0．36％～9．05％、1．69％～13．65％。线性范围评价显示在20～1×1010 IU／ml范围内呈良好的线性关系（ r＝0．998，P＜0．001）。检测下限验证结果，20 IU／ml浓度水平检出率5／5。临床标本检测中，与国际通用Roche试剂符合率为100％（144／144）；104份阳性标本两者数据显著相关（ r＝0．984，P＜0．0001）。结论该高敏HBV DNA检测的正确度、精密度、检测下限和线性范围均表现良好，并与Roche试剂有良好相关性，有一定临床应用价值。（中华检验医学杂志，2015，38：696－700）
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新型国产乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂的质量评价
目的 评价新型国产乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂(以下简称“新型定量试剂”)的质量.方法 首先用基于磁珠法自动化核酸提取平台的新型定量试剂和Roche定量试剂对WHO的HBV DNA系列稀释标准品(50、200、2000、20 000 IU/ml)进行溯源性分析,确定定量试剂检测的可靠性.然后,用2种定量试剂对HBV B和C基因型标准血浆(分别稀释为25、50、200、2000、20 000、200 000 IU/ml)分别在3个不同检测中心共进行216次平行检测,比较其准确度和精密度.后,用2种定量试剂平行检测5份HBV DNA阴性血浆样本和37份不同病毒载量的HBV DNA阳性临床血浆标本,并评价其相关性和符合率.结果 经溯源性分析,2种定量试剂在上述4个检测节点的实测对数值与理论对数值的差值偏差均在可接受范围之内(0.005 ～0.280 lg IU/ml).2种定量试剂测定各检测节点变异系数的结果经配对比较,HBV的B、C基因型血浆检测的精密度差异均无统计学意义(B基因型:t=1.226,P=0.275;C基因型,t=2.319,P=0.07).2种定量试剂检测42份临床血浆标本的总符合率达97.62％ (41/42),且检测37份HBV DNA阳性血浆标本结果显著相关(R2=0.934,P＜0.0001).结论 新型定量试剂与Roche定量试剂在溯源性、符合率、精密度和血清盘评价中的差异无显著性,该定量试剂有良好的检测质量,可用于临床HBV DNA检测.
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乙型肝炎病毒血清学标志物与DNA检测结果的对比分析
我国为乙型肝炎病毒(HBV)感染高发区.约有1亿人为乙肝表面抗原携带者.HBV感染后血清学检测组合的标志模式多且复杂.由于PCR方法的引入,可以直接检测病毒核酸(DNA)[1,所以对患者体内HBV复制及传染性有了更深刻地认识.然而,由于基层单位开展PCR检测受到条件限制,仅以血清学检测结果作为实验诊断依据,可能会出现漏检.因此,将HBV-DNA与血清学标志物(HBV-M)进行对比分析,对临床诊断HBV感染及治疗效果的判断具有重要作用.我们采用聚合酶链反应(PCR)及酶联免疫吸附试验(ELISA)两种方法,同时检测了356份血清,现将结果报告如下.
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长春地区TTV感染与其他病毒性肝病关系的流行病学调查
目的了解长春地区TTV的感染状况.方法采用酶联免疫吸附实验,对前来白求恩医科大学第三临床学院消化内科就诊或住院的213例长春地区患者进行抗-TTVIgG的检测,并进一步分析TTV感染情况与性别、年龄、传播途径的关系,探讨TTV的致病性以及TTV感染与其他病毒性肝病的关系.结果长春地区存在TTV感染者,感染率为7.98%;感染与性别、年龄无关;TTV可经胃肠道和胃肠道外两种途径而传播;TTV感染可见于急性肝炎、慢性肝炎、肝硬变和肝癌患者,但也可表现为单纯携带;TTV可与乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)合并存在,但合并HCV感染的概率要明显高于合并HBV感染的概率.不过,TTV感染并不加重HBV,HCV对肝脏的损害,与HBV,HCV也无协同致病作用.结论长春地区存在TTV感染者,TTV感染可能与丙型肝炎病毒感染有一定联系.赵岩,王江滨长春地区TTV感染与其他病毒性肝病关系的流行病学调查.世界华人消化杂志.2001:9(7)747-750
