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Tremor大鼠皮质内ERK信号通路相关蛋白表达的变化
目的研究ERKλ信号通路相关蛋白在癫痫状态下的改变,以探讨ERK信号转导通路在癫痫发病机制中的作用。方法实验分为两组,分别为Tremor大鼠组和Wistar大鼠组。通过Western Blot方法检测两组大脑皮质内ERK蛋白和p-ERK蛋白含量的异常变化。结果通过PCR鉴定了Tremor大鼠,试验分为Tremor组(实验组)和Wistar组(对照组)。利用western Blot方法测定ERK1/2和p-ERK1/2蛋白在Tremor大鼠和Wistar大鼠的皮质中均有表达, Tremor大鼠的ERK1/2和p-ERK的蛋白含量分别为0.1403和0.7344, Wistar组大鼠的ERK1/2和p-ERK的蛋白含量分别为0.1709和0.9754。结论 ERK1/2和p-ERK蛋白在癫痫大鼠皮质内的表达显著减少,说明ERK信号通路在癫痫状态下被抑制。
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HPLC法测定tremor大鼠脑组织中谷氨酸和GABA含量
目的 建立测定tremor大鼠(tm)脑内海马组织中GLU及GABA浓度的高效液相色谱(HPLC)方法.方法 冰上剥离13 wk的tm/Wistar大鼠海马组织,低温匀浆处理,利用邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生HPLC法结合荧光检测器测定GLU和GABA的含量.0.1 mol·L-1醋酸钾和甲醇进行二元梯度洗脱,峰面积定量.结果 GLU的线性方程为=1E+06X(r2=0.9937),线性范围为0.15～5.88 mg·L-1,具有良好的线性关系,在 0.74、1.47、3.68 mg·L-1 3个浓度下样本回收率分别为 97.7%、98.9%、100.5% ;样品中GLU日内变异系数为3.8%,隔日测定后,日间变异系数为5.9%;GABA的线性方程为=4E+06X(r2=0.998),线性范围为0.10～2.15 mg·L-1,具有良好的线性关系,在0.2、0.5、1.0 mg·L-1 3个浓度下样本回收率分别为 98.3%、101.0% 、102.7% ;样品GABA日内变异系数为2.3%,隔日测定后,日间变异系数为3.9%. 结论该方法较简便、快速且干扰相对较小,满足测定要求,可用于氨基酸的含量测定研究.
