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利用薄膜挤压法制备支撑脂双层膜
背景:人工支撑脂双层膜是接近细胞膜的体外仿生模型,构建结构与功能均类似于真实细胞膜的脂双层膜具有十分重要的意义.目的:探索表面均匀且流动性高的支撑脂双层膜的佳制备条件并检测指标.方法:采用薄膜挤压法,分别以孔径为0.1,0.2μm的滤膜对脂质体分子过滤10次,保留未过滤样品作为对照组,通过原子力显微镜对其表面粗糙程度进行检测,探讨制备均匀程度较高的脂双层膜所需滤膜的佳孔径.将160μL卵磷脂(10 g/L)分别与5,10,25μL荧光磷脂(1 g/L)进行混合,通过荧光漂白恢复技术对脂双层膜的流动性进行检测,探讨卵磷脂与荧光磷脂的适比例.结果与结论:原子力显微镜实验结果显示,经过孔径为0.1μm滤膜过滤所得的脂双层膜表面均匀程度高(P<0.01),其表面均方根粗糙度为(0.432±0.181)nm,当滤膜孔径大于0.1μm时,脂双层膜表面均匀程度差且存在较多的未铺展开脂质体囊泡.荧光漂白恢复实验结果显示,采用孔径为0.1μm滤膜过滤的脂双层膜荧光恢复程度高,当卵磷脂(10 g/L)与荧光磷脂(1 g/L)体积比为160:10时,采用孔径为0.1μm滤膜过滤的脂双层膜荧光恢复程度达到90%,且扩散系数大于1μm2/s,符合优质脂双层膜的标准.实验提示利用薄膜挤压法制备脂双层膜时,卵磷脂与荧光磷脂的适比例以及佳滤膜孔径.