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  • 人RNF6基因原核表达载体的构建及其重组蛋白的表达

    作者:刘彤;李洋;李丹妮;李丰

    目的 构建人hRNF6基因的原核表达载体并诱导和鉴定其融合蛋白表达.方法 提取前列腺癌细胞CWR22Rvl的mRNA,反转录为cDNA.PCR扩增hRNF6全长编码基因,并将其克隆至GST融合表达载体pGEX5X-1,在E.coli BL21中诱导GST-hRNF6融合蛋白表达,并经免疫印迹鉴定结果.结果 hRNF6编码序列已被克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,双酶切及测序鉴定正确,并在E.coli BL21中获得了诱导表达,蛋白的分子量为104KD,免疫印迹检测到了融合蛋白表达.结论 成功构建hRNF6基因原核表达载体,诱导表达出GSTRNF6融合蛋白.

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