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pUC118文献资料
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人ski基因真核表达载体的构建及促细胞增殖作用
背景:c-Ski 既可促进组织修复,又能降低瘢痕形成,有望成为一个全新的基因治疗药物.目的:构建人ski 基因的真核表达载体,并对其促成纤维细胞增殖效果进行验证.方法:RT-PCR 法从人包皮培养原代成纤维细胞总RNA 中扩增出人ski 基因,连同真核表达启动子CMV 克隆到pUC118 载体上,酶切和测序验证后,应用脂质体将其转染到培养的大鼠皮肤成纤维细胞中.结果与结论:酶切和测序结果证实表达质粒构建成功,Western blot 显示Ski 蛋白在转染细胞中成功表达,且可显著提高转染细胞的增殖效应,说明以pUC118 为骨架的重组ski 表达质粒具有促进大鼠皮肤成纤维细胞增殖的作用.
