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3-羟基丁酸-4-羟基丁酸共聚酯负载人骨髓间充质干细胞在骨组织工程中的应用
背景：3-羟基丁酸-4-羟基丁酸共聚酯(P3HB4HB)是近年来受到重视的聚羟基脂肪酸酯族组织工程支架材料，具有良好的生物相容性和细胞黏附性以及优良的力学性能，在组织工程研究领域显示出良好的应用前景。
目的：验证P3HB4HB支架材料与人骨髓间充质干细胞的体外生物相容性及体内异位成骨能力。
方法：①将第5代人骨髓间充质干细胞种植于P3HB4HB三维支架上使用成骨诱导液培养5 d，采用吖啶橙荧光染色及扫描电镜观察细胞在支架上的生长情况；②将第5代人骨髓间充质干细胞种植于P3HB4HB支架上体外使用成骨诱导液培养为实验组，不使用成骨诱导液培养为对照组，两组培养14 d后分别植入裸鼠皮下，植入后16周时取出行苏木精-伊红染色，Vonkossa染色和Ⅰ型胶原免疫组化染色检测植入物体内异位成骨情况。
结果与结论：①吖啶橙荧光染色显示细胞黏附于支架材料表面，生长良好；②扫描电镜观察成骨诱导的人骨髓间充质干细胞在P3HB4HB支架上生长良好，细胞产生丰富的细胞外基质；③植入16周时大体观形成骨样组织，Vonkossa 染色、Ⅰ型胶原染色呈阳性，苏木精-伊红染色见较多成骨细胞，有典型的骨陷窝出现，对照组无骨组织形成；④研究表明P3HB4HB适合作为骨组织工程支架材料。 -
P3HB4HB-(GE-PVA)纤维膜载人骨髓间充质干细胞的生物相容性研究
目的:探讨人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)在同轴电纺3-羟基丁酸4.羟基丁酸共聚酯(P3HB4HB)-明胶(GE)-聚乙烯醇(PVA)纤维膜上的生物相容性.方法:将第5代hBMSCs细胞接种在同轴电纺P3 HB4HB-(GE-PVA)纤维膜上作为实验组,单纯培养的hBMSCs细胞为对照组;采用MTS比色法观察接种hBM-SCs细胞后1、2及4h时两组细胞吸光度(OD)值,并测定接种hBMSCs细胞后的第1、3、5及7天时两组的细胞增殖情况;采用吖啶橙(A0)荧光染色及扫描电镜(SEM)观察细胞-材料复合物培养第5天时纤维膜的外观及结构,同时观察hBMSCs细胞的生长情况.结果:随培养时间的增加,两组接种的hBMSCs细胞OD值呈上升趋势,实验组培养4h时OD值高于对照组(P＜0.05);细胞增殖实验发现,2组hBMSCs细胞的OD值随培养时间延长而升高,实验组hBMSCs细胞的OD值高于对照组(P＜0.05);同轴电纺P3 HB4 HB-(GE-PVA)纤维膜外观呈白色膜状、质地均匀,SEM见纤维直径均匀一致,接种到纤维膜生长5d的hBMSCs细胞形态舒展、细胞间相互连接,AO染色可见完整的细胞膜,大量细胞黏附于纤维膜表面.结论:同轴电纺P3HB4HB-(GE-PVA)纤维膜与hBMSCs有良好的生物相容性.
