首页 > 文献资料
-
明胶纤维支架促进人牙髓干细胞的成纤维分化
背景:牙髓炎、牙髓坏死使得牙齿丧失活力,牙质变脆易折裂,并且失去牙髓免疫防御反应,如何实现牙髓组织再生成为口腔领域研究热点.支架材料的理化性质、生物相容性等对于干细胞的增殖和分化起关键作用.目的:探讨明胶纤维支架是否能够促进牙髓干细胞向成纤维细胞分化.方法:通过静电纺丝法合成不同浓度的明胶纤维支架,利用扫描电镜观察支架的表面形貌,拉伸实验检测明胶纤维支架的物理学性质.将人牙髓干细胞接种于支架材料表面,利用 MTT 和 RT-PCR 方法检测明胶纤维支架对人牙髓干细胞增殖和成纤维分化能力的影响.结果与结论:①7.5%的明胶纤维支架纤维直径为(2.02±0.36) μm,交联后纤维直径增大,为(3.15±0.52) μm;15%的明胶支架纤维出现粘结,交联后粘结情况更加显著,纤维结构丧失,呈现平面结构;②两种明胶纤维支架均能促进人牙髓干细胞的黏附和生长,第7天时,7.5%明胶纤维支架上的细胞数量明显高于15%明胶纤维支架(P < 0.05);③7.5%明胶纤维支架组Collagen Ⅰ、α-SMA、Periostin和Fibronectin的表达水平高于15%明胶纤维支架组(P < 0.05);④结果表明,7.5%明胶支架的多孔纤维结构更利于细胞的增殖和向成纤维细胞分化.
-
不同代次大鼠骨髓间充质干细胞Wnt/β-catenin信号通路表达分析
目的 观察不同代次大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外增殖能力及其纤维分化倾向,为临床治疗及组织工程种子细胞的选择提供依据.方法 采用贴壁培养法分离培养大鼠MSCs,流式细胞术鉴定细胞表面标记;MTT法检测不同代次MSCs的增殖情况;蛋白质印迹法(Western Blot)检测MSCs Wnt通路相关蛋白的表达情况;实时聚合酶链式反应(Realtime-PCR)法检测不同代次MSCs中成纤维细胞分子标记表达.结果 流式细胞术鉴定结果证实我们培养的大鼠MSCs符合间充质干细胞的特征,且纯度高;MTT法检测显示P3代之后细胞的增殖能力明显高于P1、P2代,Western Blot检测显示细胞内Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达随培养代次增强,Real-time-PCR法检测结果证实P9代细胞开始出现成纤维分化倾向.结论 MSCs作为种子细胞不宜超过P9代,P3 ～ P7代具有纯度高、倍增快等优点,是能够满足组织工程细胞植入的种子细胞.
