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细胞角蛋白单克隆抗体检测大肠癌淋巴结微转移的研究
为了研究角蛋白单克隆抗体在检测大肠癌淋巴结微转移灶上的意义,我们分别采用不同相对分子质量的3种角蛋白抗体,利用免疫组织化学法对47例大肠癌患者术后的淋巴结进行了检测,现将结果报告如下.
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流动相对灰树花多糖分子量测定影响的研究
目的:考察流动相对高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)测定灰树花多糖(GFP)相对分子质量(Mr)的影响因素.方法:采用HPGPC法分别以不同的流动相、盐浓度、pH值测定GFP的Mr,并对测定结果进行分析.结果:分别以纯水、0.02% NaN3、0.1mol·L-1 NaNO3和0.1mol·L-1 Na2SO4溶液为流动相进行测定,GFP的Mr依次为822410、177520、29112和25066道尔顿;在0-0.025mol/L氯化钠溶液中Mr先急剧降低,然后随着盐浓度的增加,在0.1 -0.2mol/L氯化钠溶液中趋于平稳;在pH 3 -6时,Mr随pH增加而急剧增加,在pH 6 -9范围内变化较小,当pH为10时又稍微增加.结论:不同流动相、盐浓度、pH值对GFP的Mr测定结果有明显影响.
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噪声作业工人血浆热休克蛋白70抗体水平与听力损伤关系的研究
生物体在接触到高温、毒物、及其他应激因素后,将迅速启动高程序化的热休克反应,其主要的一个特征就是热休克蛋白(HSPs)诱导合成或合成增加.其中相对分子质量在70×103的热休克蛋白在正常细胞中水平较低,而在应激状态下可显著升高,因而HSP 70成为受关注的一种热休克蛋白[1-3].
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食品中丙烯酰胺污染的研究进展
丙烯酰胺(acrylamide),分子式CH2CHCONH2,为白色透明片状晶体,相对分子质量71.08,比重1.122,熔点84~85℃,沸点125℃,可溶于水、乙醇等,遇热稳定,室温下可升华,易聚合和共聚.其聚合物聚丙烯酰胺广泛用于纺织、化工、冶金等行业,也可用于水处理中的絮凝剂.过去研究较多的是丙烯酰胺对职业性暴露人群的危害,且通常以神经系统损伤为主,其入侵途径主要通过皮肤进入人体.2002年4月瑞典国家食品局和斯德哥尔摩大学科学家公布的研究结果引起了全球的极大关注,他们发现在炸薯条、面包等经高温处理的食品中广泛存在较高水平的丙烯酰胺.如果该研究结果得到确认,即意味着丙烯酰胺可通过消化道进入人体,对非职业性暴露人群有潜在性危害.随后,世界各国的科学家对食品中丙烯酰胺的形成机制、不良反应、检测方法以及人群暴露水平等各个方面进行了深入研究,取得了重大突破.
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白茅根多糖IC1的分离及其相对分子质量和单糖组成的测定
目的:分离纯化白茅根多糖,建立白茅根多糖相对分子质量的测定方法,并通过高效液相色谱法测定其单糖组成和摩尔比.方法:通过多次醇沉的方法对白茅根多糖进行分离纯化,得到白茅根多糖IC1;采用高效液相色谱法,以右旋糖酐为标样,绘制多糖分子量的标准曲线,测定白茅根多糖IC1的相对分子质量;通过酸水解,使IC1水解成单糖,分析这些单糖的组成及其摩尔比.结果:经测定,白茅根多糖IC1的相对分子质量为8 292.2;白茅根多糖IC1由鼠李糖,木糖,果糖,甘露糖,葡萄糖5种单糖组成,其摩尔比为1∶11.45∶1.26∶1.02∶59.23.结论:多次醇沉的方法对白茅根多糖进行分离,效果良好,操作简便.高效液相法测定白茅根多糖分子质量及单糖组成灵敏度高,重复性好.
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五倍子多糖相对分子质量和单糖组成的测定
目的:研究五倍子多糖精细组分的相对分子质量、单糖组成.方法:五倍子多糖经提取纯化后得到GCP-1,GCP-2和GCP-3 3种精细组分.用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)分析其相对分子质量;采用三氟乙酸(TFA)水解和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化的高效液相色谱(HPLC)分析其单糖组成.结果:HPGPC试验结果显示,GCP-1,GCP-2,GCP-3的相对分子质量分别为182,2.1×104,6×104;单糖组成试验表明,GCP-2和GCP-3的单糖组成类型基本一致,主要为半乳糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸等.结论:用HPGPC和PMP柱前衍生法测得五倍子多糖精细组分的相对分子质量和单糖组成,方法简便可行,可用于五倍子多糖的研究.
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阿胶酶解液相对分子质量分布及其补血升白作用
目的:研究阿胶酶解液的相对分子质量分布及其补血、升白的作用.方法:采用TSK-GEL G2000SWXL色谱柱(7.8 mm ×300 mm,5μm),流动相0.1 mol·L-1 NaCl +0.05% NaN3 +0.1 mol·L-1磷酸盐缓冲液(pH 6.7),流速0.5 mL·min-1,检测波长280 nm,对阿胶原液、阿胶仿生酶解液、阿胶胰蛋白酶酶解液进行相对分子质量分布的测定;采用放血法致小鼠血虚模型及环磷酰胺致小鼠白细胞减少模型,观察阿胶酶解液的补血升白作用.结果:阿胶所含蛋白及多肽的相对分子质量>6.64×104 Da,胰蛋白酶酶解液及仿生酶解液的相对分子质量主要集中在3.7×103 Da左右;阿胶仿生酶解液及胰蛋白酶酶解液可使血虚模型小鼠血红蛋白(Hb),红细胞计数(RBC)水平显著提高,使白细胞减少模型小鼠的白细胞计数(WBC),RBC和Hb水平显著提高.结论:阿胶经酶解后相对分子质量减小且具有显著的补血升白作用,胰蛋白酶酶解与仿生酶解效力大致相当.
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市售不同厂家人参多糖注射液的质量评价
目的:评价目前市面上4个厂家5批次人参多糖注射液的质量.方法:从药物分析的角度,对人参多糖注射液进行常规检查,并测定其相对分子质量和单糖组成.结果:4个厂家的产品均符合相关质量标准和2010年版《中国药典》中的相关规定,但是相对分子质量分布和单糖组成差异很大.结论:建议提高人参多糖注射液的质量标准,保障安全用药.
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丹参中酚酸类成分相对分子质量大小与纳滤传质系数的相关性
该文基于纳滤分离中的孔径筛分和溶解-扩散效应,针对丹参中3种典型酚酸类成分,拟合传质系数与初始浓度的相关性,并构建数学模型,分析传质系数与相对分子质量大小、溶质浓度的关系.实验结果表明,操作压力与膜通量存在线性关系,随着溶质浓度升高膜通量出现衰减.在孔径筛分和溶解-扩散效应协同作用下,丹参酚酸类成分的传质系数与初始浓度呈现幂函数相关,回归系数均大于0.9,其中传质系数与酚酸类相对分子质量大小关系为:原儿茶醛>迷迭香酸>丹酚酸B,呈现出负相关,而传质系数与溶质浓度呈现正相关.以丹参酚酸为例分析纳滤传质过程与相对分子质量大小的相关性,为中药酚酸类成分的常温化精制分离提供理论基础.
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生物活性多肽结构和功能的多样性
活性多肽是一组氨基酸以肽链连接而形成的具有生物学效应的化合物,具有分子量小(相对分子质量一般小于10000)、结构简单、组织分布广泛、生物效应多样、合成与代谢迅速和免疫原性低等特点,是心血管自稳态调节的重要成分,其功能紊乱具有重要的发病学意义.以这些活性分子为靶点的治疗,如Ca2通道阻滞剂、β受体拮抗剂、血管紧张素转换酶抑制剂、血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂等在临床应用取得了较好的效果[1].近年发现活性多肽前体在机体内可产生多种生物学效应相同或不同的小分子片段,同一分子作用于不同类型受体之间所产生不同生物学效应,是具有多种生物学效应的调节肽.
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凋亡素选择性抗肿瘤的分子机制
凋亡素(apoptin)是一种来源于鸡贫血病毒(chicken anemia virus,CAV)的小分子量蛋白.CAV是一种无囊膜的DNA病毒,其基因组为2300 bp的单链环状DNA分子,含有3个完全或部分重叠的开放读码框,分别编码3个蛋白质:VP1、VP2和VP3[1].VP1为主要的衣壳蛋白,相对分子质量51 600.VP2为非结构蛋白,相对分子质量24 000,其具有双重性质的磷酸酶活性并且主要与VP1相互作用.VP1与VP2为CAV复制所必需[2].VP3亦称为凋亡素,相对分子质量13 600,能选择性诱导多种肿瘤细胞凋亡,如骨肉瘤、肝癌、黑色素瘤、肺癌、前列腺癌等,而不杀伤正常细胞[1,3-5].
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昆虫抗菌肽的研究和应用
昆虫抗菌肽是昆虫血淋巴中产生的一类小分子肽,它具有相对分子质量小、热稳定、水溶性好、强碱性、抗菌谱广的特点,被认为是从细菌到高等哺乳动物普遍存在的一类防御性多肽,称之为"第二防御体系".抗菌肽不仅抗菌谱广,而且可以抑杀某些真菌、病毒及原虫,并对多种癌细胞及动物实体瘤有明显的杀伤作用,而不破坏正常细胞.
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MDA-7/IL-24蛋白的功能研究进展
mda-7/IL-24基因初被命名为黑色素瘤分化相关基因-7(melanoma differentiation associated gene-7),是1995年Jiang等[1]利用减数杂交技术从β干扰素和蛋白激酶C活化剂mezerin诱导的人黑色素瘤细胞HO-1中鉴定并克隆出来的.基于结构、序列同源性、基因定位等方面的考虑,MDA-7蛋白被归为IL-10家族,并被命名为MDA-7/IL-24蛋白.mda-7/IL-24基因在进化过程中比较保守,在酵母、猴子、牛、狗和猫的基因组DNA中都发现了mda-7/IL-24基因的同源基因[2].人mda-7/IL-24基因是单拷贝基因,定位于1号染色体(1q32.2-q41),由7个外显子和6个内含子组成,其mRNA长约2 kb,编码由206个氨基酸组成、相对分子质量约为23 800的蛋白质.
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FHIT基因研究进展
早在1979年,Cohen等就发现一家族性早发、双侧、多灶的肾透明细胞癌与t(3:8)染色体易位有关.此后,人们在肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌等多种肿瘤组织中观察到3号染色体短臂的高频率缺失,提示在3p上可能存在抑癌基因.1996年,Ohta等[1]用差异显示分析探针和外显子捕获法在3p14.2上确定了一个新的基因,由该基因cDNA推算的蛋白质与具有3价组氨酸结构域的HIT蛋白质家族高度同源,又因为此基因跨越脆性位点(fragile site),故将之命名为FHIT(fragile histidine triad)基因.FHIT基因全长超过1 Mb,为一高度保守的基因序列,其mRNA全长约1.1 kb,包含10个外显子,由第5~9外显子编码一个相对分子质量约为16 800的蛋白.Barnes等[2]通过蛋白质活性分析证实,人类FHIT蛋白是一典型的二腺苷酸三磷酸水解酶(Ap3A),催化Ap3A水解为ADP和AMP,FHIT蛋白质水解酶活性丧失将导致Ap3A水平升高.
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胃癌中Her-2/neu过表达与基因扩增及其意义
Her-2/neu基因编码的相对分子质量185 000的蛋白质(P185)能加速细胞运动,促进癌细胞转移.已证实有Her-2/neu基因扩增的乳腺癌患者(约占乳腺癌患者25%)手术后易复发,生存期短并对常用的化疗药物如环磷酰胺、5-氟尿嘧啶等不敏感[1,2].本项研究的目的是通过双色荧光原位杂交(dual color fluorescence in situ hybridization,FISH)技术和免疫组织化学技术检测各类型胃癌细胞中Her-2/neu基因数量及蛋白表达并探讨其临床意义.
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磷酸化的β-catenin在非小细胞肺癌中的表达及意义
β-catenin是一种相对分子质量约92 000的可溶性蛋白,它作为上皮钙黏素-链接素系统(E-cad/Cat)和Wnt信号传导通路中的关键分子,具有双重功能[1,2] .结合型的β-catenin与E-cad的胞质区结合,介导同型细胞间的黏附;游离型的β-catenin与Wnt蛋白,GSK-3β,APC,Axin等共同构成Wnt信号传导通路调节细胞的增殖.我们应用抗phospho-β-catenin抗体检测非小细胞肺癌中的phospho-β-catenin表达情况,并初步探讨其在非小细胞肺癌中表达的意义.
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细胞角蛋白染色在肿瘤诊断中的应用
所有哺乳类动物细胞质都含有复杂的细胞骨架蛋白包括Ⅰ微丝、微管以及中间丝,中间微丝有6种类型:细胞角蛋白Ⅰ及Ⅱ型、结蛋白、波形蛋白、胶质纤维酸性蛋白(GFAP),及神经纤维组成,细胞角蛋白是为复杂的中间丝,Moll等将细胞角蛋白分成20种.细胞角蛋白又可根据等电点的不同分为酸性及碱性,一般而言,相对分子质量小的细胞角蛋白总是与大的细胞角蛋白配对;而酸性细胞角蛋白总是与碱性细胞角蛋白配对,细胞分化的不同阶段及不同类型上皮细胞表达不同的细胞角蛋白.上皮组织恶变后,其表达的细胞角蛋白与正常组织基本相同,因此,细胞角蛋白的表达被广泛应用于肿瘤的诊断,本文将主要探讨不同肿瘤的角蛋白的表达[1].
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CDX-2--肠源性腺癌的新标记
CDX2是一个新发现的特异性核转录因子,对正常和肿瘤性的肠上皮均有相对特异性和敏感性,免疫组织化学染色可以用来辅助明确转移性肿瘤的来源[1].CDX2-88(Ab No.392M)是核蛋白相对分子质量40 000 CDX2的单克隆抗体(小鼠IgG1、κ抗体),由Biogenex和Dana-Farber癌症研究所协作生产,可用于甲醛固定,石蜡包埋组织,以细胞核内出现棕黄色颗粒为阳性反应[1].
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幽门螺杆菌VacA毒素的初步纯化
早期发现幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)液体培养上清中含有导致哺乳动物上皮细胞产生空泡的物质,后来证实是由一种相对分子质量(Mr)约为87000或95000的Hp分泌蛋白引起,因而命名为致空泡变性细胞毒素(VacA).
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艰难梭菌A毒素致细胞圆缩化和致死活性的相关性研究
艰难梭菌(Clostridium difficile)是人假膜性结肠炎和抗生素相关性腹泻的主要致病因子.其产生A、B两种与疾病有关蛋白毒素,其中由于A毒素具有肠道毒性而被认为是引起疾病的主要致病因子[1].A毒素的相对分子质量(Mr)很大,在未变性的状态下为(520~540)×103,在变性状态下降解为(220~240)×103左右,没有亚基分离.A毒素有肠道毒性、细胞毒性、小鼠致死活性、血球凝集活性、血管通透亢进等生物学活性.A毒素是一种可溶性蛋白,它通过受体介导的内吞作用进入细胞,诱导许多种哺乳动物组织和细胞发生细胞病变效应[1,2].A毒素对细胞的影响非常复杂,对A毒素的细胞毒性研究一般都是以细胞骨架变化引起的细胞形态变化即细胞圆缩化为敏感指标的,但是有报道认为细胞圆缩化后并不一定死亡[3].而国内虽然对艰难梭菌的分离、毒素精制、诊断方法及试剂方面有所研究,但还未对A毒素的细胞毒性展开工作.为此,我们采用非洲绿猴肾细胞Vero、人甲状腺乳头癌细胞TPC-1、人喉癌细胞HEP2、人肺癌细胞A549、人结肠癌细胞SW1116、人肝癌细胞SMMC7721等6种细胞系,探讨了在A毒素致细胞圆缩化和细胞致死活性之间的关系.