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强肌健力口服液对脾虚小鼠DNA合成的影响
目的:观察强肌健力口服液对实验性脾虚证小鼠DNA合成的影响,探讨该方防治脾胃虚损型重症肌无力的作用途径及中医脾肾相关的分子生物学基础.方法:实验于2005-06/07在广州中医药大学核医学实验室完成.选择健康雄性NIH小鼠69只,随机分为5组,即正常对照组(n=12)、脾虚模型组(n=15)、强肌健力口服液26 g/kg组(n=14)、强肌健力口服液13 g/kg组(n=15)及四君子汤组(n=13).除正常对照组外,各组小鼠均采用利血平复制脾虚证动物模型,腹腔注射利血平0.2 mg/(kg·d).①正常对照组腹腔注射生理盐水0.1 mL/(只·d).②强肌健力口服液26g/kg,13 g/kg组灌胃强肌健力口服液(由北芪、党参、升麻、白术、甘草等组成,每毫升含生药1.204g),给药剂量分别为26,13g/kg,1次/d.③四君子汤组灌服四君子汤(由党参、白术、茯苓、灸甘草组成)26g/kg,1次/d.各组均连续用药16 d.给药结束后,测定各组小鼠脾、胸腺、肾、肝、小肠等组织DNA含量的变化;并测定各组小鼠造模前及用药结束后体质量和脾、肾、胸腺、肝脏质量/体质量比值的变化.结果:69只小鼠全部进入结果分析,无脱失.①用药16 d后脾虚模型组脾脏、胸腺、小肠DNA含量均比正常对照组显著降低(q=3.45～4.96,P＜0.05～0.01),而肾脏组织DNA含量则升高(q=3.81,P＜0.05).②用药16 d后强肌健力口服液26,13g/kg组脾脏、胸腺DNA含量显著高于脾虚模型组[(20.73±4.44,12.30±4.61,7.37±4.43;12.76±2.12,11.58±2.46,8.41±3.86)DPMx104/g(q=3.22～12.43,P＜0.05～0.01)];强肌健力口服液13g/kg组肾脏、肝脏DNA含量显著升高(q=3.50,3.76,P＜0.05);而且体质量也显著高于脾虚模型组(q=9.98,9.94,P＜0.01),脾脏、胸腺、肾脏、肝脏组织质量/体质量比值也显著高于脾虚模型组(q=3.53～7.41,P＜0.05～0.01).结论:脾虚证的发生与DNA合成减少有关,强肌健力口服液能促进DNA合成,从而发挥其健脾益气、强肌健力的作用,但发现强肌健力口服液26g/kg组能促进DNA合成,而13g/kg组则有抑制DNA合成的倾向,其调控途径有待于进一步研究.而脾肾相关理论有助于指导临床辨证施治.
关键词： 重症肌无力/中药疗法 口服液 脾虚 肾虚 DNA/分析 -
强肌健力口服液对脾虚小鼠RNA合成的影响
目的:观察强肌健力口服液对实验性脾虚证小鼠RNA合成的影响,探讨该方治疗脾胃虚损型重症肌无力的作用途径.方法:实验于2005-10/11在广州中医药大学核医学实验室完成.①采用随机抽签法将4周龄健康雄性MH小鼠68只分为5组:正常对照组(n=13)、脾虚模型组(n=16)、强肌健力口服液高剂量组(n=13)、强肌健力口服液中剂量组(n=13)、四君子汤组(n=13).②采用利血平复制脾虚证动物模型,正常对照组动物腹腔注射生理盐水0.1 mL/d,同时灌服蒸馏水0.5 mL/d;脾虚模型组动物腹腔注射利血平0.2 mg/(kg·d),并灌服蒸馏水0.5 mL/d;强肌健力口服液高剂量组及中剂量组动物腹腔注射利血平0.2 mg/(kg·d),并灌胃强肌健力口服液(由北芪、党参、升麻、白术、甘草等组成,含生药120.4 g/L),给药剂量分别为26g/kg及13 g/kg,1次/d;四君子汤组动物腹腔注射利血平0.2mg/(kg·d),并灌服四君子汤(由党参、白术、茯苓、灸甘草组成).26g/kg,1次/d,连续用药16 d.测定各组动物脾脏、肾脏、胸腺、肝脏、心肌、小肠等组织RNA水平的变化,以及各组动物造模前后体质量和脾、肾、胸腺、肝脏、心肌组织质量体质量比值的变化.结果:在实验过程中因灌胃失误及造模等原因引起动物死亡,其中脾虚模型组4只,强肌健力口服液高剂量组3只,强肌键力口服液中剂量组织1只,四君子汤组1只,终进入结果分析为59只.①与正常对照组比较,脾虚模型组动物脾脏、肾脏、胸腺、肝脏、心肌、小肠组织中RNA含量均显著降低(Q=5.07～18.92,P均＜0.01);用药16 d后强肌健力口服液26 g/kg组能使脾脏、肾脏、肝脏、小肠组织中RNA含量显著升高(Q=4.45～6.11,P＜0.05或0.01);强肌健力口服液13g/kg组能使肾脏、胸腺、肝脏、小肠组织RNA含量显著升高(Q=3.47～5.24,P＜0.05或0.01);②实验前各组小鼠体质量差异不显著(P=0.863);实验结束后脾虚模型组小鼠体质量明显比正常对照组减轻(Q=17.08,P＜0.01);强肌健力口服液和四君子汤组小鼠体质量比脾虚模型组显著升高(Q=4.73～7.76,P均＜0.01).③脾虚模型组小鼠脾脏、肾脏、胸腺、肝脏、心肌组织质量比正常对照组减轻(Q=6.36～12.83,P均＜0.01),且脾脏、肾脏、胸腺组织比值比正常对照组显著降低(Q=3.01～5.13,P＜0.05或0.01);强肌健力口服液和四君子汤组能使小鼠脾脏、肾脏、胸腺、心肌、肝脏组织质量增加(Q=3.57～10.51,P＜0.05或0.01),同时能升高脾脏、肾脏、胸腺、心肌组织比值(Q=3.01～7.28,P＜0.05或0.01).结论:脾虚证的发生与RNA合成减少有关,强肌健力口服液对RNA合成有促进作用,从而发挥其健脾益气、强肌健力作用.
关键词： 重症肌无力/中药疗法 口服液 脾虚 RNA/分析 -
黄芪复方对实验性自身免疫性重症肌无力模型大鼠神经肌肉接头超声微结构的影响
目的:复制实验性自身免疫性重症肌无力模型大鼠,观察中药黄芪复方干预后其神经肌肉接头超微结构的变化.方法:实验于2001-01/2004-12在辽宁中医药大学附属医院完成.①选取雌性Lewis大鼠24只,随机数字表法分为模型组、正常组、中药组、西药组,6只/组.②电鳐购于美国加州,捕捞后取出电器官空运,-60℃冻存.用冷磷酸盐缓冲液将电鳐的电器官制成匀浆,制备粗提物,亲和层析技术分离提纯乙酰胆碱受体用于大鼠免疫.③除正常组外,其余组均将含有30μg乙酰胆碱受体的弗氏完全佐剂200μL注射于鼠两后足垫皮内进行初次免疫,3周后行二次免疫,将含有20 μg乙酰胆碱受体的弗氏完全佐剂200μL注射于鼠两前足垫皮内,建立实验性自身免疫性重症肌无力动物模型.④初次免疫后,观察各组大鼠肌无力症状(叫声低微与活动减少是判断实验性自身免疫性重症肌无力大鼠的首发症状),并根据Lennon标准进行评分(分为0～3分,分数越高代表症状越严重).肌电图的改变亦是判断模型建立的重要指标,故采用肌电图检测重症肌无力衰减程度,以(第5个反应波幅-第1个反应波幅)/第1个反应波幅×100%表示.⑤成模后给予药物治疗.中药组灌胃给予自拟黄芪复方(黄芪、白术、枸杞、何首乌、枳壳、升麻)8.4g/(kg·d);西药组灌胃给予强的松片5.4 mg/(kg·d);正常组及模型组均灌胃给予等体积生理盐水.各组给药1次/d,连续1个月.处死大鼠,电镜下观察神经肌肉接头超微结构的变化.结果:模型组2只、西药组1只大鼠因肌无力症状恶化于初次免疫后第3周死亡脱落,共21只大鼠进入结果分析.①肌无力症状Lennon标准检测结果:模型组、中药组、西药组大鼠于初次免疫后17 d开始相继出现体质量下降、活动减少、叫声低微等肌无力症状,按Lennon分级评为1分;3只症状迅速恶化,呈濒死态,评为3分,随后1周内相继死亡,其余大鼠呈慢性发病.正常组大鼠均无肌无力症状表现.②重症肌无力肌电图检测结果:初次免疫后第4,8周,正常组大鼠腓肠肌电图波幅均无明显变化;而模型组、中药组、西药组大鼠肌电图波幅衰退程度均大于15%,证明造模成功.③给药1个月后各组大鼠神经肌肉接头超微结构电镜结果:正常组突触前、后膜结构完好;模型组突触间隙加大,神经肌肉接头褶排列紊乱,局部溶解消失,突触小泡数量减少;中药组出现新生轴突终末分支,内含丰富的突触小泡;西药组则无新生轴突,神经肌肉接头褶排列紊乱、溶解消失,突触前部线粒体及其他细胞器空泡化依然明显.结论:实验性自身免疫性重症肌无力动物模型经中药黄芪复方治疗后,可促进其神经肌肉接头新生轴突的产生,并增加突触小泡数量,从而减轻突触损伤.
关键词： 黄芪/治疗应用 重症肌无力/中药疗法 神经肌肉接头 -
强肌健力口服液影响脾虚小鼠蛋白质合成的效应
目的:观察强肌健力口服液对实验性脾虚证小鼠蛋白质合成的影响.方法:实验于2005-08/09在广州中医药大学核医学实验室完成.采用随机抽签法将4周龄健康雄性NIH小鼠78只分为正常对照组(n=14)、脾虚模型组(n=17)、强肌健力口服液高剂量组(n=15)、强肌健力口服液中剂量组(n=17)、四君子汤组(n=15).采用利血平复制脾虚证动物模型,正常对照组动物腹腔注射生理盐水0.1 mL/(只·d),同时灌服蒸馏水0.5 mL/(只·d);脾虚模型组动物腹腔注射利血平0.2 mG/(kg·d),并灌服蒸馏水0.5 mL/(只·d);强肌健力口服液高剂量组及中剂量组动物腹腔注射利血平0.2mg/(kg·d),并灌胃强肌健力口服液(由北芪、党参、升麻、白术、甘草等组成,每毫升含生药1.204 g),给药剂量为26g/kg及13 g/kg,1次/d;四君子汤组动物腹腔注射利血平0.2 mg/(kg·d),并灌服四君子汤(由党参、白术、茯苓、灸甘草组成)26g/kg,1次/d,连续用药16 d.测定各组动物脾、胸腺、肾、肝、小肠等组织蛋白质水平的变化,以及各组动物造模前后体质量和脾、肾、胸腺、肝脏质量的变化.结果:在实验过程中因灌胃失误及造模等原因引起动物死亡,其中正常对照组1只,脾虚模型组5只,强肌健力口服液高剂量组3只,四君子汤组2只,终进入结果分析67只.①与正常对照组比较,脾虚模型组动物脾脏、肾脏、肝脏、小肠组织蛋白质含量均显著降低(Q=10.64,8.06,14.71,11.22;P均＜0.01),胸腺组织蛋白质含量则升高(Q=10.68;P＜0.01),心肌组织则无改变;强肌健力口服液及四君子汤能使脾脏、肾脏、肝脏组织蛋白质含量升高(Q=3.67,2.93,3.78,3.95;P均＜0.05);同时使胸腺蛋白质含量降低.②实验前各组小鼠体质量差异不显著(P=0.993);实验结束后脾虚模型组小鼠体质量明显比正常对照组减轻(Q=17.32,P＜0.01);强肌健力口服液和四君子汤组小鼠体质量比脾虚模型组显著升高(Q=6.69,5.03,8.30,P均＜0.01).③脾虚模型组小鼠脾脏、肾脏、胸腺、肝脏、心肌组织质量比正常对照组减轻(P均＜0.01);强肌健力口服液和四君子汤组小鼠脾脏、肾脏、胸腺、肝脏、心肌组织质量增加.结论:强肌健力口服液对蛋白质合成有促进作用,从而发挥其健脾益气作用.
关键词： 重症肌无力/中药疗法 口服液 脾虚 蛋白质/分析 -
邓铁涛教授临证中脾胃学说的运用(一)
邓铁涛教授在其长达半个多世纪的医疗、教学、科研实践中,始终重视脾胃学说,脾胃学说之研究已成为邓老整个学术思想的重要组成部分.现撮其要将学习的一些体会整理如下.
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强肌健力饮对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-性腺轴作用的实验研究
[目的]观察强肌健力饮对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-性腺轴作用的影响.[方法]将SD大鼠随机分为正常对照组,肾阳虚模型组,强肌健力饮低、中、高剂量组(剂量分别为7.8、15.6、23.4 g·kg-1·d-1)、右归丸组(剂量为5.8 g·kg-1·d-1),除正常对照组外,均采用氢化可的松(剂量为25 mg·kg-1·d-1)肌肉注射复制肾阳虚大鼠模型.观察动物的一般状态,计算下丘脑、睾丸指数并对睾丸做组织形态观察,采用放射免疫分析法检测血清睾酮(T)和雌二醇(E2)含量.[结果]强肌健力饮能显著降低下丘脑指数,升高肾阳虚模型大鼠血清T含量及降低E2/T比值(均P＜0.01),而E2含量无明显变化(P＞0.05);组织形态学观察发现,强肌健力饮各剂量组睾丸曲精小管内精细胞体积明显大于肾阳虚模型组,精原细胞核染色质和初级精母细胞核染色体比较显著.[结论]强肌健力饮防治中医肾阳虚证的作用机制可能与其能调控性腺轴的水平有关.
关键词： 强肌健力饮/治疗作用 重症肌无力/中药疗法 肾阳虚证 睾酮/血液 雌二醇/血液 疾病模型 动物 大鼠 -
强肌健力方的临床与实验研究进展
通过查阅近10年来的国内相关文献,综述了强肌健力方的临床应用及实验研究概况.强肌健力方在临床治疗重症肌无力、抢救重症肌无力危象等方面有明显疗效.强肌健力方的药理实验研究表明该药对肌松反应和神经肌肉接头、胃肠功能、下丘脑-垂体-肾上腺轴激素水平、组织病理学、核酸、蛋白质合成等能产生影响,提示该方在防治脾虚和肾虚等方面具有多层次的调节和修复作用,并有广阔的临床应用前景和研究价值.
