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干扰foxM1基因表达可增强骨髓间充质干细胞的成骨分化能力
背景:foxM1基因被认为参与了干细胞分化命运的调控,但其对间充质干细胞成骨分化的影响尚未见报道,关于foxM1基因的研究也主要集中于肿瘤领域.目的:探索干扰foxM1基因表达水平对骨髓间充质干细胞成骨分化能力的影响.方法:全骨髓贴壁法培养SD大鼠(中山大学实验动物中心提供)骨髓间充质干细胞,构建含嘌呤霉素抗性基因的foxM1 shRNA重组慢病毒载体并转染大鼠骨髓间充质干细胞,经嘌呤霉素筛选建立foxM1稳定敲低细胞株,另设置空病毒载体组以及未转染组.使用骨髓间充质干细胞成骨诱导分化培养基诱导培养并行茜素红染色检测其成骨分化能力,使用定量RT-PCR检测成骨相关基因的表达水平,同时提取胞核蛋白,Western blot检测β-catenin蛋白表达水平.结果与结论:①与空病毒载体组以及未转染组比较,foxM1敲低的大鼠骨髓间充质干细胞经成骨诱导分化后形成的骨结节数量明显增多,成骨相关基因col1a1和runx2表达水平均显著升高,但胞核β-catenin蛋白水平无明显改变;②干扰foxM1基因表达可增强骨髓间充质干细胞的成骨能力.
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妊娠期糖尿病患者外周血Sfrp5、FoxM1水平与胰岛素抵抗的关系
目的 探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者血清分泌型卷曲相关蛋白5(Sfrp5)、血浆Fox基因家族成员FoxM1水平与胰岛素抵抗的关系.方法 选择GDM患者56例(GDM组)及正常产妇56例(对照组),采集空腹静脉血检测空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FPG),并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),分别采用ELFSA法和实时荧光PCR法检测血清Sfrp5水平及血浆FoxM1 mRNA水平,并分析其与HOMA-IR的相关性.结果 GDM组血清FPG、FINS、HOMA-IR和血浆FoxM1 mRNA水平均高于对照组(P均<0.05),GDM组血清Sfrp5水平低于对照组(P<0.05).GDM患者HOMA-IR与血清Sfrp5水平呈负相关(r=-0.571,P<0.01),与血浆FoxM1 mRNA水平呈正相关(r=0.613,P<0.01).结论 GDM患者血清Sfrp5水平降低且与胰岛素抵抗呈负相关,血浆FoxM1水平增加且与胰岛素抵抗呈正相关.
关键词： 妊娠期糖尿病 胰岛素抵抗 foxM1基因 分泌型卷曲相关蛋白5 -
妊娠期糖尿病孕妇中FoxM1基因的表达及其与胰岛素的关系
目的 探讨妊娠期糖尿病孕妇中FoxM1基因表达变化以及与胰岛素的关系.方法 选择东莞市石碣医院产科门诊行产检的GDM孕妇、正常孕妇各100例作为研究对象,分别为研究组和对照组,采用放射免疫法检测两组孕妇血清胰岛素水平,并采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组孕妇血液中FoxM1基因表达.结果 确诊GDM时,研究组孕妇的血清胰岛素表达水平明显高于对照组孕妇(t=12.22,P＜0.05);分娩后6h,两组孕妇的血清胰岛素表达水平均下降,研究组孕妇的血清胰岛素表达水平仍明显高于对照组孕妇(t=13.67,P＜0.05).确诊GDM时,研究组孕妇血液FoxM1 mRNA表达水平(2.38±0.45)明显高于对照组孕妇(1.25±0.37)(t=19.40,P＜0.05);分娩后6h,两组孕妇血液FoxM1 mRNA表达水平均下降,研究组孕妇的血液FoxM1 mRNA表达水平(1.39±0.27)仍明显高于对照组孕妇(0.74±0.16) (t=20.71,P＜0.05).研究组孕妇血清胰岛素表达水平与其血液FoxM1基因表达呈正相关(r=0.56,P＜0.05).结论 FoxM1基因参与了GDM发病机制,且其表达与GDM孕妇血清胰岛素表达水平呈正相关.
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FOXM1基因在卵巢癌中的表达及紫杉醇对其表达的作用
目的 探究紫杉醇对卵巢癌治疗效果以及对相关基因FOXM1表达影响. 方法 通过荧光定量PCR,Western blot方法从RNA以及蛋白质水平分别对卵巢癌患者卵巢标本(卵巢癌组)及因其他原因而行卵巢切除的卵巢标本(对照组)中FOXM1基因的表达进行测定,同时运用酶联免疫吸附法(ELISA)检测二者血清中FOXM1蛋白含量及卵巢癌患者服用紫杉醇后不同时间段(1、2、3、4、5、6月)血清FOXM1含量变化. 结果 卵巢癌患者卵巢中FOXM1基因在mRNA以及蛋白水平的表达量、血清中FOXM1含量均显著高于对照组(P＜O.05);与治疗前相比,卵巢癌患者服用紫杉醇后血清中FOXM1含量随治疗时间的延长逐步降低(P＜0.05),但治疗6个月后,仍显著高于对照组(P＜0.05). 结论 FOXM1基因与卵巢癌发病之间存在密切关系,服用紫杉醇可以降低患者体内FOXM1基因表达量.
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FoxM1基因与妊娠期糖尿病的相关性研究
目的:探讨FoxM1基因与妊娠期糖尿病(GDM)的相关性.方法:选取东莞市石碣医院2015年1月至2016年6月收治的GDM孕妇和正常孕妇各100例,分别记为GDM组和正常组,分别测定两组孕妇妊娠24 ～ 28周、34 ～ 36周以及分娩后的6～ 24 h空腹血糖、糖化血红蛋白、胎盘催乳素以及空腹胰岛素、FoxM1 mRNA和FoxM1蛋白表达水平,此外GDM组患者还需在经过治疗后血糖正常且稳定1周后采集空腹血液标本测定上述指标,比较两组孕产妇上述指标的差别.结果:GDM组孕妇治疗前和治疗后空腹血糖和糖化血红蛋白均高于正常组,空腹胰岛素则低于正常组,差异均具有统计学意义(P＜ 0.05),两组孕妇不同时期催乳素水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05).正常组孕妇FoxM1 mRNA和FoxM1蛋白表达水平均高于GDM组,对比具有统计学意义(P＜0.05).结论:FoxM1 mRNA和FoxM1蛋白的低表达与孕妇GDM具有相关性,可以作为GDM患者的早期诊断标志物和治疗分子靶点.
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甲状腺乳头状癌TPC-1细胞中FoxM1的表达对Ras及CDK1的影响
目的 研究甲状腺乳头状癌中叉头框蛋白M1 (FoxM1)基因的表达以及其对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中的重要基因Ras及CDK1的影响,以探讨FoxM1在甲状腺乳头状癌中是否通过MAPK通路发挥作用.方法 用hFoxM1-RNA干扰处理甲状腺乳头状癌TPC-1细胞,抑制甲状腺乳头状癌TPC-1细胞中FoxM1基因的表达,使用实时荧光定量PCR法检测处理后的TPC-1癌细胞和未经处理的TPC-1癌细胞中Ras和CDK1基因的表达水平变化,观察甲状腺乳头状癌TPC-1细胞中FoxM1的表达对Ras和CDK1的影响.结果 与未经处理的甲状腺乳头状癌TPC-1细胞相比,使用hFoxM1-RNA干扰处理后的TPC-1细胞中FoxM1 mRNA表达明显降低(0.452 9比1.005 0,t=24.692 9,P＜0.01),Ras mRNA的表达相应升高(1.319 0比1.001 2,t=14.218 5,P＜0.01),而CDK1 mRNA的表达相应降低(0.767 5比1.008 1,t=10.763 4,P＜0.01).结论在甲状腺乳头状癌TPC-1细胞中FoxM1基因表达水平可对Ras和CDK1的表达产生影响,其在甲状腺乳头状癌TPC-1细胞中的作用机制可能与MAPK信号通路有关.
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FoxM1基因表达与甲状腺乳头状癌TPC-1细胞活性及侵袭性关系的研究
目的 研究FoxM1基因表达水平对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)细胞活性和侵袭性有无影响,探讨FoxM1与PTC疾病的相关性.方法 分别用hFoxM1-RNA干扰和硫链丝菌素处理PTC TPC-1细胞,观察处理后的癌细胞与未经处理的癌细胞在细胞活性、侵袭能力、迁移能力方面的变化,并使用Real-time PCR检测各组细胞中FoxM1基因的表达水平,观察硫链丝菌素对FoxM1基因表达水平的影响.结果 在TPC-1细胞中,使用hFoxM 1-RNA干扰和硫链丝菌素处理均能使细胞活性明显下降(P＜0.05),用2种方法处理后,细胞侵袭能力分别降低了约29.2％及38.63％,细胞迁移能力分别降低了约46.0％及47.5％,且PCR结果表明,hFoxM1-RNA干扰和硫链丝菌素处理均明显抑制TPC-1细胞中FoxM1基因mRNA的表达,分别抑制55％及38％.结论 FoxM1能促进PTC细胞的侵袭转移,其作为潜在的肿瘤标志物值得关注,而硫链丝菌素能抑制肿瘤细胞中FoxM1的表达.
