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从进化发育角度反思免疫有关问题
从进化和发育角度对免疫学领域中某些尚未明了的有关问题及其生物学意义进行了反思.认为淋巴免疫源于脊椎动物机体阶段或变态发育的同步监管功能,它可区分幼体细胞/成体细胞或处理"异步"细胞以防止异常或逆行发育;协同刺激信号分子可能是细胞逆行发育的标志,而MHC分子可能是发育或变态的阶段标志;抗原受体多样性和MHC分子多态性的初进化压力来自阶段发育中所需的自身识别,免疫的非我识别源于系统发育中积累的自我识别在个体内的冗余;复杂和难以理解的免疫现象可能只是由简单的进化机制形成的.
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狂犬病毒MHC限制性CTL与Th表位的预测与鉴定
目的:预测并筛选鉴定狂犬病毒糖蛋白及核蛋白BALB/c小鼠MHC限制性CTL和Th表位.方法:从NCBI数据库中获取狂犬病毒糖蛋白及核蛋白的完整氨基酸序列,然后运用生物信息学软件BIMAS、SYFPEITHI和RANKPEP对CTL表位及Th表位进行预测并合成相关抗原表位.BALB/c小鼠经狂犬疫苗免疫后,通过淋巴细胞增殖实验对预测的多肽进行初步筛选.初步筛选的多肽再利用ELISPOT和流式细胞法进行进一步筛选,检测指标主要包括细胞因子IFN-γ和IL-4的分泌水平以及多肽对CD3+CD4+/ CD3+CD8+T细胞亚群的影响情况.结果:经软件预测获得8条可能的CTL与Th表位,多肽合成后经分析各条多肽纯度大于90%.实验验证后证明2条多肽G367-381及G333-341能够成为细胞表位,其中G367-381作为Th表位,G333-341作为CTL表位.结论:G367-381及G333-341是狂犬病毒的细胞表位,可用于未来狂犬病毒表位疫苗的研究.
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B细胞表位基因疫苗诱导特异性免疫应答及特性研究
为研究特异性B细胞表位短肽为基础的DNA疫苗的免疫应答特性,将鸭乙肝病毒Pre-S中的P127-138 B细胞表位基因克隆到含多肽表达盒(peptide expression cassette,PEC)的载体中,体外转染C2C12肌肉细胞,用DOT-EIA检测表位短肽的表达,进一步分别免疫不同品系的BALB/c和C57BL/6小鼠,比较MHC限制性对免疫应答的影响.结果表明,重组pECk-b1b2载体可在体外瞬时高效表达,并保持原有的免疫活性;体内基因免疫能诱导针对表位短肽的特异性抗体;不同品系小鼠抗体产生动力学相似,但抗体滴度差异显著.这些结果提示,以B细胞表位为基础的基因免疫可诱导特异性免疫应答,为DNA疫苗的分子设计提供了新的思路和应用前景.
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CD3AK细胞抗肿瘤作用与MHC限制性关系
目的研究抗CD3单克隆抗体激活的杀伤细胞(anti-CD3McAb activated killer cells ,CD3AK细胞)杀伤肿瘤细胞作用与MHC限制性的关系.方法采用微量淋巴细胞毒实验方法测定CD3AK细胞及肿瘤细胞MHC表型,用MTT法测定CD3AK细胞杀伤活性.结果 (1)不同人来源的CD3AK细胞,其MHC表型不同,但对同种肿瘤传代细胞都有很强的杀伤作用,且不同人来源的CD3AK细胞间杀伤作用差异无显著性(P>0.05);(2)同一来源CD3AK细胞对不同肿瘤传代细胞株(MHC表型不同)的杀伤作用差异无显著性(P>0.05);(3)人外周血诱导的CD3AK细胞对鼠肿瘤细胞株(Yac-1)与对人肿瘤传代细胞株(K-562,Raji)一样具有很强的杀伤作用.结论 CD3AK细胞杀伤肿瘤的作用是非MHC限制的,在临床应用中可用正常人外周血诱导得到的CD3AK细胞体外培养增殖后输给肿瘤病人进行治疗.该效应细胞来源方便,可用于肿瘤术后清除残留肿瘤细胞,具有重要应用价值.
