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comD基因文献资料
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长臂同源多聚酶链反应法构建变形链球菌comD基因同源重组DNA片段
目的 构建变形链球菌UAl59密度感应相关的comD基因同源重组DNA片段,为利用同源重组原理构建基因功能丧失菌株做准备.方法 通过NCBI基因数据库获取变形链球菌的DNA序列,利用聚合酶链反应技术分别扩增变形链球菌 UA159 comD基因上、下游片段及抗红霉素基因片段,再通过长臂同源多聚酶链反应将这3个片段连接起来,形成同源重组DNA片段.结果 经过 PCR反应和琼脂电泳分析,得到了一个碱基数为3个单片段总和的连接片段,测序结果显示连接片段为预期的comD同源重组片段.结论 成功构建了变形链球菌UA159 comD基因同源重组DNA片段,可直接用于细菌转化构建comD基因缺陷菌株.
关键词： 变形链球菌 comD基因 长臂同源多聚酶链反应 同源重组 转化
