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T细胞受体γ基因重排用于蕈样肉芽肿的分子生物学诊断
目的:探讨检测T细胞受体γ(TCR-γ)基因重排的方法用于蕈样肉芽肿(MF)早期辅助诊断.方法:采用"一步法"提取10%福尔马林固定、石蜡包埋组织的DNA作为模板,聚合酶链反应/琼脂糖凝胶电泳方法,检测46例蕈样肉芽肿,19例可疑蕈样肉芽肿,10例湿疹皮炎,5例类银屑病及5例正常皮肤石蜡包埋组织的TCR-γ(V1~V8和V9)基因重排.结果:与非MF病人相比,81%的二期蕈样肉芽肿病人显示TCR-γ基因重排,而非MF病人未见TCR-γ基因重排.结论:"一步法"提取的石蜡包埋组织的DNA作为模板的PCR技术可用于检测MF石蜡包埋组织的TCR-γ基因重排,且是一种灵敏度和特异性均较高的方法,可用作MF疾病的早期诊断指标.
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琼脂糖凝胶电泳及SSCP法在淋巴瘤克隆性TCRγ基因重排检测中的应用
目的 比较琼脂糖凝胶电泳和单链构象多态性分析(SSCP)法对淋巴瘤克隆性T细胞受体(TCR)γ基因重排的检测结果,探讨TCRγ基因重排的有效检测方法.方法 从T、B细胞淋巴瘤及反应增生性淋巴组织中提取DNA,分别用两组TCRγ基因重排通用引物进行PCR扩增,扩增产物分别进行琼脂糖凝胶电泳和SSCP.结果 T、B细胞淋巴瘤均出现克隆性TCRγ基因重排.SSCP法两组PCR产物在T细胞淋巴瘤中的阳性率分别为77.6%和75.9%,B细胞淋巴瘤均为10%;与SSCP相比,琼脂糖凝胶电泳中两组PCR扩增产物的假阳性率分别为15.3%和14.4%,所有反应增生性淋巴组织均出现假阳性.结论 T、B 细胞淋巴瘤中都存在克隆性TCRγ基因重排,仅用琼脂糖凝胶电泳检测可能出现假阳性,SSCP灵敏性较高.