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OTX1基因与遗传性骨性反(牙合)畸形相关性的研究
目的 研究与遗传性骨性反(牙合)畸形发生相关的基因,为阐明其分子遗传机制奠定理论和实验基础.方法 利用表达序列标签克隆策略选择了1个可能与遗传性骨性反颌畸形相关的候选基因--OTX1.采用PCR扩增后直接测序的方法筛查该基因的编码区突变和单核苷酸多态性(SNPs)位点的分布情况；应用SPSS13.0软件进行x2检验,检测SNPs在病例组和正常对照组中的Hardy-Weinberg平衡情况,并分析SNPs位点与遗传性骨性反颌的相关性.结果 病例组和对照组均未检测到OTX1基因外显子突变；rs17850223CG基因型频率在病例组和对照组间有统计学意义(P＜0.05).结论 OTX1基因SNPs和遗传性骨性反(牙合)相关,OTX1基因可能是遗传性骨性反(牙合)的易感基因.
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下调OTX1的表达抑制直肠癌Colo320细胞的增殖和侵袭
目的:下调直肠癌细胞系Colo320的 Orthodenticle 人同源盒基因1(orthodenticle homeobox 1,OTX1)的表达,观察其对Colo320细胞增殖和侵袭能力的影响.方法:构建OTX1 siRNA重组质粒载体pGPU6-OTX1,并转染Colo320细胞.应用qRT-PCR法检测OTX1的基因表达水平,Western blot法检测OTX1的蛋白表达,CCK-8法检测pGPU6-OTX1对Colo320细胞增殖能力的影响,Transwell小室法检测Colo320细胞侵袭能力的变化.结果:成功将构建的pGPU6-OTX1转染Colo320细胞.qRT-PCR和Western blot结果显示pGPU6-OTX1下调Colo320细胞OTX1的表达,CCK-8结果显示pGPU6-OTX1明显抑制SGC-7901细胞的增殖能力,Transwell结果显示下调OTX1的表达抑制Colo320细胞的侵袭能力.结论:下调OTX1的表达能够抑制直肠癌细胞Colo320的增殖和侵袭能力.
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下调OTX1的表达对胃腺癌SGC－7901细胞系增殖和凋亡的影响
目的：观察沉默胃腺癌细胞系 SGC －7901的 Orthodenticle 人同源盒基因1（orthodenticle homeobox 1， OTX1）对 SGC －7901细胞增殖能力和凋亡情况的影响。方法：构建 shRNA －OTX1重组质粒载体 pGPU6－OTX1，并应用脂质体转染法将其转染入 SGC －7901细胞。qRT －PCR 法检测 OTX1基因的表达；Western blot法检测 OTX1蛋白的含量；CCK －8法检测 pGPU6－OTX1对 SGC －7901细胞增殖能力的影响；Annexin Ⅴ－PE ／7－AAD 双染流式细胞术检测 pGPU6－OTX1对 SGC －7901细胞凋亡的影响。结果：成功将构建的 pGPU6－OTX1转染入 SGC －7901细胞；qRT －PCR 结果显示 pGPU6－OTX1下调 SGC －7901细胞 OTX1基因的表达；Western blot 结果显示 pGPU6－OTX1使 SGC －7901细胞 OTX1蛋白表达降低；CCK －8结果显示 pGPU6－OTX1明显抑制 SGC －7901细胞的增殖能力；流式细胞术结果显示 pGPU6－OTX1能够诱导 SGC －7901细胞凋亡。结论：pGPU6－OTX1能够抑制胃腺癌细胞 SGC －7901的增殖，并诱导凋亡。
