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苦参水提物促进L02和HepG-2细胞增殖的研究
目的:探讨不同浓度苦参水提液对细胞增殖的影响.方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度(5、2、1、0.5、0.05、0.025、0.005 mg/mL)的苦参水提物在不同的时间点(24、48、72 h)对HepG-2、L02细胞增殖的影响.10 g/(kg·d)的苦参水提液予ICR小鼠灌胃,10%含药血清培养L02细胞,MTr比色法检测不同的时间点(24、48、72 h)对细胞增殖的影响.以△OD值(各组加药平均值-正常组平均值)表征抑制或促进作用.结果:苦参水提物浓度≤2 mg·mL-时对细胞增殖有一定促进作用,尤其以0.5、1 mg·mL-1的促进作用明显(P<0.01),当苦参水提物浓度达到2 mg·mL-1,处理72 h时,细胞增殖出现抑制作用.含药血清能显著促进L02细胞的增殖.结论:苦参水提物在一定浓度范围内促进细胞增殖,高浓度抑制细胞增殖.
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淋球菌mtr外排系统研究进展
淋球菌多重耐药(mtr)外排系统控制着淋球菌对脂溶性因子(HAs)的耐受性.淋球菌的mtr基因系统包括mtr调控基因mtrR和mtrCDE基因复合物.mtrR基因编码的是一个转录抑制蛋白MtrR,调节mtrCDE基因的转录.mtrCDE基因复合物则分别编码淋球菌膜蛋白MtrC,MtrD,MtrE,组成的一个能量依赖型外排泵,能把HAs有效地排出细胞外.mtr基因系统中任何基因的突变、丢失、缺失或其编码蛋白结构的改变,都会影响淋球菌对HAs的耐受性.在转录水平上mtr系统对淋球菌的多重耐药性的调节分为两种机制,一种是mtrR依赖调节,另一种是非mtrR依赖调节,另外还存在有mtrA基因对其进行正向调控.
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加味四君子汤含药血清对B16恶性黑色素瘤细胞侵袭和MMP2、MMP9表达的影响
目的:研究加味四君子汤含药血清对恶性黑色素瘤细胞B16侵袭及其相关机制的研究.方法:实验分为空白对照组、血清对照组、加味四君子汤4.61 g/kg、9.22 g/kg、18.44g/kg和顺铂5μg/ml组.分别应用MTT法确定药物佳作用时间;Transwell实验检测B-16细胞侵袭能力,应用Western Blot方法检测基质金属蛋白酶(metalloprotease,MMP)2和9蛋白的表达.结果:加味四君子汤以剂量依赖方式抑制B16恶性黑色素细胞增殖,作用24h为佳作用时间;与空白对照组和血清对照组相比,9.22 g/kg中药组、18.44g/kg中药组、5μg/ml顺铂组分别使B16细胞的侵袭能力显著降低,分别显著降低MMP2和MMP9蛋白表达水平,且两者呈现剂量依赖式降低,但5μg/ml顺铂组侵袭能力和MMP2和MMP9蛋白表达低于9.22 g/kg中药组,高于18.44g/kg中药组.结论:加味四君子汤含药血清能显著降低B16恶性黑色素瘤细胞侵袭,并且能够显著降低与B16恶性黑色素瘤细胞侵袭相关的蛋白MMP2和MMP9表达,提示加味四君子汤可能在抑制肿瘤侵袭转移中起着重要作用.
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外排系统与膜通透性的改变对淋球菌高水平多重耐药的影响
目的 探讨外排系统与膜通透性的改变对淋球菌多重耐药的影响.方法 PCR扩增淋球菌mtrR启动子区域包含13 bp回文序列在内的157个碱基片段并进行DNA测序分析;提取外膜蛋白,利用SDS-PAGE进行组成型的分析.结果 5株敏感株的mtrR启动子区域未发生突变,3株高水平多重耐药株的mtrR启动子区域13 bp回文序列均发生了单个A/T碱基的缺失,且均存在外膜孔蛋白表达的缺失.结论 mtrR启动子区域13 bp回文序列单个A/T碱基的缺失引起的mtrCDE外排泵表达增加与外膜孔蛋白表达的缺失或下降导致的膜通透性降低,在介导淋球菌产生高水平多重耐药中起一定的作用.