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  • α1,2-岩藻糖转移酶基因转染对卵巢癌细胞RHG-I裸鼠移植瘤血管内皮生长因子的影响

    作者:李妍;林蓓;郝莹莹;刘娟娟;严丽梅;张帆;朱连成;张淑兰

    目的 探讨a1,2-岩藻糖转移酶基因转染对卵巢癌细胞株RMG-I裸鼠移植瘤血管内皮生长因子(VEGF)的影响.方法 利用已经建立的Lewis(y)抗原稳定高表达的卵巢癌细胞株RMG-I-H建立裸鼠移植瘤模型,利用免疫组织化学法测定基因转染前后裸鼠移植瘤组织Lewis(y)抗原及VEGF的表达.结果 基因转染后的裸鼠移置瘤组织细胞表面Lewis(v)抗原及VEGF的表达明显增加.转染组与非转染组之间有统计学意义(P均<0.05).结论 α1,2-岩藻糖转移酶基因转染使卵巢癌细胞株RMG-I裸鼠移植瘤血管内皮生长因子VEGF的表达明显增加.

  • α1,2-岩藻糖转移酶基因转染对卵巢癌细胞中HER2/neu表达及活性的影响

    作者:刘娟娟;齐跃;郝莹莹;林蓓

    目的:探讨α1,2-岩藻糖转移酶(α1,2-fucosyltransferase,FUT1)基因转染对人卵巢癌细胞中HER2/neu表达及活性的影响.方法:分别应用Real time PCR、免疫细胞化学染色和Western blot方法检测转染前后卵巢癌细胞中HER2/neu在基因、蛋白水平上的表达和磷酸化情况,利用免疫共沉淀方法检测HER2/neu蛋白上是否有Lewis(y)结构.结果:Real time PCR结果显示转染后细胞中HER2/neu mRNA表达明显增高.免疫细胞化学染色、免疫共沉淀结合Western blot检测到转染后卵巢癌细胞中HER2/neu蛋白和Lewis(y)抗原的表达均较转染前显著增加,HER2/neu蛋白上有Lewis(y)抗原结构.Western blot结果显示基因转染后HER2/neu的酪氨酸磷酸化水平显著升高.结论:Lewis(y)抗原是HER2/neu结构上的一部分,其表达增加不但促进卵巢癌细胞中HER2/neu的表达,还激活了HER2/neu受体酪氨酸激酶.

  • 岩藻糖基化抗原对卵巢癌细胞增殖信号通路PI3K/Akt的影响

    作者:穆庆;刘娟娟;郝莹莹;林蓓;张淑兰

    目的:探讨岩藻糖基化抗原对人卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ增殖的影响,初步探讨其与增殖信号通路磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)的关系.方法:观察PI3K/Akt通路抑制剂LY294002对岩藻糖基化抗原致卵巢癌细胞增殖的影响,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测岩藻糖基化抗原对细胞增殖的增强情况;Western blot观察RMG-Ⅰ的Akt磷酸化蛋白表达.结果:α1,2-FT基因转染后细胞中Lewis(y)抗原含量明显增高.随着Lewis (y)含量的增加,RMG-Ⅰ细胞增殖明显加快.Lewis(y)高表达卵巢癌细胞中磷酸化Akt 的表达水平明显增高.PI3K抑制剂LY294002显著抑制Lewis(y)高表达卵巢癌细胞的增殖.抗Lewis (y)抗体和LY294002不仅降低了转染前后细胞中磷酸化Akt的表达水平,还消除了存在于细胞间的高低差别.结论:过表达的Lewis(y)抗原通过激活PI3K/Akt信号转导通路促进卵巢癌RMG-Ⅰ细胞的增殖.抑制Lewis (y)抗原表达可能是一种治疗Lewis(y)高表达肿瘤的新方法.

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