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  • 人工合成多肽FGL对神经细胞模型PC12细胞增殖与凋亡的影响

    作者:付洪龙;马学晓;于腾波;陈伯华;李宁

    背景:FGL是NCAM的核心活性多肽片段,可直接作用于成纤维细胞生长因子受体1,激活NCAM的信号传导途径.目的:观察FGL人工合成多肽联合培养对PC12细胞增殖和凋亡的作用.方法:将培养的PC12细胞分为对照组和实验组,实验组预先加入1%的FGL多肽溶液.分别于培养1,3,5,7,9 d采用细胞计数试剂8法检测细胞增殖情况.将PC12细胞分为正常组、实验组和损伤组,损伤组加入H2O2刺激16 h.实验组加入H2O2与FGL人工合成多肽刺激16 h,流式细胞仪检测细胞凋亡,荧光定量PCR法检测PC12中的核转录因子κB mRNA表达.结果与结论:FGL人工合成多肽与PC12复合培养细胞生长良好,可明显促进PC12细胞的活性并且减低PC12 细胞凋亡并可明显降低凋亡模型中PC12细胞核转录因子κB基因的表达.说明FGL多肽可以明显促进PC12细胞增殖,并可以抑制PC12细胞凋亡.

  • 人工合成FGL多肽对大鼠PC-12细胞增殖和凋亡的影响

    作者:付洪龙;马学晓;于腾波;陈伯华;姚如永

    目的 探讨人工合成FGL多肽对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC-12细胞增殖和凋亡的影响.方法 设计并人工合成FGL多肽.培养PC-12细胞,取生长状态良好者,分为对照组和实验组,实验组中加入FGL多肽溶液.对照组预先用多聚赖氨酸包被培养板.分别于培养1、3、5、7、9 d采用细胞活性检测试剂盒(CCK-8)检测两组细胞增殖情况.取PC-12,待细胞贴壁融合80%后,换无血清的培养基继续培养16 h.对照组加入H2O2刺激16 h.实验组先加入FGL多肽预孵育30 min,再加H2O2刺激16 h.流式细胞仪检测两组细胞凋亡情况;荧光定量PCR法检测PC-12中的核因子(NF)-κB mRNA.结果 实验组培养1、3、5、7、9 d PC-12增殖数量均高于对照组;H2O2处理后,实验组PC-12凋亡数量及其中NF-κB mRNA的表达量均低于对照组(P均<0.05).结论 人工合成FGL多肽可促进PC-12细胞增殖,并抑制其凋亡.

  • FGL多肽自组装纳米纤维与神经干细胞生物相容性研究

    作者:张振兴;郑启新;吴永超;吴斌

    目的 观察组织工程支架材料FGL多肽组装纳米纤维和神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的生物相容性. 方法同相法合成FGL多肽两亲性分子(FGL peptide-amphiphile,FGL-PA),采用高效液相色谱仪和质谱仪进行纯化和分析.加入0.1mol/LHCI于FGL-PA溶液,降低pH值引发其自组装,透射电镜观察自组装后的材料.取新生1 d大鼠大脑皮质,培养大鼠NSCs,分别加入终浓度为0、50、100、200、400 mg/L FGL-PA,采用CCK-8试剂盒检测FGL-PA对细胞增殖的影响.将NSCs分别加入分化培养基(对照组:DMEM/F12、2%B27和10%FBS)和含FGL-PA的分化培养基(实验组:DMEM/F12、2%B27、10%FBS和100 mg/L FGL-PA)诱导分化,采用免疫荧光法检测FGL-PA对NSCs分化的影响. 结果 FGL-PA可自组装形成凝胶,透射电镜示其为纳米纤维,直径为10~20 nm,长度可达数百纳米.加入各浓度FGL-PA 48 h后,当FGL-PA浓度为50、100、200 mg/L时,吸光度(A)值显著增加,差异有统计学意义(P<0.05).NSCs诱导分化培养14 d,免疫荧光结果 显示对照组NSCs分化为神经元比例为46.35%4±1.27%,实验组为72.85%±1.35%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05). 结论 FGL-PA能自组装形成纳米纤维凝胶,具有良好的生物相容性和生物活性.

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