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壳多糖-胶原凝胶构建组织工程口腔黏膜固有层
背景:有研究探讨了以胶原/壳聚糖聚合物为支架材料构建组织工程人工皮肤的可行性.目的:拟探讨以壳多糖-胶原凝胶支架材料与口腔黏膜成纤维细胞在体外构建人工固有层的可行性.方法:口腔黏膜成纤维细胞取自成年鼠颊部、牙龈或腭部.以2×DMEM培养液、胎牛血清、胶原溶液、壳多糖等或2×DMEM培养液、胎牛血清、胶原溶液等按一定比例配置成凝胶溶液,将大鼠口腔黏膜成纤维细胞与上述凝胶溶液迅速混合制成口腔黏膜人工固有层,动态观察细胞生长状况和凝胶收缩情况.结果与结论:胶原-口腔黏膜成纤维细胞复合物、壳多糖-胶原-口腔黏膜成纤维细胞复合物体外培养1 d,口腔黏膜成纤维细胞在支架材料中生长良好,细胞呈长梭形,排列无一定方向.随时间推移,口腔黏膜成纤维细胞逐渐增多,凝胶颜色变浅,厚度变薄,分别于2,3 d后发生收缩.结果证实,口腔黏膜成纤维细胞可在壳多糖-胶原凝胶形成的三维空间结构生长并分泌基质,形成类似黏膜固有层的致密结缔组织.壳多糖-胶原凝胶是构建组织工程化口腔黏膜固有层的合适材料.
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壳多糖-胶原凝胶体外构建口腔黏膜固有层的可行性研究
目的 探讨以壳多糖-胶原凝胶为支架材料,利用口腔黏膜成纤维细胞(oral mucous fibroblast,OMF)在体外构建口腔黏膜人工固有层的可行性.方法 将2×DMEM培养液、胎牛血清、胶原溶液、壳多糖等按一定比例配置成凝胶溶液,大鼠OMF与上述凝胶溶液迅速混合制成口腔黏膜人工固有层,动态观察细胞生长状况和凝胶收缩情况.结果 成功建立大鼠OMF种子细胞库,原代细胞与传代细胞在形态和生长速度差异无统计学意义.壳多糖-胶原-OMF复合物(FPCCL)体外培养10d,OMF在支架材料中生长良好,细胞呈长梭形,排列无一定方向.随时间推移,OMF逐渐增多,凝胶颜色变浅,厚度变薄,3 d后发生收缩,7 d后则凝胶人工固有层稳定,无明显收缩.结论 OMF可在壳多糖-胶原凝胶形成的三维空间结构生长并分泌基质,形成类似黏膜固有层的致密结缔组织.壳多糖-胶原凝胶是构建组织工程化口腔黏膜固有层的合适材料.
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扶正活血解毒方干预ANE诱导口腔黏膜成纤维细胞I型胶原表达的实验研究
目的 观察槟榔提取液(areca nut extract,ANE)对口腔黏膜成纤维细胞I型胶原分泌的诱导作用及扶正活血解毒方的干预作用.方法 体外培养口腔黏膜成纤维细胞,ANE为诱导剂,扶正活血解毒中药药物血清(低、中、高)为干预物;用免疫细胞化学法检测细胞内I型胶原的表达,用酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)检测培养上清I型胶原的含量.结果 ANE对口腔黏膜成纤维细胞I型胶原的合成有促进作用(P<0.01),扶正活血解毒方含药血清(中、高)对ANE刺激下的FB胶原合成有抑制作用(P<0.05).结论 扶正活血解毒中药可下调ANE诱导的口腔黏膜成纤维细胞I型胶原的表达.
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槟榔碱对α平滑肌肌动蛋白在口腔黏膜成纤维细胞中表达的影响
目的 了解肌成纤维细胞与口腔黏膜下纤维性变(OSF)的关系并探讨肌成纤维细胞分化的来源和机制.方法 体外培养正常口腔黏膜成纤维细胞和OSF成纤维细胞,用免疫组织化学方法和RT-PCR方法检测α平滑肌肌动蛋白的表达,并观察槟榔碱对其表达的影响,同时用ELISA方法检测了槟榔碱对成纤维细胞合成TGFβ1的影响.结果 OSF来源的成纤维细胞中α平滑肌肌动蛋白表达明显高于正常口腔黏膜成纤维细胞,槟榔碱对体外培养成纤维细胞合成α平滑肌肌动蛋白和TGFβ1水平无明显影响.结论 肌成纤维细胞可能在OSF的发病中起作用;OSF中肌成纤维细胞的来源可能与槟榔成分对成纤维细胞的直接作用无关.
